western+blot结果分析

松浦卸4118请教western blot转膜的原理 -
迟孙甘19822361838 ______ 原理: 1. 电场力作用条件下,带电粒子(PAGE胶中的蛋白)会发生定向迁移; 2. 蛋白大小如果超过膜孔径(0.22μm or 0.45μm),不会透过膜; 3. WB用的膜具有蛋白吸附作用;

松浦卸4118Western blot实验需要准备什么试剂和耗材 -
迟孙甘19822361838 ______ 试剂:tris、Hcl、Nacl、脱脂牛奶、甲醇、甘氨酸、tween 20、一抗、二抗、显色剂及SDS PAGE需要的试剂(tris、Hcl、TEMED、SDS、过硫酸铵、丙烯酰胺、N N 甲叉双丙烯酰胺、甘氨酸、非预染蛋白Marker、甲醇、乙酸、考马斯亮蓝R250)、预染蛋白Marker 耗材:滤纸、膜、乳胶手套等 仪器:电泳仪、电转槽、摇床、冰浴等

松浦卸4118印迹杂交Western是什?印迹杂交Western是什么
迟孙甘19822361838 ______ 在基因操作中,把DNA或RNA、蛋白质等在薄膜滤器上先经浸润,固定后,于薄膜滤... 与此原理相似的蛋白质印迹技术则被称为Western blot. Northern印迹杂交由...

松浦卸4118蛋白质印迹法为什么叫Westernblot法? -
迟孙甘19822361838 ______[答案] 一开始的时候是叫Southern blot的,后来又出现了两个过程相似但对象不同的印迹方法,一个针对RNA,一个针对蛋白质,这两种技术分别被称为Northern和Western,才最终确定下来叫Westernblot法.通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质...

松浦卸4118western blot转膜不用甲醇可以吗 -
迟孙甘19822361838 ______ western blot转膜不用甲醇可以 蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即Western Blot.它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法.其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色.通过分析着色的...

松浦卸4118Westernblot中脱脂奶粉封闭的是哪些蛋白?原理是什么?
迟孙甘19822361838 ______ 脱脂奶粉中主要是乳清蛋白和酪蛋白.原理就是用非抗原的蛋白去封闭膜,避免标记抗体固定在膜上引起背景增高.

松浦卸4118western blot这个技术为什么不同人做出来的结果会相差那么远呢? -
迟孙甘19822361838 ______ 与实验条件和每个人的实验习惯有关系.在操作规范,实验者素质较高的实验室western的结果可重复度还是很高的. 但是western毕竟是一个定性或半定量的实验,过程繁琐,中间的很多步骤很容易造成误差.从取样,到电泳上样,转膜,封闭,加抗体,显影,每一步都会有误差.

松浦卸4118Western Blot都可以用beta - actin做内参吗? -
迟孙甘19822361838 ______ 描述有问题.抗体检测的是抗原,所以你检测的是β-actin 做western很重要的一点就是要有一个参照,比如你要检测淋巴细胞某个蛋白的表达,甚至它的变化(比如对某个细胞因子的反应),这时β-actin起到几个作用: 1、如果目的蛋白检测不...

松浦卸4118凝胶酶谱和western blot的区别? -
迟孙甘19822361838 ______ 主要是方法不同吧 酶谱法的基本过程是先将样品进行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE,含0.1%明胶)电泳分离,然后在有二价金属离子存在的缓冲系统中使样品中的 MMP-2(基质金属蛋白酶-2)和MMP-9 恢复活性,在各自的迁移位置水解凝胶...

松浦卸4118western blot等生物学试验中的内参是什么意思? -
迟孙甘19822361838 ______[答案] western blot用来检测蛋白表达的变化,而检测表达变化的前提就是,你每个孔跑得总蛋白量是相同的,如果上样量都不同,还怎么检测不同组间目的蛋白量的区别,这样内参就可以作为检测蛋白上样量是否相同的标准.内参一般选那...