qpcr结果分析ct值

巫媚顺1093RT - PCR里的CT值到底代表什么意思 -
曲凡曼15738502617 ______ 阈值指指数增长期荧光信号的临界值,一般PCR仪会自动给出阈值,而CT指就是扩增曲线达到阈值时的循环圈数.

巫媚顺1093如何通过qPCR比较不同基因的表达 -
曲凡曼15738502617 ______ 提取样本mRNA,测提取的浓度,按比例调整浓度保持相近的起始量,做反转录合成cDNA,然后用配套的荧光定量试剂配置上样体系,就可以在Real Time-PCR仪上跑了,然后观察仪器上实时显示的数据和最终结果分析比较基因表达差异

巫媚顺1093如何看QRT - PCR 结果中的Cq值 -
曲凡曼15738502617 ______ 新版的软件都叫Cq值,不叫Ct值了,不必理会.Ct值15-25是最好,10-30之间也接受.如果超过30了,得看一下复孔是否一致,如果一致,也接受.如果不一致,基本就是废的.

巫媚顺1093pcr ct值越高是否说明表达越低,△ct值越高说明表达也低,是吗?最后结果2 - △△ct,这里△△ct=(CT目的 - CT参比)实验 - (CT目的 - CT参比)对照,假如我这... -
曲凡曼15738502617 ______[答案] 原来是ylgtwcat老师,久仰久仰.下过您的文库里的文章.您说“一般都是相对量.则用delta delta CT方法来计算.举例如下:基因A: delta CT=20-18=2.2的2次方是4.也就是说基因A的量在实验组是对照组的4倍“.结果不...

巫媚顺1093pcr ct 值 太大,反应体系多少比较好 -
曲凡曼15738502617 ______ CT值太大,说明模板浓度很低或扩增效率很低,20ul体系可以满足扩增,增大体系不会提高CT值.

巫媚顺1093荧光定量PCR中Ct为什么具有重现?荧光定量PCR中Ct为什么具
曲凡曼15738502617 ______ 实时荧光定量PCR原理 所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧... 最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法. 1. Ct 值的定义 在 荧光定量...

巫媚顺1093实时定量PCR的结果分析 -
曲凡曼15738502617 ______ Sybergreen可以和所有核酸结合,没有特异性.所以要保证特异性的话,最好用其他的方法.扩增体系中加入模板DNA的体积,比如同时10微升的体系,对照组加1微升DNA,实验组加2微升DNA,则实验组的加样量是对照组的2倍.看CT值是分析荧光定量PCR最直观的一个数据,CT值一般在35左右就失去参考价值了,平时我们实验室用BIODAI-PCR荧光定量法测得的扩增曲线的起跳值基本在30左右

巫媚顺1093做RT - PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因 -
曲凡曼15738502617 ______[答案] 你说的应该是real time PCR吧,注意RT其实是逆转录reverse transcription的缩写,和real time一定要分开来. 常说的qPCR,qRT-PCR,都是通过实时(real time)的方法,测定样品中某个模版的起始量ct值 但是呢,由于之前RNA提取、反转等步骤,...

巫媚顺1093如何确定引物二聚体和扩增产物的Tm值? -
曲凡曼15738502617 ______[答案] 最近在做qPCR,今天遇到个样品的浓度很低,想看看能不能做出样品10倍梯度稀释的曲线,于是照常做了. 结果最后的溶解曲线发现,头三个的Tm是84,之后的5个样品时77.从Ct值来看,也是头三个还有点像样,后面的Ct都是33-34. 很显然后面的...