质粒提取中溶液123的作用

齐馥学2467SDS碱裂解法提取质粒DNA中加酚氯仿离心后为什么溶液会变三层?那三层分别是什么?及离心的作用是什么? -
季乳泽17163819268 ______[答案] 离心的作用是让它分层,或者说按密度分离. 上层水相,有你要的质粒;中间是变性的蛋白;下面是有机相,这样酚氯仿就除去了.

齐馥学2467质粒用碱裂解法提取过程中,加入溶液Ⅲ冰浴10分钟的目的是什么? -
季乳泽17163819268 ______[答案] 使蛋白凝固、好提取上清

齐馥学2467手工法 革兰阴性菌总DNA提取模板做PCR 经验方法 -
季乳泽17163819268 ______ 质粒的方法就溶液123的方法就可以了 DNA可以参考提取动物、植物DNA的方法 更快速的方法可以参考我们做菌落pcr的方法,这个方法是采用少量的菌作为模板 然后加入pcr反应液,在pcr高温预变性的过程中菌细胞壁会裂解掉,dna和质粒都释放到溶液中作为模板参与扩增. 如果你有96孔深板(1-2ml)以及排枪最好了,省事省时.牙签或者枪头挑菌挑一点点(只要沾到菌落就行,不要求大块,大块反而不好),96孔每孔加500ul培养液,挑96个,然后拿去摇菌,培养3-5小时,菌液就可以直接作为pcr的模板了. 只要引物好用,基本都可以扩出来的.我们鉴定阳性克隆都这样做, 你可以参考

齐馥学2467提取的质粒DNA的质量与产量与哪些因素有关?为什么要用对数期的菌液提取质粒? -
季乳泽17163819268 ______[答案] 1.和菌的 生长状况有关 2.和提取时的温度有关要低温 3.加溶液2和3要操作温和! 4.要用酚和氯仿的混合液多次抽提去除蛋白,效果最好! 5.用冰乙醇沉淀最好! 因为对数期菌的 生长状况和数量最佳,有利于提取质粒

齐馥学2467质粒的提取原理 -
季乳泽17163819268 ______ 质粒提取是指去除 RNA,将质粒与细菌基因组 DNA分开,去除蛋白质及其它杂质,以得到相对纯净的质粒. 目录 一、质粒提取原理 质粒是细胞内的一种环状的小分子DNA,是进行DNA重组的常用载体.作为一个具有自身复制起点的复制单位...