正常的质粒电泳图

连扶爱2146问个重组质粒的电泳图和重组质粒pcr产物的电泳图的基本问题 -
符芝阳15841079484 ______ 首先,重组后的质粒肯定比载体大,可以通过电泳一定的区分,通过这个对比的话最好是酶切过后的 其次,因为你重组的片段是通过PCR扩增出来的,所以你重组要是成功了,那么就可以用相同的引物扩增出来,所以PCR做完了过后,电泳时会出现和目的条带一样大的条带,反之则不成功 显然这两种方法第二种最靠谱,第一种情况由于质粒较大,要是插入片段太小的话,可能分的不是很清楚,最后电泳的意义就在于看插入片段是否正确,并且理论上看是不是正确的插入方向

连扶爱2146刚活化后 提取的质粒(小量试剂盒提取法) 电泳图为什么会出现2、3条带? -
符芝阳15841079484 ______ 这是很正常的,质粒提取过程中或多或少会对质粒本身造成一定的损伤,根据损伤的不同,质粒通常会出现三种不同的构型,分别是双链环状,线性分子(机械损伤造成质粒链完全断开)和单链开环(双链中只有一条链断开,另外一条是闭合的...

连扶爱2146质粒DNA经电泳后图上为什么只有两条带 -
符芝阳15841079484 ______[答案] 如果是刚抽出来的质粒,好的只有一条带:超螺旋条带 如果提取裂解步骤过于剧烈,则会出现两条带:超螺旋和开环质粒 有时候会出现三条带:超螺旋、开环质粒和复制中间体

连扶爱2146质粒图谱怎么看(质粒)
符芝阳15841079484 ______ 1、细菌质粒是独立于细菌染色体的自主复制的环状双链DNA分子,只有酵母的杀伤质粒(killerplasmid)已知是RNA分子.2、环形双链DNA分子有三种构型.3、第一种...

连扶爱2146为什么DNA质粒中的三种形态的电泳速度不同 -
符芝阳15841079484 ______ 正常质粒是闭合的双链DNA.在电泳过程中可能使质粒发生开环,或者由开环解开螺旋变成线形.这三种形态电泳时的分离率不同,分离速度不同,分成三带.闭环(超螺旋),开环,线形的螺旋率依次降低.(开环质粒是指双链环状的质粒DNA有部分解链,因此电泳速度最慢)三种构像的质粒在琼脂糖电泳的前后顺序是超螺旋>线形>开环,线形的质粒在中间,而开环的质粒在最后.判断质粒质粒好坏的一个指标就是超螺旋质粒在所以质粒中的含量.

连扶爱2146为什么抽提的质粒大于目的片段和载体的和 -
符芝阳15841079484 ______[答案] 不知道具体的情况是什么,只能有几种猜测: 1.有些DNA MAKER的质量不是很好,略微的偏差是正常的. 2.电泳时质粒的状态对最后的结果有很大的影响,双螺旋闭环的质粒电泳时跑得快,比实际偏小,而提取质粒时裂解过了的质粒会开环,此时...

连扶爱2146...提出的质粒会不会有残留菌体污染呢?质粒大抽时,加入P2后菌体未裂解充分就加入P3,提出的质粒OD值在正常范围内,电泳也没有问题,但会不会有残... -
符芝阳15841079484 ______[答案] 这要你这些指标都正确,应该没问题.裂解不充分只会影响产量和品质.菌体不会溶于上清

连扶爱2146提取质粒还没加Rna酶为何电泳中不见Rna最近三次都是这样.测出的质粒浓度不是很高,A260/A280比值正常,都在1.6 - 2.2之间,就是电泳中不见rna.有人说... -
符芝阳15841079484 ______[答案] 一般来说,提取质粒所用的试剂盒已经加入了RNase,所以电泳跑胶不会出现RNA条带.即使是采用的人工方法提取,也不可避免的空气中,汗液,唾液等中丰富的RNase的降解.此外,按照你的问题来看,你应该是再提取质粒,提取质粒然...

连扶爱2146如何通过电泳图谱判断质粒分子量 -
符芝阳15841079484 ______[答案] 直接用环状的质粒跑电泳是很难判断其分子量的 一般来说要先找到上面的一个相应的酶切位点(这个酶在这个质粒上只有一个识别域).把质粒完全切开后再跑琼脂糖凝胶电泳,配合适当的marker就可以比较准确的判断质粒的分子量. 有问题一起讨论...

连扶爱2146...抽提出的质粒是否有菌体污染呢?质粒大抽时,加入P2后菌体还未裂解充分就加入P3,抽提出的质粒除量少点外,OD值在正常范围内的,电泳后也在目... -
符芝阳15841079484 ______[答案] 菌体污染那概率太小了,你要说细菌基因组污染是有可能的,P2是裂解液,作用时间短,裂解不充分,作用时间长,很容易导致基因组污染