wb的电泳液和转膜液的配方

蒋刻秋2849western blot,不同配方的电泳缓冲液的作用有什么不同?不同配方的转膜缓冲液的作用有什么不同? -
云美帜17212939881 ______[答案] 电泳缓冲液都是为跑胶 转膜缓冲液(半干,湿转肯定不同)都是为转膜 问题问清楚点,你这样的问题,根本没法回答

蒋刻秋2849在WB中心肌细胞蛋白应该用什么做内参 -
云美帜17212939881 ______ 要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot.因为Western Blot操作相对简单方便,既可以定性分析表达产物,同时还可以指示目的蛋白量的相对变化.虽然,顺利的时候Western Blot做起来...

蒋刻秋2849WB上样缓冲液加加多少是怎么确定的 -
云美帜17212939881 ______ 上样缓冲液也有多种,一般是80ul的样本加20ul的上样缓冲液,这样基本上上样50ug的体积在10ul左右. 最好是测浓度,一般不超过30-40ug,上样缓冲液一般4*或者5*,这个没太大区别.

蒋刻秋2849western blot中目的蛋白分子量<=30KDa(30KDa,24KDa,14KDa)时,电泳和转膜(湿转)各需要多长时间较好? -
云美帜17212939881 ______ 电泳一般电泳就行. 浓缩胶 80v ,蛋白跑出后,电压增大为110v 跑结束即可. 湿转条件为100mv 时间为50-80分钟都行... 关键是采用的配胶浓度10%以上,12% 15%.

蒋刻秋2849Western Blot为什么必须要用内参 -
云美帜17212939881 ______ Western Blot为什么必须要用内参 要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot.因为WesternBlot操作相对简单方便,既可以定性分析表达产物,同时还可以指示目的蛋白量的相对变化.虽然...

蒋刻秋2849蛋白免疫印迹WB实验中,蔗糖会影响跑胶吗?谢谢各位. -
云美帜17212939881 ______ 会,会带电荷造成影响.说以上样的电泳缓冲液必须用三蒸水配置.

蒋刻秋2849请叙述DNA和蛋白质印迹技术的基本原理,简述Westernblo?
云美帜17212939881 ______ 印迹法(blotting)是指将样品转移到固相载体上,而后利用相应的探测反应来检测样... (1)电泳结束后将胶条割至合适大小,用转膜缓冲液平衡,5min*3次. (2)膜处理:...

蒋刻秋2849电泳实验中什么叫上样缓冲液?WESTERN BLOT 中需要进行电泳,其具体的各个缓冲液的作用是什么尤其是上样缓冲液 -
云美帜17212939881 ______[答案] 楼上的博士啊,人家用的是蛋白上样缓冲液,不是核酸电泳缓冲液. PAGE分离蛋白所用缓冲液一般使用Tris,溴酚蓝以及甘油;也可使用TBE,加入溴酚蓝和甘油.还可加入少量DTT和巯基乙醇. 作用主要是标记和指示电泳程度,还有给试样染色,便...

蒋刻秋2849什么是Westernblot? -
云美帜17212939881 ______[答案] Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测.对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一... (三)转移:(半干式转移) 1、电泳结束后将胶条割至合适大小,用转膜缓冲液平衡,5min*3次. 2、膜处理:预先裁好与...

蒋刻秋2849western blot 转移缓冲液的配方?查了资料,发现有些配方和我现在做的有差别,怀疑影响了我的实验效果~转移缓冲液是不是可以和电泳缓冲液共用的呢在不... -
云美帜17212939881 ______[答案] 我们实验室的配方如下: 5X电泳缓冲液:15.1g Tris+94.0g Gly+5.0g SDS 配成1L 转移缓冲液:3.03g Tris+14.42g Gly+200mL CH3OH 配成1L 效果不错,你可以试一下