共转染的质粒要减半吗

阳泉呼3641质粒浓度对细胞转染效率有影响吗 -
弓可炉18633718389 ______ 转染细胞的质粒最好是去内毒素的,纯度较高的质粒.在这个前提下,浓度越高越好.

阳泉呼3641不同细胞siRNA转染效率的检测问题 -
弓可炉18633718389 ______ 博凌科为解答:1.通常情况下悬浮细胞转染效率较低,贴壁细胞的转染效率因细胞不同,有些很高有些很低.HepG2的DNA转染效率大概有50%,siRNA暂时没做过.如 果你有GFP质粒和针对GFP的siRNA共转染,用只转染GFP质粒的孔做对照,可以看出转染效率.如果没有针对GFP的siRNA就只能转染GFP质 粒,一般情况下转染DNA好的话,转染siRNA也不会差的.个人觉得细胞本身的性质决定了转染效率.2.不是的.针对GFP的siRNA和我们通常用的化学合成的siRNA一样,只不过是针对GFP基因的.

阳泉呼3641请教,关于lipo2000转染效率低下的原因探讨 -
弓可炉18633718389 ______ 脂质体的转染毒性是最大的,很明显,那么多的细胞死亡是由于转染的细胞毒性导致的.对于这一点我有两个建议,一个是减少DNA的用量,我一般做转染,对于任何细胞,只要是12孔板,一般都是用1ugDNA,这个量绝对够了.,因为质粒转...

阳泉呼3641稳定转染细胞时,质粒总是丢失,大家有什么解决方案吗 -
弓可炉18633718389 ______ 稳定转染的细胞株,就是转染后质粒可以稳定整合到基因组上不会因细胞分裂而丢失.区别于质粒瞬时转染不能长时间保留质粒在细胞里.

阳泉呼3641线虫注射外源性目的基因时可不可以将目的基因与标记基因(比如GFP)放在同一个质粒上? -
弓可炉18633718389 ______ 完全可以放在同一个质粒上,而且确实有人这么干过.不过实践中一般很少直接用IRES隔开,而是两个独立的转录单元,每个转录单元都有独立的启动子和翻译起始位点.这样在构建质粒时相对比较方便.不过,把两个基因放到一个质粒上去,往往造成这个质粒很大,造成转染质粒不便、转染效率低.

阳泉呼3641转化超过10kb的质粒用什么菌株的感受态好 -
弓可炉18633718389 ______ 转化超过10kb的质粒用什么菌株的感受态好 (1)质粒DNA的质量和浓度:用于转化的质粒DNA应主要是超螺旋态的,转化率与外源DNA的浓度在一定范围内成正比,但当加入的外源DNA的量过多或体积过大时,则会使转化率下降.一般地,...

阳泉呼3641求助做SiRNA质粒转染,效率低转染后细胞状态差 -
弓可炉18633718389 ______ 做SiRNA质粒转染,效率低转染后细胞状态差 实验室一直都是用日常型质粒抽提试剂盒,转染细胞没问题.我觉得只要是注意以下2点就可以了:1,注意大肠杆菌(Escherichia coli)本身的污染,收集菌体沉淀时防止菌液散落,经常用75%的乙醇擦拭手套.2,最后洗脱时最好使用无内毒素的水,我们是用注射用水的.无论是小提还是大提我们都是用的日常型的,并没有刻意用转染级的,因为转染量大,去内毒素的操作太麻烦,损失太大.

阳泉呼3641怎样将一基因和另一基因转入pROK2质粒中 -
弓可炉18633718389 ______ 怎样将一基因和另一基因转入pROK2质粒中 完全可以放在同一个质粒上,而且确实有人这么干过.不过实践中一般很少直接用IRES隔开,而是两个独立的转录单元,每个转录单元都有独立的启动子和翻译起始位点.这样在构建质粒时相对比较方便.不过,把两个基因放到一个质粒上去,往往造成这个质粒很大,造成转染质粒不便、转染效率低.

阳泉呼3641做完转染后往培养基里添加生物素,什么时候添加比较合适 -
弓可炉18633718389 ______ 转染时不用加双抗和血清,但是质粒混合培养基后要微孔滤膜过滤,8到12小时候后换有血清的培养基.我们不加双抗的,因为后面要浓缩.如果不浓缩,

阳泉呼3641如何让一个细胞过度表达某种基因,来观察此基因的作用,瞬时转染和稳定转染都用什么方法转染时每个细胞只近入一个质粒还是很多质粒,过度表达的标准... -
弓可炉18633718389 ______[答案] 转染的话一般是以克数来规范转染的质粒数量,所以会有很多质粒.一般转染的质粒除了带有需要过表达的基因以外,还需要带有标记基因.标记基因可以被特定的抗体检测,从而判断是否有效表达.如果你要过表达的是某种蛋白,也...