wb封闭液的选择

阮侧转1525做蛋白质免疫印迹时一抗和marker怎么选择? -
鲜狗欧17892087571 ______ 一抗要针对你的目的蛋白选择特异性很强的相应抗体就可以了的,一般选择抗体说明书上说专门针对WB使用的抗体,而且一般应选择效价较高的抗体. 而MARKER则要取决于你的目的蛋白的分子大小了,选择相应的marker,marker最好要能比较容易的区分条带是否为目的蛋白,即在目的蛋白这一分子大小附近最好是能区分度较大,相应的分子大小的梯度要便于区分.

阮侧转1525WB封闭液与一抗稀释液一定要一致吗 -
鲜狗欧17892087571 ______ 要一致.用牛奶封闭就用牛奶稀释,BSA封闭就BSA稀释.高保真生物技术有限公司,实验整体外包服务商.you can contact me, Q :four zero six zero eight eight four six three

阮侧转1525dot blot,怎么加抗体 -
鲜狗欧17892087571 ______ dot blot点完膜以后,就可以按照正常的WB流程,封闭,然后封闭液稀释一抗去孵膜了,没有特别大的差别.如果担心信号太强,可以稍微多稀释一点抗体.

阮侧转1525WB中二抗孵育后不能马上显色,这时候膜最好怎么处理?转膜前NC膜最好又该怎么处理呢?抗体最好好用什么稀 -
鲜狗欧17892087571 ______ 漂洗几次后放在TBST或者你用来incubate的buffer(不加奶粉或者BSA)里面,放在4度 不同的抗体适用于不同的缓冲液,大部分可以用TBST

阮侧转1525荧光western blot应注意些什么 -
鲜狗欧17892087571 ______ 荧光western blot注意事项 1. 抗体浓度应当优化,在几种不同稀释度的抗体中孵育膜.选择信噪比最高的稀释度. 2. 从化学发光转到荧光检测时,一抗浓度应当增加 3. 许多封闭液都成功用于荧光检测.建议使用5% 酪蛋白、最多5%的...

阮侧转1525酶标板的蛋白质吸附性怎么测是用ELISA吗 -
鲜狗欧17892087571 ______ ELISA检测系统可谓是免疫学反应应用到科研生产中最为广泛最为灵敏的技术手段.可是在新老手操作过程中总是会出现或大或小的问题,本人在刚开始做ELISA时就面临很多困难,虽然有师兄师姐铺路,但还是常常做得一塌糊涂,比如说花板...

阮侧转1525western blot中,封闭液封闭完成后,需要用PBS或PBST洗涤滤膜,然后进行一抗孵育,在一抗孵育完成后为什么要清洗滤膜上的磷酸盐,磷酸盐对后续的加... -
鲜狗欧17892087571 ______[答案] 一抗孵育完成后洗膜是为了洗掉未和膜结合的抗体,而不是磷酸盐.只有洗干净非特异性结合在膜上的一抗,加二抗时才不会... PBS不适合AP系列,PBS/TBSS适合AP和HRP体系.另外,做磷酸化蛋白的WB,PBS不合适.

阮侧转1525western blot一抗后放了封闭 -
鲜狗欧17892087571 ______ 前面已经被人答了,我就答一下补充问题吧,一抗可以回收2~3次,但是效价会降低.Transfer旧液可以用来泡海绵滤纸和膜,每次转膜时还是用新液较好.

阮侧转1525用固定液固定的组织可以做wb吗 -
鲜狗欧17892087571 ______ Bouin's固定液是一种常规用于外科活检固定的良好固定液,用于固定大多数器官和组织,适用于结缔组织,尤其是三色染色时候更为理想,固定效果好,组织细胞结构完整.细胞和着色鲜明,但细胞质着色差.对固定好,尤其适用于含的淋巴结、组织和瘤标本的固定.固定液偏酸,PH为3-3.5,对抗原有一定的损坏,使组织收缩,不宜于标本的长期保存.有一定的毒性,应避免吸入和与皮肤接触.固定时间12-24小时.固定后组织被染成黄色.需用70-80%的酒精洗涤.在酒精中加入饱和的碳酸锂水溶液有助于清除组织块的黄色.固定后可以直接转入95%酒精中. 因此,在Bouin's中是不能固定超多20周的,最好,固定12-24小时后直接送病理科包埋保存.