提取rna乙醇配错了

钱连所4076为什么我提取RNA,用异丙醇后没有沉淀出现 -
韩钧怨19674771958 ______ 前面提取的RNA经异丙醇沉淀后,总会含有一些未除去的蛋白和其它杂质分子,这些蛋白和杂质分子如果不除尽的话,就会直接影响所提取的RNA的纯度和稳定性.为此,就需要用70%乙醇洗涤沉淀(因为在70%乙醇里RNA是不溶的,而一些蛋白和其它杂质分子却可溶),并且最好是洗涤2次,然后高速离心后,倒去上清,即可得到较纯的RNA沉淀.用无水乙醇则达不到这个目的

钱连所4076请教一下在提取RNA时加入乙醇是加冷冻的效果好还是加常温的效果好啊 -
韩钧怨19674771958 ______[答案] 通常我们会加2.5倍体积的放在冰上的无水乙醇,再加十分之一体积的3M醋酸钠(PH5.2),放到-20℃过夜沉淀.注意RNA容易降解,要用DNase&RNase free的枪头及离心管.

钱连所4076怎么配75%乙醇(DEPC处理水配制)?提RNA用…… -
韩钧怨19674771958 ______[答案] 先配置DEPC水,1000 ml双蒸水加1 ml DEPC,不用灭菌. 100%的乙醇与DEPC水按3:1的体积比配置;或者x%(x>75)的乙醇75 ml,加DEPC水至x ml.一段时间(一般12小时左右)后再高压灭菌.

钱连所4076提取RNA时,最后为什么要用75%乙醇洗涤
韩钧怨19674771958 ______ 因为在70%乙醇里DNA是不溶的,而盐离子却可溶. 沉淀DNA时总会加入高浓度的盐,加盐的目的是破坏能使蛋白质保持稳定的两个因素,使蛋白和DNA分离并沉淀下来.而此时盐的阳离子会与DNA结合形成DNA-阳离子盐溶于溶液中,再用无水乙醇可以将DNA-阳离子盐沉淀下来,但这样DNA中就含有较多的盐离子,这会影响下一步实验的进行,所以要用70%乙醇洗涤DNA沉淀.

钱连所4076为什么提取RNA的浓度总是太低 -
韩钧怨19674771958 ______[答案] rna.提取 称取鲜酵母 159或干酵母粉 2.5g,倒入 100ml三角瓶中,加 NaCl 2.5g,水25ml,搅拌均匀,置于沸水浴中提取lh. 2.分离 将上述提取液用自来水冷却后,装入大离心管内,以4000r/min离心10min,使提取液与菌体残渣等分离. 3.沉淀RNA 将...

钱连所4076DNA是否会溶于低浓度的酒精(30%) -
韩钧怨19674771958 ______ 不溶 DNA提取时用的都是纯的冰乙醇 我有一次提取的时候用的80%的冷酒精 结果最后电泳就没结果了

钱连所4076如何从酵母中提取到较纯的RNA -
韩钧怨19674771958 ______[答案] NaOH溶液与干酵母粉研磨时一定要彻底充分,这样保证RNA与碱性充分溶解.与乙醇混和时,一定要搅拌均匀,这样利于其他有机物充分溶解在乙醇中.离心中做到不要太满,影响效果.

钱连所4076在提取植物DNA的过程中,怎样才能知道提取的DNA在哪一步丢失,而最终导致DNA的提取不成功? -
韩钧怨19674771958 ______ 我觉得没有必要这样做,只有在乙醇沉淀的时候可以大约看下有没有核酸的絮状沉淀,而在每一个步骤检查会很麻烦的. 提取不成功,首先检查步骤是否正确;然后检查试剂是否可能有配错的或使用错的;再检查使用的材料是否合适,数量太多或太少都影响提取. 最后就是重复实验,手熟了就容易了.

钱连所4076DNA 提取在加RNA酶前用乙醇沉淀有沉淀 但电泳没有条带 -
韩钧怨19674771958 ______[答案] 在加RNA 酶前DNA就已经丢失,或者加酶后提取步骤将RNA丢失,出现沉淀是杂质吧.检查一下每步操作,重复.

钱连所4076RNA在酒精中的溶解性怎样?RNA可以溶于酒精吗?如果提取大肠杆菌染色体DNA时混有RNA再做7%的琼脂糖凝胶电泳会有什么影响? -
韩钧怨19674771958 ______[答案] 不能溶于酒精 提取中都是用酒精洗脱盐离子使DNA或RNA沉淀下来 本身是不溶于酒精的 混有RNA的话基本是没有影响的 因为RNA比DNA要跑的快 跑完后会在胶的最前段 而且残留的RNA很大部分因为无处不在的RNA酶而降解 所以基本没问题 还有...