流动相的配置步骤

液相色谱仪是一种常用的分析仪器，广泛应用于化学、材料科学、生物医药等领域。它可以实现对物质成分的分离、检测和定量分析。本文将详细介绍液相色谱仪的操作步骤和原理。

一、液相色谱仪的操作步骤：

1.样品准备：将待检测的样品按照一定的方法进行制备，如溶解、过滤等，以保证样品的稳定性和准确性。

2.仪器准备：打开液相色谱仪的电源，检查仪器的各项参数是否正常。例如，检查流动相的压力是否稳定、检查样品进样器是否清洁等。

3.柱的选择：根据待检测的物质性质和要求，选择合适的色谱柱。常见的色谱柱有反相柱、离子交换柱、凝胶柱等。

4.流动相的配置：根据样品的性质和分析要求，选择合适的流动相，并进行配制。流动相的参数包括溶液浓度、流速等，这些参数的选择对于色谱分离结果具有重要影响。

5.仪器的调试：根据样品的特性和要求，对仪器进行相关的调试。例如，调整进样量、调整检测器的灵敏度等。

6.进样：将样品注入到样品进样器中，控制进样量和进样速度。在进样之前，应该清洗进样器，以避免交叉污染。

7.分析运行：启动液相色谱仪，按照预设的方法和程序进行分析运行。通过监测检测器的信号，可以获得物质的峰形图谱。

8.数据处理：根据色谱图的结果，进行数据的分析和处理。可以使用专门的数据处理软件对峰高、峰面积等进行计算和分析，得到定量或定性结果。

二、液相色谱仪的原理：

液相色谱仪的原理基于溶液中化合物的分离和吸附。它利用色谱柱的填料材料，通过样品与流动相之间相互作用的差异，实现化合物的分离。

液相色谱仪由进样器、色谱柱、泵、检测器和数据处理系统等组成。具体的工作原理如下：

1.进样器：将样品注入进样器中，通过旋钮或自动进样系统控制进样量和进样速度。进样器可以实现样品的快速、准确进样。

2.色谱柱：液相色谱柱是液相色谱仪的核心部分，它主要由填料材料组成。填料材料具有不同的亲水性和亲油性，可以实现样品的分离。

3.泵：泵负责将流动相以一定的流速送入色谱柱中，推动样品的分离。泵的流速和压力可以调节，以满足不同分析要求。

4.检测器：检测器对流经色谱柱的化合物进行检测。常见的检测器有紫外光谱检测器、荧光检测器、质谱检测器等。不同的检测器有不同的分析范围和灵敏度。

5.数据处理系统：根据检测器的信号，数据处理系统对峰的面积、高度等进行计算和分析。可以通过标准曲线等方法，得到物质的定量结果。

总结：

液相色谱仪是一种重要的分析仪器，广泛应用于化学、材料科学、生物医药等领域。通过合理操作和准确的数据处理，液相色谱仪可以实现对各种化合物的分离、检测和定量分析。对于深入了解和应用液相色谱仪的原理和操作步骤，有助于提高实验的准确性和效率。

何要霍1545hplc现在有用乙醇做流动相的吗?要是能的话怎么和水配比?怎么设置梯度?谢谢.急! -
俟娟师17721025922 ______ 理论上乙醇是可以用作流动相.一般情况下不选择乙醇作流动相,因为乙醇的黏度相对较大,用作流动相时柱压太大.以水作1计,乙醇1.2 丙酮0.32 甲醇0.60 乙腈0.37 .另外,使用乙醇的成本要高于甲醇,所以一般不用乙醇用流动相. 设置梯度的话,需要两个以上的高压泵,设置其中的一个泵为主泵,其它的泵都设为副泵.再在主泵或工作站中设置梯度参数,如下,以双泵为例 time A :水(%) B:甲醇(%) 0.00 20 80 10.0 50 50 20.0 60 40 25.0 80 20 这样就设置了0~10min,10~20min,20~25min三个不同的梯度.

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何要霍1545HPLC流动相用 磷酸氢二钾和磷酸二氢钾用氢氧化钾调PH=9怎么配置? 两种混合在一起配1500ml各需要多少克?具体的配置方法怎么做? -
俟娟师17721025922 ______[答案] 你可以用buffer的计算公式来算出两者的比例,但不能确定各是多少克,因为你没有告诉要配多大浓度的buffer. 配好后,pH总会有偏差的,这时在用KOH或磷酸调节.

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俟娟师17721025922 ______ 大家好,请教一个我实际遇到的问题,我在配流动相的时候,发现不同质量标准中配置方法的不同.例如1:称取4g的磷酸二氢钾,加入1000ml的水,用稀磷酸调pH3.0.第二种方法..

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俟娟师17721025922 ______ 1>乙腈-磷酸二氢钾的好. 因为布洛芬(无论是右选还是左旋)是一个有机酸,极性较大,分离极性较大的酸性物质一般采用酸性缓冲盐溶液. 2>0.02mol/L的乙腈-缓冲盐 (PH3.5 58:42)的配置方法如下: 缓冲液配置:称取磷酸二氢钾13.61g(0.02mol)加水950ml溶解,加磷酸调PH至3.50,加水至1000ml(无需容量瓶,用大量筒即可). 流动相配置:缓冲液420ml,乙腈580ml,混合,过0.2um(或0.45um)滤膜即可. 如果对你有帮助,望采纳.

何要霍1545苹果酸、柠檬酸检测的流动相配置 需要配置0.5%的H3PO4/KH2PO4缓冲液,PH2.81,含2.5%乙腈.请问如何配置?方法里用的是150mm的反相柱,我用250... -
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何要霍1545最近做液相,想请问高效液相色谱仪器是如何操作的,新手!务必详细!谢谢,还有那些条件,数据,等~~ -
俟娟师17721025922 ______ 1、配制缓冲液 2、用滤膜过滤缓冲液 3、根据你的出峰时间需要,配制不同乙腈比例的流动相,比如说乙腈:缓冲液=1:6或1:4之类 4、将配好的流动相进行超声脱气15-20min 5、流动相配好之后,打开色谱工作站,设置方法,查看基线,并进行零点校正 6、取样进样检测

何要霍1545急 做食品检验时候流动相是0.125mol/l磷酸盐缓冲液 如何配置? -
俟娟师17721025922 ______ 一般你只用磷酸二氢钾就可以 磷酸氢二钾一般来说不用到缓冲体系 然后按照要求配制流动相浓度就可以了 按照流动相比例 走等梯度洗脱就可以

何要霍1545供试品溶液如何配置?
俟娟师17721025922 ______ 精密称取供试品适量,加流动相适量,超声处理20分钟使溶解,用流动相定量稀释成每1mL中含0.32mg的溶液,精密量取该溶液与内标溶液各5mL,置25mL量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,即为供试品溶液.