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手提质粒出现5个条带

来源:baiyundou.net   日期:2024-09-21

唐帘妹4244质粒的琼脂糖凝胶检测中 跑电泳后 在紫外光下应该看到几条带? -
任许使13177758540 ______ 一条最好(超螺旋),三条(超螺旋,线性,开环)也可以.

唐帘妹4244为什么双酶切产物和连接产物电泳后会出现多个条?为什么双酶切产物和
任许使13177758540 ______ 正常质粒是闭合的双链DNA.在电泳过程中可能使质粒发生开环,或者由开环解开螺旋变成线形.这三种形态电泳时的分离率不同,分离速度不同,分成三带.闭环(超螺旋),开环,线形的螺旋率依次降低

唐帘妹4244大肠转化后提的质粒,跑电泳出现3条带,求高人解释每条带分别是什么?(第一列是空质粒) -
任许使13177758540 ______[答案] 质粒DNA分子具有三种构型:共价闭合环DNA(cccDNA,SC构型)、开环DNA(OC构型)和线性分子(L构型).在细菌体内,质粒DNA是以负超螺旋构型存在的.在琼脂糖凝胶电泳中不同构型的的同一种质粒DNA,尽管分子量相同,但具有不同的电泳迁移...

唐帘妹4244pcr后,跑电泳没有条带,重复过几次,什么原因 -
任许使13177758540 ______ 正常操作实验中提取质粒应该出现2条条带,由于空间结构的差异,从上至下第一条为较为松散的DNA环状结构,第二条是环状DNA超螺旋结构,有时往往会存在第三条带(出现在松散环状质粒DNA条带上方),即为DNA开环结构(由于质粒提...

唐帘妹4244质粒单酶切出现两条带 -
任许使13177758540 ______ 可能是质粒仅有单酶切的一个位点,部分酶切了,部分没有酶切,酶切的是多数,所以产生条带较大(也就是浓度的不同)~~但是完整的质粒和酶切后的质粒条带因为结构关系应该不会很近诶!~~~可以看哈是不是电泳的时间不够~~!! 若是存在两个以上的单酶切位点,原则上可以产生多种条带~~比如有两个单酶切位点可以产生:完整的质粒,单酶切的一个位点被切,两位点被切三种情况;这样的原则上会产生四种大小不同的条带!!酶切位点越多条带数应该越多才是!~~ 若是多位点的,可能会是电泳跑得不好,没有分出明显的条带!~~ 没做过质粒酶切电泳,仅是理论上分析的哈!!

唐帘妹4244你提取的质粒DNA分子在琼脂糖凝胶电泳中表现出几条带?并解释这种现象? -
任许使13177758540 ______[答案] 三条 最慢的一条是超螺旋,中间的是开环的,最下面一条是直链

唐帘妹4244质粒DNA 的电泳图谱为何有时只有一条带谱,有时又有2 - 3条带谱? -
任许使13177758540 ______ 质粒DNA有三种状态,超螺旋、带缺刻(nick)的、线性DNA.提取时手法比较柔和、试剂比较好,则以超螺旋为主,有1-2个带.如操作比较剧烈导致DNA断裂为线性,则可能有3个带

唐帘妹4244质粒双酶切后怎么会这个样子 -
任许使13177758540 ______ 线性化的跑得最慢. 质粒酶切后,和没有酶切的对照相比.应该会多出一条带,这条带应该是跑得最慢的,也就是显得比原来的更大.酶切的不彻底的话,原来的那几条带也可能存在wjswj(站内联系TA)酶切之前你看到的应该是超螺旋,所以显的比较小:)zbq-92(站内联系TA)超螺旋的跑的最快,其次是线性的DNA,最后跑的最慢的是带缺口(即开环)的.用碱裂解法提取质粒看不到线性的带,只有其余的两条,但不一定是那一条亮. 如果你的超螺旋那条特别亮,酶切后同样大小的DNA片段,由于超螺旋变为线性,电泳就会显示比超螺旋的带大.

唐帘妹4244同样的菌液不同时间提的质粒跑电泳后带的大小不一样,是为什么?我出来俩条带,希望是正常的,谢谢你 -
任许使13177758540 ______[答案] 不同时期和生长状态下,细菌体内的质粒DNA的代谢情况有所不同. 请永远记住一个事情:Marker是线性的,所以你要拿线性化的质粒来做比较.

唐帘妹4244连接克隆载体,提取质粒后目的基因仍然在,怎么回事 -
任许使13177758540 ______ 提取质粒后目的基因仍然在是什么意思?是说应该被替换了吗?如果是没有连接成功考虑载体酶切是否完全;载体与目的片段的比例是否合适,推荐载体:目的片段=1:3感受态细菌的效率如何,保证感受态效率达到10^8以上对于连接转化非常重要.

(编辑:自媒体)
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