瞬转质粒能维持几天

昌康印632震荡能使质粒破坏吗
戎绿黎18145551098 ______ 一般机械振动是很难破坏质粒的.在离心机中一万两千转的速度都不能破坏质粒.一般的超声波清洗机也做不到.要用专门的超声波细胞破碎仪才可以将DNA打碎. 如果你讲的是采用碱裂解法裂解细胞提取质粒DNA,加入试剂以后要柔和混匀,不要剧烈震荡,不是因为单纯的机械震荡会使质粒破坏,而是因为碱裂解法加了化学试剂,它能够破坏质粒,为避免造成所提质粒中出现基因组DNA污染,不能用力摇动. 你如果不加任何试剂,随你怎么摇也不会破坏质粒.

昌康印632是否瞬转成功如何检测 -
戎绿黎18145551098 ______ 博凌科为解答:可以先使用有荧光蛋白的空载体验证整个系统的转染效率,用流式检测就可以了,非常方便.确定转染效率没有问题后可以转染带有目的基因的质粒.对于转染效果的验证主要取决于你的目的蛋白的性质.主要是mRNA和蛋白水平的验证.mRNA水平可以使用普通PCR或者定量PCR,前者是定性, 后者定量.但是最主要的还是蛋白水平的检测,如果是膜蛋白,那么流式检测最方便,如果是胞外分泌型那么可以用上清做ELISA或者Western都可以, 如果是胞浆分泌型的那么就用Western或者流式都可以.

昌康印632做细菌双杂交时为什么要用共转化呢?共转的效率好低啊.可否先把诱饵质粒转进去,做成感受态,再转文库? -
戎绿黎18145551098 ______ 如果两种质粒同时转入细菌效率低的话,可以分两步转化:先转化一种质粒,然后把转化该质粒的细菌做成感受态,再转入另一种质粒,这样的效率会高很多. 转化效率低的一个原因是,制备感受态时细菌超过生长对数期了,变老了,这样对转化效率有很大的影响,尤其是在做双杂交的实验.

昌康印632质粒是什么? -
戎绿黎18145551098 ______ 质粒(Plasmid)是附加到细胞中的非细胞的染色体或核区DNA原有的能够自主复制的较小的DNA分子(即细胞附殖粒、又胞附殖粒).大部分的质粒虽然都是环状构形,然而目前也发现有少数的质粒属于线性构形,它存在于许多细菌以及酵母...

昌康印632怎么鉴别外源基因和内源基因的表达 -
戎绿黎18145551098 ______ 将带His标签的目的基因转染细胞后,用His抗体进行免疫印迹实验,请问:1)此时得到的蛋白表达水平仅为外源基因(即转入的基因)的表达吗?2)如果用目的基因蛋白抗体进行免疫印迹实验,得到的蛋白表达水平是否应为外源基因和内源基...

昌康印632一个感受态细胞可以吸附多少个和多少种质粒? -
戎绿黎18145551098 ______ 不要纠结这个问题哈,这个问题应该没人能回答吧~ 在感受态细胞转化中,加入质粒后,适当地延长静置时间可以提高质粒的转化效率,原因是使质粒可以被感受态细胞充分吸附. 在质粒转化中,经常会遇到多个质粒共转染一个细胞的情况.如果感受态效率足够高,质粒也不大,化转的话,两三个质粒一起说不定可以共转化成功,但转化效率非常低.所以,一般需要使用电转. 如果你的实验需要两个或两个以上的质粒共同转化同一细胞,最好翻看一下相关资料,或者咨询前人的经验.

昌康印632农杆菌转化法的步骤 -
戎绿黎18145551098 ______ 转化:目的基因插入Ti质粒的T-DNA上——进入农杆菌——导入植物细胞——目的基因整合到植物染色体的DNA上——目的基因得以稳定维持和表达1、获取目的基因:用限制性核酸内切酶切割下目的基因.2、基因表达载体的构建:将目的基因...

昌康印632请回答下列与生物工程相关的问题:(1)将基因表达载体导入农杆菌中的Ti质粒上的T - DNA上的原因是___.通过农杆菌的转化作用,使抗盐基因插入到马铃... -
戎绿黎18145551098 ______[答案] (1)农杆菌转化法的原理是:农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上.根据农杆菌的这一特点,如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上,通过农杆菌的转化作用,就可以把目的基因整合到植物细胞中染色...

昌康印632巧克力怎么制作 -
戎绿黎18145551098 ______ 方法一、精制巧克力制作 制造过程非常繁复.可可豆需要经过挑选、烘干、研磨、加热、搅拌、熟成、冷却、灌模,才能形成一方完美黑亮的巧克力.约1公斤的可可豆只能提炼出不到500公克的巧克力精华,而制作过程至少需要经历20几个步...