碱裂解法的优缺点

富娴映4770Promega Wizard® Genomic DNA Purification Kit提取DNA 是什么方法啊?碘化钾法?酚氯仿法?还是?
颜蒲柏18847501789 ______ 是改良的碱裂解法.最大的改进就是有蛋白沉淀液,直接将蛋白沉淀后离心除去,无需酚氯仿处理,不但提高效率,而且DNA质量也更好.

富娴映4770质粒DNA的提取方法总共有哪些,回答的全给高分??? -
颜蒲柏18847501789 ______ 碱裂解法: 此方法适用于小量质粒DNA的提取,提取的质粒DNA可直接用于酶切、PCR扩增、银染序列分析.方法如下: 1、接1%含质粒的大肠杆菌细胞于2ml LB培养基. 2、37℃振荡培养过夜. 3、取1.5ml菌体于Ep管,以4000rpm离心3...

富娴映4770SDS碱裂解法制备质粒DNA的具体操作步骤是怎么样的?那位大侠给力点,帮下忙 -
颜蒲柏18847501789 ______ 细菌质粒是一类双链、闭环的DNA,大小范围从1kb至200kb以上不等.各种质粒都是存在于细胞质中、独立于细胞染色体之外的自主复制的遗传成份,通常情况下可持续稳定地处于染色体外的游离状态,但在一定条件下也会可逆地整合到寄主...

富娴映4770碱裂解法提取质粒后 电泳拖尾严重,是什么原因 -
颜蒲柏18847501789 ______ 现在实验室大多用的是提取试剂盒,如果自制溶液碱性过强会有可能出现拖尾现象,蛋白沉降步骤不完全也会有可能导致基因组DNA降解出现拖尾现象.类似于溶液方面的问题一般比较容易排除,而且比较容易改正. 电泳结果拖尾大部分原因与实验操作有关,在加入碱性溶液裂解细胞后操作需要轻柔,静置时间不宜过长,剧烈震荡以及静置时间过长均可导致质粒DNA断裂,电泳结果中出现拖尾现象. 有什么问题可以继续追问,欢迎交流.

富娴映4770生物化学实验中制备质粒DNA方法中,酚氯仿裂解法的实验原理 -
颜蒲柏18847501789 ______ 质粒DNA的制备 【实验目的】 1.了解质粒的特性及其在分子生物学研究中的作用; 2.掌握质粒DNA分离和纯化的原理; 3.学习碱裂解法和煮沸法分离质粒DNA的方法. 【实验原理】 质粒是细菌内的共生型遗传因子,它能在细菌中垂直遗传并...

富娴映4770震荡能使质粒破坏吗
颜蒲柏18847501789 ______ 一般机械振动是很难破坏质粒的.在离心机中一万两千转的速度都不能破坏质粒.一般的超声波清洗机也做不到.要用专门的超声波细胞破碎仪才可以将DNA打碎. 如果你讲的是采用碱裂解法裂解细胞提取质粒DNA,加入试剂以后要柔和混匀,不要剧烈震荡,不是因为单纯的机械震荡会使质粒破坏,而是因为碱裂解法加了化学试剂,它能够破坏质粒,为避免造成所提质粒中出现基因组DNA污染,不能用力摇动. 你如果不加任何试剂,随你怎么摇也不会破坏质粒.

富娴映4770植物基因组DNA和其他生物基因组DNA 有何异同 -
颜蒲柏18847501789 ______ 植物基因组dna提取与其他生物基因组dna提取有何主要的异同质粒dna提取一般用沸水浴法和碱裂解法,现在一般都采用碱裂解法,并有试剂盒可用,它主要是将细胞内的环状质粒提取出来,一般需要用sds裂解,rna酶降解,然后过柱,再进行洗脱.过程比较简单.而基因组dna提取则较为复杂,也需要用sds裂解和rnd酶降解,但降解时间较长,同时对有些革兰氏阳性细菌还要进行溶菌酶处理,最后用氯仿-苯酚进行除蛋白,这一步重复进行多次,在用氯仿除去多余的苯酚,用乙醇清洗烘干后溶于te缓冲液中,整个过程比提质粒更复杂,耗时也更多.

富娴映4770在提取DNA时为什么要使金属酶(金属蛋白酶)失活,提取的方法是碱裂解法……拜托了 -
颜蒲柏18847501789 ______[答案] 使金属酶(金属蛋白酶)失活 你是指最后溶解DNA,用的是TE,TE中的EDTA使使金属酶(金属蛋白酶)失活吗? TE中EDTA使使金属酶(金属蛋白酶)失活,是为了DNA不被核酸酶降解呀!

富娴映4770碱裂解法为什么溶液2要现用现配 -
颜蒲柏18847501789 ______ 溶液2中的主要成分是NaOH和SDS,是用来裂解细胞的.因为NaOH遇到二氧化碳容易反应生成碳酸氢钙,影响使用效果,因此要现配现用. SDS的话,低温容易产生沉淀.不过在37°C 水浴一下就好.主要还是NaOH的问题.