不做内参的qpcr结果

苗厚环3790一个qpcr反应中是不是只需要一个探针引物就可以了 -
吴旺些13244148679 ______ 一个qpcr反应中是不是只需要一个探针引物就可以了 一般来讲,进行real-time qPCR MasterMix都是2*的浓缩液,只需要加入模板和引物就可以.由于real-time qPCR灵敏度高,所以每个样品至少要做3个平行孔,以防在后面的数据分析中,由于...

苗厚环3790如何处理Real time PCR的数据结果 -
吴旺些13244148679 ______ 学习做Realtime PCR, 实验结果是出来了,得到的内参、目的基因的Ct 值在15-25 之间,熔 融曲线基本上也是单峰,但不太会处理这个结果,对着数据发愁...不同的处理方法得到不 同的结果...做的是相对定量,SYBR Green, 选用2^(-...

苗厚环3790如何利用Bio - Rad CFX Manager 3.1分析QPCR数据 -
吴旺些13244148679 ______ 1、百度搜索下载免费的Bio-Rad CFX Manger3.1软件,下载完毕后安装到你电脑上.2、在电脑上点开Bio-rad-2软件,会出现一系列的文件夹和应用程序扩展以及应用程序之类的,专门找到应用程序里面的BioRadCFXManager.3、点击步骤二...

苗厚环3790qpcr怎么来检测microrna -
吴旺些13244148679 ______ 提RNA你会吧... 反转录你会吧...如果只是检测一般的mRNA的表达量 就用poly T反转录就可以了 如果是特殊的必须去另外合成特异引物 如果你想得到确切的浓度值 那必须在做RT的时候检测一个标准品 就是这里面东西的浓度你是确切知道的 然后做一条标准品曲线 然后拿你要检测的那个得到的值带到那个曲线里面就算出浓度了 大部分时候都是检测相对含量 就是这个mRNA在不同东西里面的比较 那就不用做标准品曲线 直接把得到的几个值比较下关系就可以了 大部分检测用的内参都是GAPDH 其他还有U6 U7可选

苗厚环3790pcr产物电泳时,用反转的dna的同一个样分别扩内参、目的1和目的2.内参和目的1都很好,目的2却很浅很浅? -
吴旺些13244148679 ______ 你是一直都这样还是单次啊?如果是单次的话建议换一批cDNA试试,因为做实验这种事情有时候分析得再合理,结果还是不靠谱,我前几天还有过内参p不出来的现象,目的条带都巨亮无比,又能说什么呢,有时候就是这么不正常~~~ 如果是一直都这样,试过加大循环数和加大模板量都没有用的话,我还有一个不太常规的办法 你可以把你的目的2跑的胶切下来(就像是回收那样的切),放到EP管了,放到负20度冻起来,然后拿出来,化了之后ep管里会有几微升的水,把它吸出来当模板用,试试吧 当然有可能是引物的原因,你可以再看看目的2的引物看看有没有问题

苗厚环3790如何通过qPCR比较不同基因的表达 -
吴旺些13244148679 ______ 提取样本mRNA,测提取的浓度,按比例调整浓度保持相近的起始量,做反转录合成cDNA,然后用配套的荧光定量试剂配置上样体系,就可以在Real Time-PCR仪上跑了,然后观察仪器上实时显示的数据和最终结果分析比较基因表达差异

苗厚环3790实时荧光定量PCR的结果该怎样分析? -
吴旺些13244148679 ______ 1、如果有标准曲线,按照标准曲线计算; 2、一般都是相对量,则用delta delta CT方法来计算; 3、引物或探针降解:可通过PAGE电泳检测其完整性; 4、模板量不足:对未知浓度的样品应从系列稀释样本的最高浓度做起; 5、看CT值是分析...

苗厚环3790Real - time PCR和RT PCR有什么区别 -
吴旺些13244148679 ______ RT-PCR现在一般指反转录PCR,有时候也被说成Real-time-PCR就是实时定量PCR; Real-time-PCR就是实时荧光定量PCR,现在标准的说法是qPCR,就是定量PCR.

苗厚环3790RNA测序到底可不可靠 -
吴旺些13244148679 ______ (转载) RNA测序在生物科学和医学研究中非常流行,而且正在逐渐走向临床应用.那么RNA测序到底可不可靠呢?由美国FDA牵头的测序质量控制(SEQC)项目对RNA测序的准确性、可重现性和信息含量进行了综合性评估,并将初步调查...