电泳样品跑不动

蓬陆以1875有谁知道胶体电泳如果不加辅助液会出现什么情况啊? -
宿程雨18762426811 ______ 如果不加电泳缓冲液的话,电泳槽的正极与负极就没法通电,也就不存在电场了,胶上的样品(DNA或蛋白)当然就待在远地跑不动了. 电泳技术,是指在电场作用下,带电颗粒在由于所带的电荷不同以及分子大小差异而有不同的迁移行为从...

蓬陆以1875为什么我的同工酶电泳后来跑的都不好 -
宿程雨18762426811 ______ 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)是在不加入SDS 疏基乙醇等变性剂的条件下, 对保持活性的蛋白质进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,常用于同工酶的鉴定和提纯.未加SDS的天然聚丙烯酰胺凝胶电泳可以使生物大分子在电泳过程中保持其天然的形状和电荷,它们的分离是依据其电泳迁移率的不同和凝胶的分子筛作用,因而可以得到较高的分辨率,尤其是在电泳分离后仍能保持蛋白质和酶等生物大分子的生物活性,对于生物大分子的鉴定有重要意义,其方法是在凝胶上进行两份相同样品的电泳,电泳后将凝胶切成两半,一半用于活性染色,对某个特定的生物大分子进行鉴定,另一半用于所有样品的染色,以分析样品中各种生物大分子的种类和含量.

蓬陆以1875sds - page电泳为什么跑不出蛋白条带?连marker的也没有.请高手指教,详细一点. -
宿程雨18762426811 ______ 上样缓冲液混合后进行变性,温度必须要超过95°,时间5—10min,如果没把握,可以处理10min.也有可能是漏胶,制胶时封胶要严,操作不熟练时可以多加一点,待聚合后用去离子水加入电泳槽内,看看是否会漏,如果不会把水倒掉,滤纸吸干后再加入凝胶.加样的问题,加样时注意不要刺破凝胶,以避免样品直接漏出.

蓬陆以1875sds - page电泳怎么跑不出东西来! -
宿程雨18762426811 ______ 首先,你用实验确定该蛋白表达了吗?比如在DNA水平、RNA水平是否验证? 其次,阳性菌虽然比阴性菌破壁困难,但破壁的方法还是很多的,关键是破壁的同时不要让你的目的蛋白损失或降解; 最后,仔细分析你的电泳各个环节时候有问题.阴性和阳性对照样品一定要有,分析起来很容易 祝试验早日成功!

蓬陆以1875PCR产物电泳,相同的条件却跑不出带了,半个月前就跑出来了,而且效果很好的.首先我能确定不是模板的问题.然后,因为之前跑出来过,引物和程序也应... -
宿程雨18762426811 ______[答案] 是不是镁离子的浓度有变化啊?你说的跑不出是什么样子?没有主带还是前面还有一条细细的带?如果是这样的话,最前面的是引物二聚体. 以前我也出现完全都是弥散的情况,完全没有带,作后检查是引物的问题.PCR我用成了M13.就错了,你检查...

蓬陆以1875您好,我最近在做聚丙烯酰胺凝胶电泳,但每次都跑不出带,我很着急,希望你能给我一些建议 -
宿程雨18762426811 ______ 你的marker分子量是否合适? 如果不合适,仅调整分离胶的浓度的话,产物是看不出来的. 你确定产物能跑出来?(打击你一下,有可能产物浓度过低,要知道SDSPAGE也是有分辨浓度问题的) 有很多具体情况,建议你到丁香园上发这个帖子讨论吧.

蓬陆以1875SDS - 聚丙烯酰胺凝胶电泳实验 -
宿程雨18762426811 ______ 你的样品是不是浓度太高了,所以蛋白质都聚集沉淀了?你也可以先检查一下电路是否有问题,不排除是电泳电源不好使;另外你的电流有点高,可能是电流大导致过热,凝胶变性

蓬陆以1875琼脂糖电泳没跑出条带的原因 -
宿程雨18762426811 ______ 点样没点好或者制孔没制好,样品没提出DNA 根据目的条带长度来调整凝胶浓度,一般1.5%左右,也不一定. 紫外灯下没见带,不一定没有出孔,而是量少看不到,可以测一下浓度看一下,或直接试跑一下PCR. 电泳时间可能过长,一般75v*30min左右,但是具体看溴酚蓝的离孔距离和目的条带离孔距离.

蓬陆以1875westernblottingmarker跑不开是什么原因 -
宿程雨18762426811 ______ 可能的原因有, maker加的量少,半干法转膜的时候转缓液加多了,maker没有保存好,如长期放在室温分解了,也可能是跑电泳的胶的问题.跑胶的时候电压越小条带相对弥散些,不过还不至于maker不清楚.

蓬陆以1875跑电泳时样品不在一直线上,是什么原因 -
宿程雨18762426811 ______ 可能是你的胶不匀,还有可能是你的Buffer用的次数太多,还有可能是你的电泳槽的电极线有问题.