涂板不长菌的原因

方尹凌5082感受态细菌DH5a可以不加质粒直接涂板吗?步骤呢? -
俟崔伯17355504259 ______ 这个对照不太对,因为加质粒涂板一般那个平板是有抗生素的,而不加质粒涂板一般是需要不加抗生素的,没有对照的意义.一般是找一个以前做过的或者比较有代表性的质粒转化后作为对照,这样才能显示出感受态的好坏,否则不转质粒,“感受态细胞”这个词也无从说起.

方尹凌5082平板计数琼脂做细菌培养,却一个菌落群都没有!什么原因
俟崔伯17355504259 ______ 是不是平板不对啊,比如说抗生素加错了,比如说是抗B地,你加的是A;或者不用加抗生素你加了;如果只是个别一个都没长,还有可能是你忘了往上涂菌了...再比如是你的平板倒错了,如果菌是氨基酸缺陷的,你在配平板的时候忘了补加氨基酸了??

方尹凌5082菌落PCR阳性,目的片段2300bp,假阴性可能性很小,但是我取菌涂板子后,竟然没长出来, -
俟崔伯17355504259 ______ 有抗性吗?菌扩增,应该是重组质粒有转化进去的. 菌液PCR建议: 上游引物:选择载体上的一段序列 下游引物:选择目的基因的反向引物 这种假阳性可能性很小

方尹凌5082为什么我制作感受态细胞平板上面什么都没有?连杂菌都没有? -
俟崔伯17355504259 ______ 抗生素平板么?感受态制作失败菌死光了/转化失败没有质粒转入/抗生素类别搞错了

方尹凌5082如何用涂布棒在平板上涂出均匀的单菌落 -
俟崔伯17355504259 ______ 1.还是首要考虑稀释度的问题或者是减少稀释液取用量. 2.考虑菌落的形态问题,不会单菌落本身就容易形成纯菌落等. 3.改用接种环,毕竟接种环的接触面比涂布棒下. 最后划线或涂布的时候,一定要分散.因为菌液量少可能看不见,必须注意.可预先在平板背面用油性笔画分开几个区域,方便划线或涂布!

方尹凌5082转化大肠杆菌CMR抗性板上一个也不长怎么回事 -
俟崔伯17355504259 ______ (1)感受态细胞效率不高,或者根本不是感受态--》制备新的感受态 (2)抗生素不正确 (3)细胞长的太慢,(延长时间观察) (4)目的基因太毒,细胞被毒死了

方尹凌5082菌落PCR有目的条带与菌液PCR却什么都没有 -
俟崔伯17355504259 ______ 很正常,常见的原因是转化后涂板,转化用的连接产物种有大量基因片段.

方尹凌5082转化后的菌液怎样接种到平板上比较好我们在做转化时,涂班时老是长成团没单个菌落,画线时又长不起来 -
俟崔伯17355504259 ______[答案] 你应该是有基础的,所以我回答就简要的说一下,转化纯质粒转化吧?转化的时候,摇40分钟,涂板的时候少吸点,不要离心,100要是还不单,就50,实在还是长得比较糊就摇完之后少吸点之后再加新的LB稀释,再吸点涂,总之就是要稀一点,我...

方尹凌5082大肠杆菌转化过程中加入的LB污染了,涂在氨苄抗性平板上有12个板子没长菌落? -
俟崔伯17355504259 ______ 阳转? 不是培养基的问题就是感受态的问题呗 换一下就知道了

方尹凌5082平板上的菌落出现稠密或长成片状现象的原因可能是什么?应怎样改进?
俟崔伯17355504259 ______ 转化涂板时接种的菌液太多 或没有涂均匀 如果能帮助到你,把我回答的问题设置为“好评”.