u6内参基因
边贝筠3796最近在做microRNA的荧光定量PCR,用U6做内参,想请教一下,U6的Ct值在什么范围内,目的基因表达呈线性关系 -
贲念垂18562838301 ______ 我最近也要做mi RNA的荧光定量PCR,用U6做内参,但是苦于没有找到U6的基因序列(NCBI里面有好多种,不晓得哪一个是),宝生物那边以前有现成的U6引物,但现在不生产了,说只能自己提供基因序列,他们设计和合成,哎!想问一下楼主你的U6引物在哪个公司设计和合成的呀?需要提供基因序列么?是人的还是小鼠或其他物种的U6?如果方便的话,可否提供一下小鼠的U6基因序列呢?多谢!
边贝筠3796实时定量PCR内参基因和待测基因峰不同说明什么? -
贲念垂18562838301 ______ 内参基因和待测基因本来就不一样. 扩增曲线和溶解曲线不是一个概念.扩增曲线是每扩增一个循环,测量一次荧光强度.这个由底物的浓度和扩增效率所决定.目的基因和内参的浓度肯定不同,而且引物的序列不同,扩增效率也可能不一样,所以两者的曲线肯定有可能不一样. SyberGreen PCR,溶解曲线是PCR完成以后,对产物逐步加温,测量荧光强度的变化,而不是荧光强度本身.DNA双链在温度达到TM附近时,发生大量的解离,荧光强度的变化最大,出现峰值.这个峰值的位置是由PCR产物的TM值所决定的,和PCR产物的序列,GC比例有关.所以内参基因和目的基因的峰值肯定是不一样的.
边贝筠3796常用的内参基因及其使用范围?请大家推荐生物方面的论坛 -
贲念垂18562838301 ______ 内参即是内部参照,它们在各组织和细胞中的表达相对恒定,在检测基因的表达水平变化时常用它来做参照物 你可以去生物帮那里了解这方面的信息,那儿技术文档、视频资源丰富,我很喜欢到那里找想要的东西,而且还有很多软件可以下载,...
边贝筠3796纳智捷U6发动机怎么样?值得购买吗? -
贲念垂18562838301 ______ 纳智捷U6(优6)搭载1.6THP发动机,宝马同款发动机.用1.6THP发动机去拉纳智捷U6(优6)1.5吨的车子游刃有余,还能爆发出强劲的起步动力和中途加速能力.踩下油门踏板,1400转速就能进入到245扭矩的峰值状态,1400转/分以后动力充沛,加速到100公里/小时还不费力,之后的动力储备会稍微下降,100公里/小时的时候这台车的转速就可控制在2000转/分左右.这一性能应付市内交通拥堵路况跟车,可以说是小菜一碟.所以说纳智捷U6还是蛮值得去购买的.
边贝筠3796如何处理Real time PCR的数据结果 -
贲念垂18562838301 ______ ..不同的处理方法得到不同的结果... 做的是相对定量,SYBR Green, 选用2^(-△ △ Ct)法 一般大家是怎么处理的呢?比方实验设置如下: 内参基因:对照组1、对照组2、对照组3 实验组1、实验组2、实验组3 目的基因:对照组1、对照...
边贝筠3796什么是内参基因?常用内参基因有哪些? -
贲念垂18562838301 ______ 这个概念一般是用在定量PCR中.定量PCR是要检测某个基因的表达,降低或者提高,但是当你得出结果以后,你并不知道是它本身的表达降低/提高了,还是你操作过程中造成的误差(比如提RNA时的损失),所以这个时候需要同时检测另外的基因作为参照.这个基因就是内参基因,这类基因是生物体或者细胞中稳定表达的基因,表达量几乎不变.常用的内参基因如 β-actin,GAPDH,18s-rRNA等
边贝筠3796人,小鼠,大鼠的U6同源问题 -
贲念垂18562838301 ______ 还请踊跃发言....同源的意思就是序列相似度很高 至于是不是完全一样我就不知道了 你是要检测miRNA表达量 用U6归一化吧 我都是在公司直接买的反转录引物 所以也不确定是不是人和小鼠的U6完全一样 你可以查一下或者直接让公司合成
边贝筠3796内参基因定义是什么啊 -
贲念垂18562838301 ______ 内参基因是指在多种样本间恒定表达的已知参照基因,且其表达水平不受研究条件下处理方式的影响.用这个基因的表达水平能准确量化初始材料的载量.
边贝筠3796内参基因在植物的各组织中表达量都一致吗
贲念垂18562838301 ______ 不一定,一般内参基因(内对照基因)选用看家基因,如Actin基因在一些物种中地上和地下部会出现微小差异.如果做基因表达分析,同一器官或组织不同基因比较,以同部位的看家基因做内对照即可,如果不同部位或器官中某一基因的表达量对比,选择看家基因时要多参考一些文献,看选取的内对照基因是否有空间表达的明显差异.
边贝筠3796什么事管家基因?怎么用?内参基因又是怎么回事? -
贲念垂18562838301 ______[答案] 内参基因 内参即是内部参照,它们在各组织和细胞中的表达相对恒定,在检测基因的表达水平变化时常用它来做参照物.其作用是校正上样量、上样过程中存在的实验误差,保证实验结果的准确性.借助检测每个样品内参的量就可以...