wb封闭液bsa怎么配

太看耿951elisa blocking buffer 到底是5%的bsa还是0.5%bsa -
岑府胞18834138506 ______ 封闭液的浓度,与其他条件一样都需要摸索,在不同的ELISA中是不一样的,可以做几个浓度的作对比,选取合适的浓度.我现在用的封闭液也是BSA,一般是1%,2%,具体不同实验还是需要去摸索的.

太看耿9515%的BSA怎么配?5%的BSA怎么配
岑府胞18834138506 ______ 高级商务秘书与行政助理:BSA(Business Secretary & Administration)摩根BSA(Business Secretary & Administration)证书是由全球摩根商务顾问依据摩根标准(...

太看耿951WB加完发光液暗室里可见整张膜都发光,是为什么呀???膜用百分之五的BSA封闭过夜的! -
岑府胞18834138506 ______ 如果整张膜都发光,压片后胶片上没有条带,整个一片都是黑乎乎的,应该是曝光过度了,和封闭没有太大关系. 建议改进方法:降低上样量、降低一抗或二抗浓度、降低抗体孵育时间、改用效果不那么强的发光液(如果只有一种发光液,可以将其用水稀释后再用),总之使用一切能减少曝光强度的方法. 整张膜都发光的补救方法:将膜用甲醇浸泡几秒(用镊子夹住膜在甲醇里涮2-3次即可),打断ECL和二抗的链接,TBST多洗几次,再用强度更弱的发光液或稀释过的发光液重新显色. 望采纳,多谢!

太看耿951Elisa中的blocking buffer 、tween、BSA等问题 -
岑府胞18834138506 ______ Tween-20有复性抗原的作用,可提高特异性的识别能力.在做westen blot时,用惰性蛋白质或非离子去污剂封闭膜上的未结合位点可以降低抗体的非特异性结合.封闭剂应该封闭所有未结合位点而不替换膜上的靶蛋白、不结合靶蛋白的标委、也不与抗体或检测试剂有交叉反应.最常见的封闭剂是BSA、脱脂奶粉、酪蛋白、明胶和Tween-20(0.05 - 0.1%)稀溶液. 一抗的稀释看你试验的要求了.二抗你说的是酶标抗体吧,这个要稀释到工作浓度,后面的显色效果才是最佳的! BSA主要是封闭液中用到,其实作用显而易见是起到封闭效果,就是结合包被过程中未结合的结合位点,提高ELISA中的特异性结合,提高实验的精确度.一般浓度是1%-2%

太看耿951WB中二抗孵育后不能马上显色,这时候膜最好怎么处理?转膜前NC膜最好又该怎么处理呢?抗体最好好用什么稀 -
岑府胞18834138506 ______ 漂洗几次后放在TBST或者你用来incubate的buffer(不加奶粉或者BSA)里面,放在4度 不同的抗体适用于不同的缓冲液,大部分可以用TBST

太看耿951如何配1%d的BSA -
岑府胞18834138506 ______ 1g BSA,兑100ml的无菌水

太看耿951什么是Westernblot? -
岑府胞18834138506 ______ Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测.对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测. 一、原理 与Southern或Northern杂交方法类似,但...

太看耿951western blot 具体操作步骤 -
岑府胞18834138506 ______[答案] 什么是Westernblot? 最佳答案 Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测.对已知... 4、加入一抗(按合适稀释比例用0.01M PBS稀释,液体必须覆盖膜的全部),4℃ 放置12hr以上.阴性对照,以1%BSA取代一...

太看耿951荧光色染发操作方法 -
岑府胞18834138506 ______ 免疫荧光染色的主要原理是利用抗原抗体之间的特异性结合来显示目的蛋白,主要包括蛋白和一抗结合,其次是带有荧光基团的二抗识别并结合一抗,荧光显微镜下即可观察到荧光,下文主要列举了三种细胞免疫荧光染色的实验步骤.一、zo-1...

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岑府胞18834138506 ______[答案] Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测.对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一... 4、加入一抗(按合适稀释比例用0.01M PBS稀释,液体必须覆盖膜的全部),4℃ 放置12hr以上.阴性对照,以1%BSA取代...