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碱裂解法提组织dna

来源:baiyundou.net   日期:2024-09-25

康敬殃3864为什么真核DNA无法用碱裂解法提取 -
钮燕岩18915819880 ______ 因为真核细胞DNA上有蛋白质结合,如果用碱裂解法就会把DNA与蛋白质一起沉淀下去,无法分离出细胞核DNA!碱裂解法提取质粒DNA,原理是细胞内蛋白质在沉淀的过程中会把大的DNA分子一起沉淀下去,质粒DNA由于较小,不会被沉淀而进入上清液,因而可以通过离心将其分离出来!然而真核DNA与组蛋白紧密结合,无法用碱裂解法提取出来!

康敬殃3864大肠杆菌质粒DNA如何提取?
钮燕岩18915819880 ______ 碱裂解法:此方法适用于小量质粒DNA的提取,提取的质粒DNA可直接用于酶切、PCR扩增、银染序列分析.方法如下: 1、接1%含质粒的大肠杆菌细胞于2ml LB培养基. 2、37℃振荡培养过夜. 3、取1.5ml菌体于Ep管,以4000rpm离心3...

康敬殃3864SDS碱裂解法提取质粒DNA中加酚氯仿离心后为什么溶液会变三层?那三层分别是什么?及离心的作用是什么? -
钮燕岩18915819880 ______[答案] 离心的作用是让它分层,或者说按密度分离. 上层水相,有你要的质粒;中间是变性的蛋白;下面是有机相,这样酚氯仿就除去了.

康敬殃3864基因组DNA提取和质粒DNA提取的相同点?请写出两个. -
钮燕岩18915819880 ______[答案] 质粒DNA提取一般用沸水浴法和碱裂解法,现在一般都采用碱裂解法,并有试剂盒可用,它主要是将细胞内的环状质粒提取出来,一般需要用SDS裂解,RNA酶降解,然后过柱,再进行洗脱.过程比较简单. 而基因组DNA提取则较为复杂,也需要用...

康敬殃3864在细菌染色体dna提取过程中怎么样除去质粒dna? -
钮燕岩18915819880 ______[答案] ①差速离心,可以将两种DNA分离 ②凝胶电泳,分离开两种DNA后,将迁移最慢的条带(染色体DNA)剪下,用洗脱液洗脱下来. ③碱变性裂解法,细菌悬浮液在高碱性条件下,染色体和蛋白质变性,质粒DNA由于其超螺旋共价闭合结构,双链不...

康敬殃3864DNA提取的方法有几种分别是什么,哪种是现在最常用的?
钮燕岩18915819880 ______ 关于DNA的提取方法在《分子克隆》一书中有详细介绍,其中最常用的质粒提取方法包括: SDS碱裂解法制备质粒DNA煮沸裂解法制备质粒DNA牙签法小量制备质粒DNASDS裂解法提取质粒DNA 这其中SDS碱裂解法又是最常使用的提取方法. 当然针对不同组织样品DNA的提取方法是不同的,具体还是要参考《分子克隆》等工具书. 另外,针对不同组织的DNA样品,就是都有很多成熟的试剂盒可以使用.如果不是大批量使用或者经费充足的话,可以考虑购买试剂盒,一般可以提取到更高质量的DNA,并且也可以节约不少自己摸索的时间.

康敬殃3864质粒的提取原理 -
钮燕岩18915819880 ______ 质粒提取是指去除 RNA,将质粒与细菌基因组 DNA分开,去除蛋白质及其它杂质,以得到相对纯净的质粒. 目录 一、质粒提取原理 质粒是细胞内的一种环状的小分子DNA,是进行DNA重组的常用载体.作为一个具有自身复制起点的复制单位...

(编辑:自媒体)
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