wb的封闭液怎么配

祖雍梁2925化学题!关于溶液的配制!配制3mol/L的稀硫酸100ml,需要市售的浓硫酸含量是WB=0.98,密度P=1.84Kg/L多少毫升?如何配制? -
傅妮子18288203405 ______[答案] (3mol/L*0.1L*98g/mol)/0.98=30g 就是求硫酸的物质的量乘摩尔质量求硫酸的质量 30 g/1.84g/ml=16.3ml 配置时先用量筒取16.3 ml,加适量水(20ml) 冷却后转入容量瓶(100ml的)中,加水至刻度线,具体操作细节问你化学老师把

祖雍梁2925dot blot,怎么加抗体 -
傅妮子18288203405 ______ dot blot点完膜以后,就可以按照正常的WB流程,封闭,然后封闭液稀释一抗去孵膜了,没有特别大的差别.如果担心信号太强,可以稍微多稀释一点抗体.

祖雍梁2925BSA蛋白含量一般是多少? -
傅妮子18288203405 ______ 这个问题不具体,很难回答啊. BSA本身就是一种蛋白,它的浓度就是它的含量. 如果假设你这个问题是这么问的: 1. 抗体中,一般BSA蛋白的含量是多少?为了保护蛋白,通常会加入0.1%-1%,或者2mg/ml-15mg/ml的BSA作为保护蛋白,防止抗体降解 2. 进行WB或其他免疫实验室,封闭液中BSA的含量是多少?通常1-5%的BSA会用于制备封闭液 3. 蛋白定量时,标准品BSA的含量是多少?因为BSA要用于制作标准曲线,因此根据样品浓度,设置浓度梯度配溶液就好了.

祖雍梁2925BSA蛋白含量一般是多少? -
傅妮子18288203405 ______[答案] 这个问题不具体,很难回答啊. BSA本身就是一种蛋白,它的浓度就是它的含量. 如果假设你这个问题是这么问的: 抗体中... 或者2mg/ml-15mg/ml的BSA作为保护蛋白,防止抗体降解 进行WB或其他免疫实验室,封闭液中BSA的含量是多少?通常1-5...

祖雍梁2925急求 TMB做western blot 底物缓冲系统是什么 底物如何配置 拜托哪位高人指点一下 拜托拜托
傅妮子18288203405 ______ 这是我用的配方: buffer:0.1M 柠檬酸+0.2M Na2HPO4 pH5.0-5.4 TMB:2mg/ml溶于无水乙醇或者DMSO H2O2: 30% 工作液:0.5ml TMB+ 9.5ml buffer+ 1ul H2O2 但是要注意,其实WB并不是太适宜用TMB显色,除非你买专用的沉淀型TMB显色kit.因为通常TMB可溶于水,你晃一晃条带就晃没了.最好用DAB或者ECL.

祖雍梁2925WB中二抗孵育后不能马上显色,这时候膜最好怎么处理?转膜前NC膜最好又该怎么处理呢?抗体最好好用什么稀 -
傅妮子18288203405 ______ 漂洗几次后放在TBST或者你用来incubate的buffer(不加奶粉或者BSA)里面,放在4度 不同的抗体适用于不同的缓冲液,大部分可以用TBST

祖雍梁2925western blot一抗后放了封闭 -
傅妮子18288203405 ______ 前面已经被人答了,我就答一下补充问题吧,一抗可以回收2~3次,但是效价会降低.Transfer旧液可以用来泡海绵滤纸和膜,每次转膜时还是用新液较好.

祖雍梁2925如何提细胞的组蛋白做western blot -
傅妮子18288203405 ______ 组蛋白属于核蛋白,并且是核酸结合蛋白.做WB实验的样品处理时,可以选择核蛋白提取试剂盒,可以用supernuclease核酸酶进行核酸分子的降解.

祖雍梁2925谁做过wb检测磷酸化蛋白的,加不加磷酸酶抑制剂.加到封闭液里还是裂解液里? -
傅妮子18288203405 ______ 一般加到裂解液中,可以购买商业化的产品.推荐一个配方,矾酸钠和氟化钠.

祖雍梁2925elisa抗体稀释液可以用来稀释wb一抗吗 -
傅妮子18288203405 ______ 一般情况下是可以用的,两者并没有什么本质区别,试验一下,好用就行.