293T细胞

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293T细胞

来源：baiyundou.net 日期：2024-09-22

产品基本信息

品牌：eaglebio

品名：293T HCP ELISA 检测试剂盒

货号：HG-HCP001

规格:96 wells

储存： 2-8°C 保质期8个月
灵敏度：37 ng/mL 动态范围：37 – 27000 ng/mL
孵育时间：3 小时样品类型：在 293T 细胞上表达的生物制药样品量：100 μL

背景：

HCP残留是工艺稳定性监测的重要评价指标，是重组疫苗及重组抗体类药物的重要质控指标，生物制品中残余HCP含量通常被认为是产品的关键质量属性 (CQA)。

近年来，生物药企开始将更多的注意力投向生物制品制造过程中宿主细胞蛋白（HCP）的检测。在不同生物制品中，宿主细胞蛋白（HCP）的存在取决于许多参数，包括用于制造的细胞系的选择、产品本身的特性、培养持续时间和细胞活力等，所以检测HCP残留成为一项十分重要且具有挑战性的工作。

产品应用：

293T HCP ELISA 检测试剂盒专为定量检测 293T 细胞上表达的生物制药中的 HCP（宿主细胞蛋白）含量而设计。这可用于检测293T细胞中HCP的所有成分。

测定原理

本产品适用于双抗体夹心法测定待测样品中的293T HCP。将标准品和测试样品添加到预先包被有 293T 抗体的微孔板上的反应孔中进行孵育。本发明的293T HCP与微孔板中的抗体定量结合，而未结合的物质在洗板后被去除。依次加入Anti-293T HCP-Biotin和Streptavidin HRP，形成抗体-抗原-生物素化抗体-酶标亲和素复合物。测试样品中的蛋白质含量可以通过TMB的显色程度来指示。

试剂盒组成：

部件

规格

制备

293T HCP涂层板

8 wells × 12 strips × 1 piece

即用型

抗-293T HCP生物素（检测抗体）

150 uL * 1 vial

1:100，用稀释缓冲液稀释

链霉亲和素-HRP（酶缀合物）

375 uL * 3 vials

1:10，用稀释缓冲液稀释

293T HCP标准（标准）

600 μL × 1 vial (81 μg/mL)

按照建议操作稀释程序

稀释缓冲液

1 g× 1 vial

用100 mL 1×PBS-T溶解

10×PBS-T洗涤缓冲液

50 mL× 1 bottle

1:10，用去离子水稀释

底物溶液

50 mL× 1 bottle

即用型

终止液

50 mL× 1 bottle

即用型

板材密封剂

1 piece

即用型

实验结果参考：

产品的线性拟合和计算建议采用四参数拟合方法。

标准曲线的OD处理（以下示例仅供参考，实际结果以检测为准）：

标准曲线通过与理论标准浓度和相应OD的4参数拟合获得值（如下图所示）

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东丹柱854293T细胞的培养实验步骤谁能介绍下,谢谢大家! -
井松卫19651726204 ______ 293T细胞的冻存1. 随着传代的次数增加,293T细胞会出现生长状态下降,出现突变等.所以要在细胞购进时就进行大量冻存,以保证实验的稳定性和持续性.2. 在细胞对数生长期进行冻存,增加细胞复苏成活率.3. 倒去细胞上清液,加入D-Hank's液洗去残留的培养基.4. 加入0.25%的胰酶,消化10-20s后倒去.5. 镜下观察细胞变圆,细胞间间隙加大时,加入新鲜培养基吹打混匀.详细的步骤可以到生物帮了解下, http://www.bio1000.com/reseach/ 生命科学研究成果,分子,细胞生物学研究进展,生命科学研究进展.

东丹柱854293T细胞中tau蛋白的表达量高吗 -
井松卫19651726204 ______ 293T细胞中tau蛋白的表达量不会高的 tau蛋白是含量最高的微管相关蛋白,容易出现磷酸化和糖基化而293系列细胞中没有tau蛋白,因为293T细胞是很好的基因转染表达模型,同时也是人肾上皮细胞系所以293T细胞中tau蛋白的表达量应该不会高

东丹柱854hek293t细胞制备抗体属于什么技术 -
井松卫19651726204 ______ 你好,293T细胞事先转染了Cas-9酶,Cas-9是存在于细菌中的一类防御外源DNA 污染的酶类,能够准确切除整合在细菌DNA上的外源DNA,利用这一原理,HEK-293细胞转染Cas-9酶成为293T细胞,具备了切除基因的能力,然后引入设计好的基因,293T细胞内的Cas-9酶就能够将引入的基因当做外源基因连同自身基因一并切除,因此想敲除基因,只需要将设计好的靶序列转染进293T细胞就好了,另外293T细胞因为事先已经转染过一次病毒,细胞对嘌呤霉素是有抵抗性的,因此用嘌呤霉素筛选病毒感染的细胞不适用于293T

东丹柱854请问HALA,mefs,293,293T都是什么细胞?生长方式是怎样的?分别用什么培养基培养? -
井松卫19651726204 ______[答案] mefs没听说过是hela 宫颈癌细胞 293和293T是肾上皮细胞都用DMEM+10%FBS

东丹柱854磷酸钙转染293t效率能达到多少 -
井松卫19651726204 ______[答案] 没有使用磷酸钙转染过293细胞, 293细胞是非常非常常见的细胞系,很多实验,病毒包装都是通过它, 当然很多转染试剂对于293细胞的效果也是比较好的比如,lipoD293,lipoJet,lipo2000,等,还有293fectin,针对293细胞优化的试剂!

东丹柱854为什么293t可以表达大T抗原而293不能? -
井松卫19651726204 ______ 因为该细胞系人工加入了SV40 T的基因序列

东丹柱854293t细胞培养基加双抗吗 -
井松卫19651726204 ______[答案] 我们实验室都加的,我觉得有必要加,不光和操作有关,也和你们无菌间的洁净度有关,为了以防万一,我觉得有必要加.

东丹柱854HEK293 - T细胞能用于养稳转细胞吗
井松卫19651726204 ______ 能啊,293T细胞是贴壁细胞,做稳定转染很方便,效率也很高的.

东丹柱854293t细胞转染细胞密度分低了怎么办 -
井松卫19651726204 ______ 细胞密度太大,最好在30-50%,293T细胞长得很快,蛋白多,不用担心蛋白数量.磷酸钙会在培养皿底部形成颗粒状沉淀,一般来说,颗粒越小,数量越多,转染效果越好.你可以做个氯化钙浓度梯度,检测产生沉淀的效果,以及蛋白表达情况.转染时最好用无血清培养液,培养液数量要少,6厘米培养皿1.5ml足够.数小时后换成正常培养液,大约24小时后收获蛋白样品.

东丹柱854用jetPRIME和Lipo3000转染293T细胞,哪个效果更好? -
井松卫19651726204 ______ 脂质体的转染毒性是最大的,很明显,那么多的细胞死亡是由于转染的细胞毒性导致的.对于这一点我有两个建议,一个是减少DNA的用量,我一般做转染,对于任何细胞,只要是12孔板,一般都是用1ugDNA,这个量绝对够了.,因为质粒转...

（编辑：自媒体）