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方朱豪1184western blot的实验原理(详细的) -
廉砌雍18125659527 ______ Western Blot与Southern印迹杂交或Northern印迹杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗. 经过PAGE分离的蛋白质样品(跑PAGE 胶的原理你懂吧~~~),转移到固相载体(硝酸纤维素膜NC膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变(这个过程就是转膜). 以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分.该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达.
方朱豪1184蛋白质印迹法为什么叫Westernblot法? -
廉砌雍18125659527 ______ 一开始的时候是叫Southern blot的,后来又出现了两个过程相似但对象不同的印迹方法,一个针对RNA,一个针对蛋白质,这两种技术分别被称为Northern和Western,才最终确定下来叫Westernblot法.通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息.(如:伯乐生命的印迹膜上总蛋白检测). 希望采纳
方朱豪1184western blot 步骤是什么? -
廉砌雍18125659527 ______ 简单的说的话,可以大致分为8点:1. 收集蛋白样品2. 电泳3.转膜4.封闭5.一抗孵育 6.二抗孵育7.蛋白检测8.膜的重复利用,希望可以帮到你哦,你可以到网上找找啊
方朱豪1184请教western blot转膜的原理 -
廉砌雍18125659527 ______ 原理: 1. 电场力作用条件下,带电粒子(PAGE胶中的蛋白)会发生定向迁移; 2. 蛋白大小如果超过膜孔径(0.22μm or 0.45μm),不会透过膜; 3. WB用的膜具有蛋白吸附作用;
方朱豪1184Westernblot法的显色方法有几种? -
廉砌雍18125659527 ______ Westernblot法(即蛋白质印迹法)是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中时常会用到的一种实验方法.通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息.(如:伯乐生命的印迹膜上总蛋白检测).Westernblot法显色的方法只要有四种,分别是放射自显影、底物化学发光ECL、底物荧光ECF与底物DAB呈色.
方朱豪1184Western Blot转膜步骤谁能介绍一下? -
廉砌雍18125659527 ______ 1. 蛋白质抽提 实验对象为组织样品,取适量(250~500mg)新鲜组织样品或正确保存的组织样品,加1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂(或核蛋白抽提试剂),匀浆后抽提总蛋白(或核蛋白). 2. 蛋白质定量:按BCA蛋白质定量试剂盒操作说明操作,测定样品浓度. 3. 变性聚丙烯酰胺不连续凝胶电泳(SDS-PAGE):将准备好的样品液和预染蛋白marker分别上样,标准加进第一个孔中,电泳分离蛋白. 详细的Western Blot转膜步骤生物帮上面有详细介绍, http://product.bio1000.com/100078/ 抗体纯化产品
方朱豪1184western blot是干什么的 -
廉砌雍18125659527 ______ Western Blot中文一般称为蛋白质印迹.它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法.其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色.通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息.
方朱豪1184免疫组化和western blot验证蛋白质上有什么区别? -
廉砌雍18125659527 ______ ① 免疫组化可以用来进行定位,但是不能精确定量,而且有时会有假阳性,不易与背景区分;Western blot可以特异性检测某个蛋白质分子,进行定量,但是不能定位.
方朱豪1184western blot 的工作原理 -
廉砌雍18125659527 ______ 原理:先制备蛋白质样品,再利用SDS-PAGE原理,分离不同的蛋白质,再将分离的蛋白质进行转膜,以便固定在新膜上进行抗原-抗体结合.用固定在膜上的蛋白质作为抗原与对应的非标记抗体(一抗)结合.由于此过程中,可能有未结合到抗原的抗体遗留,故需要清洗,以便保存特异性结合的抗原-抗体结合物.抗原抗体结合物暴露出一个Fc片段,相应的二抗可以结合到这个片段上,形成抗原-一抗-二抗结合物,再用相应的过氧化物酶或碱性磷酸酯酶标记到二抗上,由于加入的标记物相对质量分子很大,可以用离心作用将其沉淀下来,如果抗原与抗体结合,便可以一起沉淀下来,最后通过显色反应或放射自显影法便可检测凝胶中的蛋白成分了.
方朱豪1184westernbiological是什么意思噢?
廉砌雍18125659527 ______ 应该是western biological,意思是:西方的生物制品. western :西边的、朝西的、美国西部的、西方人的(表示这两个意思的western的首字母W应该大写,也就是Western); biological :形容词:生物学的;名词:生物制品. 这个单词在这里显然作名词,所以解释为 生物制品.