叠氮钠

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叠氮钠

来源：baiyundou.net 日期：2024-09-24

ELISA即酶联免疫吸附实验，是目前广泛应用于各种抗原抗体检测的方法，主要有灵敏度高和特异性强的特点。ELISA操作步骤看似简单，整个测定过程中却有诸多影响因素，导致检测结果可能与实际结果偏差较大。为帮助大家分析实验中常见问题，我们将常见问题的可能原因和解决方法归纳总结于下表：

问题一：高背景或阴性对照值偏高

可能原因	建议
阴性对照孔被阳性对照或样品污染	洗涤时，勿将洗液溢出孔外
抗体非特异性结合	封闭液不适合，更换封闭液
酶结合物过浓	请检查酶结合物是否按说明书规定稀释
孵育温度过高	检查孵育箱的温度是否正确、稳定
底物在使用前曝光	应保存在暗处，避光
读板前停留时间过长	加终止液后3分钟内读数

问题二：阳性对照值偏低或低吸光度

可能原因	建议
试剂未平衡至室温	实验开始前，将试剂盒从冰箱取出平衡至室温
检测体积偏小	检查移液器吸液管道是否堵塞
孵育时间过短	使用计时器，准确孵育时间
底物受污染	使用新配置的试剂，重新实验
包装袋中有湿气	检查袋中是否有干燥剂
样本中有抑制剂	叠氮钠会抑制HRP酶的活性

问题三：边缘效应

可能原因	建议
蒸发	各步之间，须使用封版胶密封反应板
温度不均匀	校准孵育箱，勿叠放反应板

问题四：标准曲线不佳

可能原因	建议
倍比稀释标准品时未混匀	稀释标准品的每一步均需混匀
过早稀释	标准品在快要使用时稀释
加入的体积不正确	使用校准过的移液器，快速、等量的将标准品分配到各个微孔中

问题五：标准曲标准曲线良好，但样本无检测信号

可能原因	建议
样本中无检测物或检测物含量极低	设置内参，重新实验
样本中其他物质影响/掩盖检测	作适当稀释，降低其他物质的干扰，或作系列稀释，检测回收率
样本中检测物浓度过高，Hook效应导致假低值	适当倍数稀释样本，检测物浓度尽量在试剂盒检测范围内

问题六：重复性较差

可能原因	建议
微孔中有气泡	用针尖挑破气泡
试剂未混匀	确保充分混匀试剂
样本中有杂质或沉淀物	使用前离心
微孔包被面被吸头划破	加液时小心操作
使用用过的封板胶纸	每次须使用新的封板胶封住反应孔

问题七：假阳性反应

可能原因	建议
洗涤不充分	使用前需检查洗板机是否正常工作
洗板机管道堵塞	需经常维护洗板机
加结合物时，洒在微孔边缘	小心向微孔加入结合物，加入微孔底部中央，避免与孔壁和边缘接触
检测样本中含有红细胞	离心
微孔中液体挥发	用封板胶密封反应孔，置于湿盒内

问题八：整块板产生阳性OD值或整个板显蓝色

可能原因	建议
洗涤液体积不足或底物被残留于孔底的结合物所污染	洗涤时，缓冲液充满至孔边缘，但要确保不能溢出孔外
结合物浓度过高	检查是否按照说明书推荐比例稀释
血清中有血清因子	勿加热血清
底物容器不洁净	用酸清洗容器瓶，用蒸馏水冲洗
底物孵育时，微孔板曝光	加底物时，立即将板置于暗处

问题九：整块板OD值偏低

可能原因	建议
显色时间不足	适当延长显色时间
孵育温度偏低	36度为最适反应温度（欣博盛ELISA试剂盒）
未加终止液	加入终止液，增强颜色反应的强度，稳定最终的颜色反应

问题十：显色缓慢

可能原因	建议
样本未置于室温	实验开始前，将样本平衡至室温
酶结合物活性减弱	检测稀释度
酶活性收到抑制如叠氮钠	避免实验不当的防腐剂
显色温度不适当	按说明书操作

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弓京牵17527818678 ______[答案] (1)①氮原子的L层上,2s能级上有2个电子、2p能级上有3个电子,根据能量最低原理、洪特规则、保里不相容原理知,其L层电子排布图为,故答案为:; ②同一周期中,元素第一电离能随着原子序数的增大而呈增大趋...

