凝胶层析法

郭新甄3862凝胶层析法分离混合样品时,怎样才能得到较好的分离效果 -
终天苛17566266396 ______ 1. 柱的选择 柱短而粗,则易使样品稀释柱长而窄,则柱的管壁效应较大,会造成拖尾现象2. 样品的选择量适当, 粘度小 3. 洗脱液的选择 每种样品分离所用的缓冲洗脱液应根据使样品稳定的原则使用

郭新甄3862葡聚糖凝胶层析 -
终天苛17566266396 ______ 这里的大分子是指大的不能进入凝胶颗粒上任何的空隙,完全从凝胶颗粒之间穿过,因此洗脱体积=外水体积

郭新甄3862凝胶层析法分离混合样品时怎样才能得到较好的分离效果 -
终天苛17566266396 ______ 要看你样品是什么类型的?混合样品差异有多大? 我在做分离蛋白质,用的凝胶,自己装柱,很难装的,柱效也很差. 就本人经验而言,最重要的是 A 柱子要细,要长,越细越长越好,当然流速会变慢,时间会长,所以因需要而异 B 缓冲液一定要选好,常用的有磷酸,Tris-Hcl,Tris-甘氨酸,醋酸等.最开始我就因缓冲液没选对,浪费了不少东西. C 流速,凝胶层析,流速一般不是很快,所以要有耐心,一般0.5-1ml/min,但也不能太慢,因为太慢会有扩散现象,峰会很宽. D 注意柱压,太大的话,填料会塌陷,一切就都毁了. 祝你成功

郭新甄3862凝胶色谱法的凝胶种类及性质 -
终天苛17566266396 ______ ⑴Sephadex G交联葡聚糖的商品名为Sephadex,不同规格型号的葡聚糖用英文字母G表示,G后面的阿拉伯数为凝胶得水值的10倍.例如,G-25为每克凝胶膨胀时吸水2.5克,同样G-200克每克干胶吸水20克.交联葡聚糖凝胶的种类有G-10,G-...

郭新甄3862凝胶过滤层析法加样是应注意哪些问题?
终天苛17566266396 ______ 一般分为三个步骤:装柱、加样、洗脱淋洗. 装柱是需要注意的是:【1】垂直放置 【2】放置产生气泡 【3】放置柱分层 加样时,【1】加样前打开出口,使展开剂流出,至正好露出凝胶上平面时,立即关闭出口 【2】加样时,用滴管缓缓沿柱内壁加入柱子 【3】打开柱子得出口,使待分离的样品进入柱子. 加样完成后,进行洗脱.

郭新甄3862凝胶层析法脱盐和分离蛋白质的实验原理是什么? -
终天苛17566266396 ______ 凡盐析所获得的粗制蛋白质(盐析得到的IgG)中均含有硫酸铵等盐类,这类将影响以后的纯化,所以纯化前均应除去,此过程称为“脱盐”(desalthing).脱盐常用透析法和凝胶过滤法,这两种方法各有利弊.前者的优点是透析后析品终体积较小,但所需时间较长,且盐不易除尽;凝胶过滤法则能将盐除尽,所需时间也短,但其凝胶过滤后样品体积较大.所以,要根据具体情况选择使用.前实验中样品体积较小,凝胶达滤后样品体积不会太增加,所以选用凝胶过滤法.