层析柱装填的要点和要求

储昆施2752装柱,加样的操作中应注意哪些问题 -
阳叶纯19868468215 ______ 装柱方法分为湿法和干法,一般来说,湿法装柱的效果优于干法装柱. 湿法装柱: 先将柱层析的填料活化处理后浸润在适宜的有机溶剂中,使之处于有机环境.装柱时在层析柱自下而上依次填入硅烷花玻璃棉→石英砂→已处理好的层析填料,一边装柱一边用..

储昆施2752G100凝胶柱层析的装柱问题,求高手解答.
阳叶纯19868468215 ______ G100比较软,容易受压变形,要时刻注意操作压,特别是装柱的时候. 你的柱子不流,说明胶已经变形,堵塞.如果时间较长,可能无法完全恢复,就只能换一批介质.建议你把胶倒出来,浮选一下,把漂浮和沉降缓慢的部分去掉,也许能好一些.重装柱子时注意液面差,装柱要匀.

储昆施2752在柱色谱过程中,如果柱中存在气泡,对样品的分离有何影响? -
阳叶纯19868468215 ______ 如有气泡存在,将降低分离能力,因为气泡的存在变相的减少了作用位点,减弱了填料与物质之间的作用力.因此,为了避免该情况的发生,在装填层析柱时,要不断的敲打柱壁,且要避免干柱.

储昆施2752请问一下亲和层析的操作要点是什么啊? -
阳叶纯19868468215 ______ (一)原理 亲和层析是一种吸附层析,抗原(或抗体)和相应的抗体(或抗原)发生特异性结合,而这种结合在一定的条件下又是可逆的.所以将抗原(或抗体)固相化后,就可以使存在液相中的相应抗体(或抗原)选择性地结合在固相载体...

储昆施2752中压柱层析法 -
阳叶纯19868468215 ______ 以中压柱层析法提取分离冬凌草甲素为例 1 吸附剂的处理及柱子装填 将一定量薄层层析硅胶装人搪瓷盘置于烘箱中,于105.C活化2h后,取出放置室温即可装柱.柱子采用干法填充,填满整个柱体,不留死体积,密封后用柱塞式计量溶剂泵按...

储昆施2752如何.凝胶色谱操作?
阳叶纯19868468215 ______ (1) 凝胶色谱柱的装填:装填前,凝 胶用蒸馏水或洗脱液充分溶胀,配成凝 胶悬浮液.然后在与色谱柱下端连接的 尼龙管打开的情况下,将凝胶悬浮液一 次性缓慢倒入色谱柱内.装填时,要均 匀,不留气泡,如果发现气泡,必须重装. 装填完后,用300 mL 20 mmol/L的磷酸 缓冲液充分洗涤平衡凝胶12小时,使其 装填紧密. (2) 样品的加入和洗脱:加样前,打 开下端口,使柱内缓冲液缓慢下降到与 凝胶面平齐,关闭出口.用吸管将透析 样品加到顶端,不要破坏凝胶面,打开下 触出口,使其深入凝胶层后再关闭.小 心地加入20 mm〇l/L的磷酸缓冲液并进 行洗脱,当红色的蛋白质接近色谱柱底 端时,用试管收集.

储昆施2752吸附柱层析法吸附柱怎么做 -
阳叶纯19868468215 ______ 将固定相用溶剂浸泡后灌入柱内,柱下端有一个阀门,将溶剂放至比固定相表面高1-2公分即可.

储昆施2752凝胶层析法分离混合样品时,怎样才能得到较好的分离效果 -
阳叶纯19868468215 ______ 1. 柱的选择 柱短而粗,则易使样品稀释柱长而窄,则柱的管壁效应较大,会造成拖尾现象2. 样品的选择量适当, 粘度小 3. 洗脱液的选择 每种样品分离所用的缓冲洗脱液应根据使样品稳定的原则使用

储昆施2752层析玻璃空柱使用时需要配什么配件吗 -
阳叶纯19868468215 ______ 需要管道、连接头、分布器(有的不需要)、筛网、填料、泵(重力流不用)、检测器、收集器.您可以根据自己的需求以及现有层析柱的情况选择全部或部分以上配件.

储昆施2752影响凝胶过滤分离效果的有哪些因素,为什么? -
阳叶纯19868468215 ______[答案] 凝胶层析操作中应注意的一些具体问题. (1)层析柱的选择 层析柱大小主要是根据样品量的多少以及对分辨率的要求来进行选择.一般来讲,主要是层析柱的长度对分辨率影响较大,长的层析柱分辨率要比短的高;但层析柱长度不能过长,否则会引...