龚秦庭3891叠氮化钠(NaN3)是一种无色晶体,常见的两种制备方法为2NaNH2+N2O=NaN3+NaOH+NH3,3NaNH2+NaNO3=NaN3+3NaOH+NH3↑.回答下列问题:(1... -
弓京牵17527818678 ______[答案] (1)氟(或F)(1分) 锂(或Li)(1分)(2)(2分)(3)CO2或N2O(1分) 平面三角形(1分)(4)离子晶体(1分) N3+H2OHN3+OH(2分)(5)氨分子之间存在氢键(N2O分子间只存在范德华力,氢键作用较强)(2分)(6)1∶2(1分) 金属键(...

龚秦庭3891何为叠氮化合物 -
弓京牵17527818678 ______ 上面那位,人家问的是叠氮化合物! 有机和无机叠氮化合均为叠氮酸衍生物,其结构通式为RNNN.叠氮酸的重金属盐,如叠氮银(AgN3)、叠氮铅(PbN6)具有高度爆炸性,由于叠氮铅对撞击极为敏感,故用作雷管.一般地说,其碱盐无爆...

龚秦庭3891叠氮化钠(NaN3)是一种无色晶体,常见的两种制备方法为:2NaNH2+N2O═NaN3+NaOH+NH3;3NaNH2+NaNO3═NaN3+3NaOH+NH3↑.回答下列问题:(1... -
弓京牵17527818678 ______[答案] (1)同周期随原子序数增大元素电负性增大、元素的第一电离能呈增大趋势,故氮所在的周期中,第二周期电负性最大的元素... (4)氨基化钠(NaNH2)和叠氮化钠(NaN3)都含有活泼金属Na元素,由阴、阳离子构成,属于离子化合物;叠氮化钠...

龚秦庭3891N与Na能组成离子化合物吗 -
弓京牵17527818678 ______[答案] N与Na能组成离子化合物NaN3和Na3N 其中Na3N是氮化钠;NaN3是叠氮钠,主要用于叠氮化物的制造,医药、农药等的有机合成,还可用于防酶,血清防腐,污水含氮量测定等.应用:汽车安全气囊的气化剂.

龚秦庭3891实验室有毒试剂 -
弓京牵17527818678 ______ 实验室有毒物质介绍和防护注意事项:1.DMSO:DMSO是二甲基亚砜, 用途广泛.用作乙炔、芳烃、二氧化硫及其他气体的溶剂以及腈纶纤维纺丝溶剂.是一种即溶于水又溶于有机溶剂的极为重要的非质子极性溶剂.对皮肤有极强的渗透性,...

龚秦庭3891叠氮钠可以直接加在pbs溶液中吗 -
弓京牵17527818678 ______ 可以,但不能加热.

龚秦庭3891叠氮化钠(NaN3)是无色离子晶体,遇高热或剧烈震动能发生强烈爆炸,快速分解成钠单质和氮气,是汽车安全气囊中的成分之一.下列有关说法正确的是( ... -
弓京牵17527818678 ______[选项] A. NaN3中只含有离子键 B. 1mol NaN3完全分解最多可以产生33.6L N2 C. 当有4.2g N2生成时,转移电子数约为6.02*1022 D. 常温下,NaN3化学性质稳定,包装盒上无需特别说明注意事项

龚秦庭3891叠氮化钠(NaN3)被广泛应用于汽车安全气囊,叠氮化钠的制备:将金属钠与液态氮反应得NaNH2,再将NaNH2与N2O反应可生成NaN3,该反应的化学方... -
弓京牵17527818678 ______[答案] (1)①NaN3中的阳离子为钠离子;②根据质量守恒定律,反应前后原子的种类和数目不变,反应物中有2个钠原子,4个氮原子,4个氢原子,1个氧原子,生成物中有2个钠原子,3个氮原子,1个氢原子,1个氧原子,所以X是NH3...

龚秦庭3891NaN3(叠氮化钠)中氮的化合价是多少? -
弓京牵17527818678 ______[答案] 化合物中各元素的化合价的代数和为0.根据这条规律,由Na为+1价,可知3个N总化合价为-1价,那么每个N的化合价为-1/3 价(负三分之一价).

（编辑：自媒体）