涂布棒

大肠杆菌转化可以：（1）将重组 DNA 分子导入大肠杆菌受体细胞进行复制，增殖和表达， 以获得目的基因；（2）验证大肠杆菌感受态细胞效果；（3）用于分子生物学其他研究。

1 原理：

质粒 DNA 粘附在细菌细胞表面，经过 42°C 短时间的热击处理，促进吸收 DNA.然后在非 选择培养基中培养一代，待质粒上所带的抗菌素基因表达，就可以在含抗菌素的培养基中生 长。

2 器材：

旋涡混合器，微量移液取样器，移液器吸头，1.5ml 微量离心管，双面微量离心管架，干 式恒温气浴（或恒温水浴锅），制冰机，恒温摇床，培养皿（已铺好固体 LB-Amp），超 净工作台，酒精灯，玻璃涂棒，恒温培养箱。

3 材料和试剂：

质粒 DNA，重组 DNA，培养基（不加抗菌素），LB 培养基（加抗菌素），无菌 ddH2O， IPTG，X-gal。

4 实验准备：

无菌 ddH2O，1.5ml  离心管装入铝制饭盒（灭菌）、移液器吸头装入相应的吸头盒（灭菌），20%IPTG（M/V），2% X-gal（M/V，用 N,N-二甲基甲酰胺配）。

5 操作步骤：

（1）事先将恒温水浴的温度调到 42℃。

（2）从-70℃ 超低温冰柜中取出一管（100μl）感受态菌，立即用手指加温融化后插入冰 上，冰浴 5~10min。

（3） 加入 5μl 连接好的质粒混合液（DNA 含量不超过 100ng），轻轻震荡后放置冰上20min。

（4）轻轻摇匀后插入 42℃水浴中 1~2min 进行热休克，然后迅速放回冰中，静置 3~5min。

（5） 在超净工作台中向上述各管中分别加入 500μl LB 培养基（不含抗菌素）轻轻混匀， 然后固定到摇床的弹簧架上 37℃震荡 1h.

（6） 在超净工作台中取上述转化混合液 100~300μl，分别滴到含合适抗菌素的固体 LB 平板培养皿中，用酒精灯烧过的玻璃涂布棒涂布均匀（注意：玻璃涂布棒上的酒精熄灭后稍 等片刻，待其冷却后再涂）。

（7）如果载体和宿主菌适合蓝白斑筛选的话，滴完菌液后再在平板上滴加 40μl 2% X-gal， 8μl 20% IPTG，用酒精灯烧过的玻璃涂布棒涂布均匀。

（8） 在涂好的培养皿上做上标记，先放置在 37℃恒温培养箱中 30-60min 直到表面的液 体都渗透到培养基里后，再倒置过来放入 37℃恒温培养箱过夜。

（9）  在被细菌污染的桌面上喷洒 70%乙醇，擦干桌面，写实验报告。

（10）观察平板上长出的菌落克隆，以菌落之间能互相分开为好。注意白色菌斑。

席帝古4491国产的线棒涂布器和进口的有什么区别? -
容扶庞19233342099 ______ 据南北潮商城的技术人员介绍,在国内很多的油墨油漆行业企业厂家所用的线棒都会选择国外进口的线棒,那么为什么那么多的企业厂家喜欢选择进口的刮线棒呢?其原因是普遍进口的线棒在质量、造工、精度方面都比国内的做得要好,使用的寿命也有所差距,因此在生产中,要求打样制膜的精度较高的一般会选择进口的刮墨棒.反之如果对涂膜的精度等要求不是特别高则可以选择经济型的国产线棒,目前国内线棒涂布器中,展翼的属于性价比最高的.

席帝古4491线棒涂布器都有哪些种类,我需要涂布效果好的 -
容扶庞19233342099 ______ 进口的有RDS、RK、OSP这几个主流,国产的有pushen,展翼、科信、精科等.首选南北潮商城.专做涂布线棒而出名的.

席帝古4491麦勒棒涂布器(mayer bar rod)指的是什么,我想知道具体的价格?在什么地方可以买到? -
容扶庞19233342099 ______ 是一种滚涂油漆的工具,叫麦勒棒涂布器 (Mayer bar),原理是将细不锈钢丝均匀且紧密缠绕在钢棒上,并利用不锈钢丝间的缝隙将压敏胶粘剂均匀涂布在基材上的装置.价格,货期,技术参数您可以从南北潮商城上面查看,他们专做油墨涂料检测仪器的平台.

席帝古4491微生物实验 -
容扶庞19233342099 ______ 一片白?全是菌落吗?如果是的话就是你涂平板时用的菌液太浓导致菌落和菌落之间无法分开,连成一片.另外,涂布时用的涂布棒或是接种环在灼烧后应接触培养皿上盖内侧一会儿,在降温后在去接触菌液,不然容易烫死细菌. 服了你,我敢...

席帝古4491质粒如何提取
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席帝古4491涂布机上的涂布装置都有哪些?
容扶庞19233342099 ______ 计量棒涂布器在特种纸涂布上应用比较普遍,主要是它具有较好的涂布和计量效果,使用和维护也比较方便.它主要由计量棒、棒座、升降装置、传动装置等组成,计量棒为单独交流电机变频传动,计量棒涂布器一般设计成可升降的形式,以控制涂布量满足不同的生产需要. 计量棒安装在具有补偿功能的棒座内,棒座内通有冷水对棒进行润滑和清洗.计量棒有光棒和缠丝棒之分,直径6.3~13.65mm不等,视设备的工艺和使用情况而有所区别.