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wb封闭后要洗膜吗

来源:baiyundou.net   日期:2024-09-27

陶皆栋2194western blot的具体步骤? -
邵田楠15681851054 ______ (PS 楼主可以百度嘛,网上关于WB的实验太多了) Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测.对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测. 一...

陶皆栋2194膝盖打完封闭针后多久才可以洗澡..
邵田楠15681851054 ______ 根据所述情况是膝部封闭治疗,这种情况一般要避免局部感染,所以不能洗.一般要6、7天局部针眼愈合好了才可以洗,因为封闭用的药物一般含有激素容易引起感染,所以要特别注意.

陶皆栋2194WB加完发光液暗室里可见整张膜都发光,是为什么呀???膜用百分之五的BSA封闭过夜的! -
邵田楠15681851054 ______ 如果整张膜都发光,压片后胶片上没有条带,整个一片都是黑乎乎的,应该是曝光过度了,和封闭没有太大关系. 建议改进方法:降低上样量、降低一抗或二抗浓度、降低抗体孵育时间、改用效果不那么强的发光液(如果只有一种发光液,可以将其用水稀释后再用),总之使用一切能减少曝光强度的方法. 整张膜都发光的补救方法:将膜用甲醇浸泡几秒(用镊子夹住膜在甲醇里涮2-3次即可),打断ECL和二抗的链接,TBST多洗几次,再用强度更弱的发光液或稀释过的发光液重新显色.

陶皆栋2194western blot!拜托各位大侠看看我跑出这个条带到底是什么问题啊. -
邵田楠15681851054 ______ 转膜电流太大了,有可能是转过了,建议你用丽春红染下膜,看看蛋白条带是否清晰.我一般用恒压75V,这样子电流只有一百多毫安,差不多也就是五十多KD的蛋白;背景高的话可以加大脱脂奶粉的浓度,用7.5%的,另外脱脂奶粉里可以再加入0.5%的二抗来源动物的血清,漂洗要彻底,TBST 10min 4次.不知你用的是哪个公司的抗体,我的一抗一般都是1:2000-1:5000,可能你抗体浓度也高了,但是你的目的条带并不清楚,所以也不敢确定.你可以尝试改一下条件,如果还不好的话,很有可能是你抗体的原因了.祝你好运! WB就是很奇怪,一次做出来不一定次次都能出来

陶皆栋2194western blot中一抗封闭时间过长会有什么后果 -
邵田楠15681851054 ______ 如果一抗封闭时间过长,非特异性的条带也会被染上一抗,这样再染二抗的时候,二抗和一抗结合,显影后背景深且非特异性条带会很多

陶皆栋2194洗照片的原理与Western blot的技术的联系 -
邵田楠15681851054 ______ 洗照片的原理是指WB最后一步的化学发光显影,最后得到的是显影胶片,跟医院看的CT,脑片类似的一个东东,现在也可以选择用荧光扫面直接观察膜,直接拍照的,这就不需要洗片子了

陶皆栋2194印迹杂交Western是什?印迹杂交Western是什么
邵田楠15681851054 ______ 在基因操作中,把DNA或RNA、蛋白质等在薄膜滤器上先经浸润,固定后,于薄膜滤... 抗原法是将待测抗原固定在膜上,加特异抗体与其结合、洗膜、显色、观察.夹心法...

陶皆栋2194Westernblot中脱脂奶粉封闭的是哪些蛋白?原理是什么?
邵田楠15681851054 ______ 脱脂奶粉中主要是乳清蛋白和酪蛋白.原理就是用非抗原的蛋白去封闭膜,避免标记抗体固定在膜上引起背景增高.

陶皆栋2194如何提高Western Blot分析的敏感性和特异性 -
邵田楠15681851054 ______ 1上样量调整到最佳2洗膜要彻底3封闭最好过夜4选择优质抗体和比例5择优显色液

陶皆栋2194封闭性痘痘可以敷面膜么 -
邵田楠15681851054 ______ 可以用清洁面膜

(编辑:自媒体)
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