慢病毒包装三质粒系统比例

蔺雯宋2130包装反转录病毒(如慢病毒)时采用多质粒系统共转染细胞,那么包转好的病毒基因组是RNA吗?怎么来的?是否是多质粒系统在宿主中发生了重组,然后表... -
养琪褚18912022786 ______[答案] 就以慢病毒为例. 包装好的病毒只含有结构质粒5'LTR和3'LTR之间的RNA序列. 多质粒系统指的是慢病毒的包装系统,就三质粒(包装质粒、包膜蛋白质粒、转移质粒)包装系统来说,病毒包装必需的3个蛋白Gag/Pol、Rev、VSV-G分别放置在不同的...

蔺雯宋2130三质粒转293t构建慢病毒需要消化细胞吗 -
养琪褚18912022786 ______ 含有目的基因的慢病毒RNAi干扰载体的构建和质粒纯化,提取慢病毒载体,包装系统共转染病毒包装细胞293T等.3)培养48hrs-72hrs左右,收集含有病毒的上清培养液.4)病毒的纯化和浓缩.5)分装、-80℃保存.6)滴度测定目的基因检定,并出具检测报告.

蔺雯宋2130慢病毒包装时,转染293后,能直接提取293做wb吗 -
养琪褚18912022786 ______ 目前大多数人都是使用的是lipofectamin2000!!这个试剂转染效果比较好,特别是病毒包装时需要用到三种质粒,这样对转染试剂要求就要高一些

蔺雯宋2130慢病毒载体的辅助成分 -
养琪褚18912022786 ______ 慢病毒载体辅助成分包括: 慢病毒包装质粒和可产生病毒颗粒的细胞系. 慢病毒载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息.慢病毒包装质粒可提供所有的转录并包装RNA 到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白.为产生高滴度的病毒颗粒,需要利用表达载体和包装质粒同时共转染细胞,在细胞中进行病毒的包装,包装好的假病毒颗粒分泌到细胞外的培养基中,离心取得上清液后,可以直接用于宿主细胞的感染,目的基因进入到宿主细胞之后,经过反转录,整合到基因组,从而高水平的表达效应分子.

蔺雯宋2130如何选择合适的表达载体 -
养琪褚18912022786 ______ 首先,你得先确定这个3.4kb的基因是需要在原核还是真核表达系统中表达; 其次,选择好相对应的表达系统后,再考虑这段基因的表达产物(即蛋白)最后是否需要附加上标签(tag)以用于后续的分离纯化,以及这个标签是加在C末端还是N末端等. 最后,根据你的实验目的确定你所需要的表达量,是采用一个含有强启动子的载体来过量表达蛋白,还是只需要一个普通的启动子即可. 我建议你先根据上述原则初选出一些载体,然后找到这些载体的使用说明书(直接在网上找),里面有非常详细的说明,包括启动子信息、多克隆位点信息、载体使用范围、表达条件等.

蔺雯宋2130做crispr需要测靶基因序列嘛吗 -
养琪褚18912022786 ______ CRISPR (clustered, regularly interspaced, short palindromic repeats)是一种来自细菌降解入侵的病毒 DNA 或其他外源 DNA 的免疫机制.在细菌及古细菌中,CRISPR系统共分成3类,其中Ⅰ类和Ⅲ类需要多种CRISPR相关蛋白(Cas蛋白)共...

蔺雯宋2130研究生一年级,老板让做一个稳转细胞系,该怎么操作?? -
养琪褚18912022786 ______ 自己操作的难度比较大.一般有一定经验的外科医生才会打这个麻醉,打不好是没有效果的.最好去专业医疗机构医院或者诊所,那里会比较专业.效果也比较好.

蔺雯宋2130慢病毒细胞稳定株能冻存么? -
养琪褚18912022786 ______ 稳定株中目的基因已插入细胞基因组内,可以冻存,没问题.

蔺雯宋2130请问:其他应收款在贷方表示什么?怎么样分清楚其他应收款和其他应付?
养琪褚18912022786 ______ 其在贷方表示其他应收款科目金额的减少 例如出差员工预借差旅费时借记其他应收款 贷记库存现金 而当报销时借记具体期间费用(如管理费用)贷记其他应收款 剩余现金交回财会部门时 借记库存现金 贷记其他应收款 其他应收款是资产类科目 用来核算企业除应收票据 应收账款 预付款 以外的各种应收 暂付等 如赔款 罚款等.而其他应付款是负债类科目 主要核算除应付票据 应付款 预收账款 应付利息 股利等其他经营活动的各种应付 暂收的款项 比如企业应付的包装物租金 存入保证金 以及用售后回购方式融入的资金 回答如此 希望对你有帮助!