氯仿抽提rna分层

辛符映1012提取昆虫RNA有哪些方法? -
易迫炒18465369045 ______ 1.组织取材后,在酒精里泡一下立即放入冻存管,快速放入液氮.实验时,在液氮中将组织研磨成粉末,趁液氮未挥发将粉末转移到EP管.加入1ml Trizol,吸打均匀,静置5min. 2.加入200微升的氯仿,剧烈震荡30s,室温放置10min,离心...

辛符映1012怎么提取RNA? -
易迫炒18465369045 ______ 我们实验室用的是TRIZOL试剂盒,原理就是先组织匀浆,然后将RNA与蛋白质等分离,这个用的是戊二醇,然后再用柱子加各种溶剂,各种12000r/min离心,多次离心之后,经过洗涤干燥,再溶于DEPC水就可以冷藏了. 整个实验中要注意尽量避免实验材料与空气接触,以免被RNA酶降解其中的RNA,要知道RNA酶可是无处不在啊,还有DEPC是有毒的(一般分子实验所用的都多多少少有毒...),所以要小心~

辛符映1012RNA提取的关键步骤是??? -
易迫炒18465369045 ______ 我只知道DNA的 析出含DNA的黏稠物:蒸馏水300mL,逆时针方向搅拌,缓慢搅拌..朝一个方向..避免DNA折断

辛符映1012DNA和RNA提取原理是什么?还有相关试剂盒的原理,各步的作用~ -
易迫炒18465369045 ______[答案] TRIzol试剂有多组分分离作用,与其他方法如硫氰酸胍/酚法、酚/SDS法、盐酸胍法、硫氰酸胍法等相比,最大特点是可同时分离一个样品的RNA\DNA\蛋白质.TRIzol使样品匀浆化,细胞裂解,溶解细胞内含物,同时因含有RNase抑制剂可保持RNA的...

辛符映1012DNA中混有RNA和蛋白质,请问怎么去除 -
易迫炒18465369045 ______ dna中混有rna和蛋白质,去除方法: 1,首先溶解样品. 2,加氯仿,15000rpm 4度 15分钟离心. 3,上层(水层rna),中间层(半固体),下层(有机溶剂层dna,加乙醇可沉淀出来).

辛符映1012请教如何从培养细胞提取mRNA -
易迫炒18465369045 ______ 离心收集细胞. 可用0.5MLltrizol,振荡--- 100微升氯仿 ,剧烈振荡,分层静置,12000RPM台式离心机 4度 10分钟--------取80%上清 ,加500微升异丙醇,沉淀总RNA,12000RPM,4度,5分钟 ----弃上清,加1ML75%冰乙醇洗涤,12000RPM,4度,5分钟------倒去吸边,空气中干燥30分钟-------加20-50微升DEPC处理的消毒三蒸水,溶解,低温保存备用.如果不保留样本,可不用DEPC处理的三蒸水,用消毒三蒸水即可则进入逆转录. 另外液体的体积可按上述比例.

辛符映1012酚氯仿抽提DNA体系后出现的现象及成因,沉淀DNA时为什么要用无水乙醇 -
易迫炒18465369045 ______[答案] 酚氯仿抽提DNA后,会使溶液分层,上层为水相,含有DNA;中间为蛋白(有时看不到);下层为有机相. 原因是酚氯仿可以使蛋白质变性,从而从溶液中析出,但是蛋白密度会小于酚氯仿,所以离心后它分布在中间;而DNA溶于水而不溶于有机相....

辛符映1012酚氯仿纯化DNA时候RNA在哪里?酚氯仿纯化DNA,加入酚氯仿后溶液分为有机相和水相,DNA在水相,蛋白在有机相,那么RNA在哪里? -
易迫炒18465369045 ______[答案] 如果没有特殊保护的话,RNA很可能已经在降解了.如果不降解,那就和DNA处于同一相.