提质粒为什么要单菌落

甄思轰3808质粒DNA提取时质粒为何会丢失? -
耿杜克17290141558 ______ 中稳定存在,经多次转接后有可能造成质粒丢失.因此不要频繁转接,每次接种时应接种单菌落.另外,检查筛选 用

甄思轰3808菌落pcr是否可以直接扩增基因组上的目的基因?单菌落需要特殊处理吗 -
耿杜克17290141558 ______ 可以的.我们验证转化结果时就是根据这个原理的,只不过一般是扩增质粒内的基因,但如果有正确的引物,同样可以扩增基因组上的基因的 关于单菌落的处理,一般是把菌落挑到无菌水里,然后沸水煮5min就可以了,目的就是把细菌细胞壁以及细胞膜破坏掉,以使基因暴露

甄思轰3808为什么用碱法提取质粒,电泳后没有出现条带呢? -
耿杜克17290141558 ______ 嘛,这个原因多了 1、你确定你提取质粒收的菌没有被污染?我曾经就遇上过这种事,提了N遍都没结果,泪奔……最后重新挑单菌落接种重提.你得确定你的菌里面有质粒哦~ 2、你琼脂糖凝胶浓度和质粒大小相配么?假如浓度太低的话没跑一...

甄思轰3808提质粒的目的是什么?酶切的目的是什么? -
耿杜克17290141558 ______ 提取质粒作为运载体,运载体必须具备以下条件: 1.能够在宿主细胞内复制并稳定保存; 2.具有多个限制酶的切点,以便与不同的外来基因链接; 3.具有某些标记基因,便于进行筛选. >>常用的运载体有:质粒、噬菌体、灭活的动植物病毒等;而质粒为最常用的运载体. 酶切的目的即为了获得目的基因.

甄思轰3808细菌已经通过摇床摇起,送测序为什么说提取质粒失败,要从新摇菌呢 -
耿杜克17290141558 ______ 因为你用的是表达用的菌株,这里的质粒的拷贝数都不高,所以你可以把质粒自己提取出来,洗脱的时候少加点洗脱液,拿质粒去测序.还可以把这个质粒转到DH5a中,送去测序.

甄思轰3808求问提取质粒时为什么总是由总DNA -
耿杜克17290141558 ______ 提取质粒时为什么总是由总DNA 不对,通过转化到感受态细菌中,不是细胞.感受态的大肠杆菌,可以自己制作也可以通过购买.之后将细菌凃到含有抗生素的板子上,长出克隆后挑取单克隆,将单克隆加入含有抗生素的细菌培养基中培养,之后提取质粒,提取质粒可以购买相应的试剂盒,按照试剂盒的说明书操作即可.质粒是带有抗性基因的,只有含有该质粒的细菌才能在含有对应抗生素的培养基中存活并增殖,这样就能确保是你的表达载体质粒.当然为了防止杂菌的污染,整个过程中最好是无菌操作.而表达载体质粒有可能出现突变等情况,所以可以在提出质粒之后,取少量质粒送测序,来确保序列的无误.

甄思轰3808质粒DNA转化实验中阴性对照有菌落出现,说明了什么 -
耿杜克17290141558 ______ 抗生素失效或细菌突变产生抗性 仅供参考

甄思轰3808质粒dna提取的时候,为什么要加氨苄青霉素 -
耿杜克17290141558 ______ 汗,没听说过氨苄青霉素可以破坏细胞壁的,这样子的话就不需要碱裂解了,氨苄青霉素肯定是在扩增菌体的时候加入培养基的,不会对提取本身造成影响,但是可以阻止杂菌生长,增加目的质粒的拷贝数(前提是,质粒是氨苄抗性的,别加错啦)

甄思轰3808细菌为什么会出现质粒? -
耿杜克17290141558 ______ 为什么会出现质粒只能说是细菌的进化使之出现来解释了.质粒是细菌裸核外的遗传物质,编码非细菌生命所必须的某些生物学性状如性菌毛、毒素和耐药性等.质粒可自主复制、传给子代、也可丢失及在细菌之间转移等特性.

甄思轰3808DNA克隆,单菌落很多,检测不到目的条带,求高人指点 -
耿杜克17290141558 ______ 用的什么Taq酶?有些高保真的Taq酶不能再PCR产物末端加A,不适用于T载体. PCR产物回收后有跑胶鉴定吗?浓度如何,浓度太低的话,连接阳性率也很低的. 另,能长出很多单菌落,说明你的板子、感受态都没有问题.