玻璃涂布棒
大肠杆菌转化可以：（1）将重组 DNA 分子导入大肠杆菌受体细胞进行复制，增殖和表达， 以获得目的基因；（2）验证大肠杆菌感受态细胞效果；（3）用于分子生物学其他研究。
1 原理：
质粒 DNA 粘附在细菌细胞表面，经过 42°C 短时间的热击处理，促进吸收 DNA.然后在非 选择培养基中培养一代，待质粒上所带的抗菌素基因表达，就可以在含抗菌素的培养基中生 长。
2 器材：
旋涡混合器，微量移液取样器，移液器吸头，1.5ml 微量离心管，双面微量离心管架，干 式恒温气浴（或恒温水浴锅），制冰机，恒温摇床，培养皿（已铺好固体 LB-Amp），超 净工作台，酒精灯，玻璃涂棒，恒温培养箱。
3 材料和试剂：
质粒 DNA，重组 DNA，培养基（不加抗菌素），LB 培养基（加抗菌素），无菌 ddH2O， IPTG，X-gal。
4 实验准备：
无菌 ddH2O，1.5ml 离心管装入铝制饭盒（灭菌）、移液器吸头装入相应的吸头盒（灭菌），20%IPTG（M/V），2% X-gal（M/V，用 N,N-二甲基甲酰胺配）。
5 操作步骤：
（1）事先将恒温水浴的温度调到 42℃。
（2）从-70℃ 超低温冰柜中取出一管（100μl）感受态菌，立即用手指加温融化后插入冰 上，冰浴 5~10min。
（3） 加入 5μl 连接好的质粒混合液（DNA 含量不超过 100ng），轻轻震荡后放置冰上20min。
（4）轻轻摇匀后插入 42℃水浴中 1~2min 进行热休克，然后迅速放回冰中，静置 3~5min。
（5） 在超净工作台中向上述各管中分别加入 500μl LB 培养基（不含抗菌素）轻轻混匀， 然后固定到摇床的弹簧架上 37℃震荡 1h.
（6） 在超净工作台中取上述转化混合液 100~300μl，分别滴到含合适抗菌素的固体 LB 平板培养皿中，用酒精灯烧过的玻璃涂布棒涂布均匀（注意：玻璃涂布棒上的酒精熄灭后稍 等片刻，待其冷却后再涂）。
（7）如果载体和宿主菌适合蓝白斑筛选的话，滴完菌液后再在平板上滴加 40μl 2% X-gal， 8μl 20% IPTG，用酒精灯烧过的玻璃涂布棒涂布均匀。
（8） 在涂好的培养皿上做上标记，先放置在 37℃恒温培养箱中 30-60min 直到表面的液 体都渗透到培养基里后，再倒置过来放入 37℃恒温培养箱过夜。
（9） 在被细菌污染的桌面上喷洒 70%乙醇，擦干桌面，写实验报告。
（10）观察平板上长出的菌落克隆，以菌落之间能互相分开为好。注意白色菌斑。
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边殃果1423谁知道无菌培养的基本过程是什么?谢谢 -
慕匡于18043425044 ______ 无菌操作技术不仅在微生物学研究和应用上起着举足轻重的作用,在许多生物技术中也被广泛应用,例如转基因技术、单克隆抗体技术等. 无菌室,微生物实验室内专辟的一个小房间,室外设一个缓冲间,缓冲间的门和无菌室的门不要朝向同一...
边殃果1423如何用涂布棒在平板上涂出均匀的单菌落 -
慕匡于18043425044 ______ 1.还是首要考虑稀释度的问题或者是减少稀释液取用量. 2.考虑菌落的形态问题,不会单菌落本身就容易形成纯菌落等. 3.改用接种环,毕竟接种环的接触面比涂布棒下. 最后划线或涂布的时候,一定要分散.因为菌液量少可能看不见,必须注意.可预先在平板背面用油性笔画分开几个区域,方便划线或涂布!
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慕匡于18043425044 ______ L型棒,或者叫L型涂布棒. 有一次性的,也可以用接种环相同材料的丝自己制作.
边殃果1423涂布平板操作第二步如何进行无菌操作? -
慕匡于18043425044 ______ 你好,涂布平板操作的第二步是取不超过0.1ml的菌液滴加到培养基,这一过程的无菌操作是通过在酒精灯火焰旁进行操作而实施的
边殃果1423涂布棒在酒精灯上过之后在超净台放置一段时间再用可以吗 -
慕匡于18043425044 ______ 理论上不可以
边殃果1423麦勒棒涂布器(mayer bar rod)指的是什么,我想知道具体的价格?在什么地方可以买到? -
慕匡于18043425044 ______ 是一种滚涂油漆的工具,叫麦勒棒涂布器 (Mayer bar),原理是将细不锈钢丝均匀且紧密缠绕在钢棒上,并利用不锈钢丝间的缝隙将压敏胶粘剂均匀涂布在基材上的装置.价格,货期,技术参数您可以从南北潮商城上面查看,他们专做油墨涂料检测仪器的平台.
边殃果1423平板划线法为什么不能计数,稀释涂布平板法为什么可以计数和纯化. -
慕匡于18043425044 ______ 平板划线法最开始的划线很可能菌类会长成一片,导致无法计数,此外灼烧接种环接种针的时候也会杀死一部分菌类.稀释涂布平板法是稀释一组浓度梯度,在合适的稀释浓度可以确定菌类的密度,通过计算可以得知原液的浓度.因为长成的是一个真菌或者细菌分裂而来互不相接触的菌落 所以可以纯化.
边殃果1423L型涂布棒哪里有买? -
慕匡于18043425044 ______ 师姐实验室用的国产上海晶安生物.