细胞凋亡和坏死的例子

细胞凋亡检测可以：（1）用于肿瘤细胞和组织在内的不同种类病理标本研究；（2）应用 于临床诊疗，新药研制、生物制品开发、肿瘤放化疗、以及从促凋亡角度探索肿瘤的基因治 疗；（3）对相关疾病的早期发现、放化疗的疗效评价具有举足轻重的地位。

1、实验方法和原理

细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面，目前早期识别仍有困难。这些细胞膜表面的改变之一 是磷脂酰丝氨酸（PS）从细胞膜内转移到细胞膜外，使 PS 暴露在细胞膜外表面。PS 是一 种带负电荷的磷脂，正常主要存在于细胞膜的内面，在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂 分布的不对称性被破坏而使 PS 暴露在细胞膜外。

Annexin V 是一种 Ca+依赖的磷脂结合蛋白，最初发现是一种具有很强的抗凝血特性的血 管蛋白，Annexin V 具有易于结合到磷脂类如 PS 的特性。对 PS 有高度的亲和性。因此， 该蛋白可充当一敏感的探针检测暴露在细胞膜表面的 PS。

PS 转移到细胞膜外不是凋亡所独特的，也可发生在细胞坏死中。两种细胞死亡方式间的差 别是在凋亡的初始阶段细胞膜是完好的，而细胞坏死在其早期阶段细胞膜的完整性就破坏了。 因此，可以建立一种用 Annexin V 结合在细胞膜表面作为凋亡的指示并结合一种染料排除 试验以检测细胞膜的完整性的检测方法。

2、实验材料、试剂、仪器和耗材

细胞；HEPES 缓冲液、NaCl、CaCl2、PI、ANNEXIN V-FITC 试剂盒； 流式细胞仪。

3、实验步骤

一、试剂与仪器

1. 孵育缓冲液：10 mmol/L HEPES/NaOH，pH7.4，140 mmol/L NaCl，5 mmol/L CaCl2。

2. 标记液：将 FITC- Annexin V（宝灵曼公司产品）和 PI 加入到孵育缓冲液中，终浓度均 为 1 ug/ml。

3. 流式细胞仪。

二、实验步骤

1.  细胞收集：悬浮细胞直接收集到 10 ml 的离心管中，每样本细胞数为（1~5）×106/mL500~1 000 r/min 离心 5 min，弃去培养液。

2. 用孵育缓冲液洗涤 1 次，500~1 000 r/min 离心 5 min。

3. 用 100 ul 的标记溶液重悬细胞，室温下避光孵育 10~15 min。

4. 500~1 000 r/min 离心 5 min 沉淀细胞孵育缓冲液洗 1 次。

5. 加入荧光（SA-FLOUS）溶液 4℃下孵育 20 min，避光并不时振动。

6. 流式细胞仪分析：流式细胞仪激发光波长用 488 nm，用一波长为 515 nm 的通带滤器 检测 FITC 荧光，另一波长大于 560 nm 的滤器检测 PI。

7. 结果判断：凋亡细胞对所有用于细胞活性鉴定的染料如 PI 有抗染性，坏死细胞则不能。 细胞膜有损伤的细胞的 DNA 可被 PI 着染产生红色荧光，而细胞膜保持完好的细胞则不会 有红色荧光产生。因此，在细胞凋亡的早期 PI 不会着染而没有红色荧光信号。正常活细胞 与此相似。在双变量流式细胞仪的散点图上，左下象限显示活细胞，为（FITC-/PI-）；右 上象限是非活细胞，即坏死细胞，为（FITC+/PI+）；而右下象限为凋亡细胞，显现（FITC+/PI-）。

濮待盛5206简述细胞坏死和细胞凋亡的区别 -
仰康姿18713789806 ______ 细胞坏死是由于某种原因而引起的引起机体产生不良反应的细胞死亡.比如:病毒、高温、强酸......而引起的细胞死亡.而细胞凋亡是一种自然现象,不会给机体造成伤害.如蝌蚪尾巴的消失.

濮待盛5206图示为动物体内细胞凋亡和细胞坏死的过程示意图,细胞凋亡时,细胞崩溃,分解成多个凋亡小体.下列叙述正确的是( ) -
仰康姿18713789806 ______[选项] A. 坏死细胞和凋亡细胞的内容物都会释放到内环境中 B. 凋亡小体出现的根本原因是细胞中相关凋亡基因的表达 C. 细胞凋亡和细胞坏死都受环境的影响,不受机体控制 D. 细胞凋亡只发生在个体发育的特定时期,而细胞坏死在任何时期都能发生

濮待盛5206何谓＂细胞凋亡＂?细胞凋亡有哪些基本特征?其与细胞坏死性死亡有何区别? -
仰康姿18713789806 ______ 简单的说细胞凋亡指的细胞的程序性死亡,细胞被自身的酶降解,按一定的步骤“自杀”,其死亡细胞仍为一整体,最终被白细胞吞噬.而细胞坏死会有细胞壁破裂的现象,内含物外泄,会影响周围的细胞.且细胞死亡是由外界条件引起的.说白了细胞凋亡通常是正常的,而坏死则是不正常的.粗粗的这么理解就可以了,想要具体的网络上遍地都是.如:http://www.cella.cn/book/15/03.htm

濮待盛5206细胞程序性死亡和细胞凋亡的区别 -
仰康姿18713789806 ______ Kerr( 1972)最先提出凋亡的概念,与细胞坏死的区别是:①细胞通过出芽的方式形成许多凋亡小体;②凋亡小体内有结构完整的细胞器; ③不引起炎症;④线粒体无变化,溶酶体活性不增加;⑤内切酶活化,DNA有控降解,凝胶电泳图谱呈梯状;⑥凋亡通常是生理性变化,而细胞坏死是病理性变化. 细胞程序性死亡(programmed cell death,PCD)是一种基因指导的细胞自我消亡方式.PCD和细胞凋亡的区别在以下方面:PCD是功能性概念,凋亡是形态学概念;PCD的最终结果是细胞凋亡,但细胞凋亡并非都是程序化的;PCD存在于胚胎发育过程中.

濮待盛5206细胞焦亡和细胞凋亡的区别 -
仰康姿18713789806 ______ 1、定义 细胞焦亡(Pyroptosis)又称细胞炎性坏死,是一种程序性细胞死亡. 细胞凋亡(apoptosis)指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡. 2、表现 细胞焦亡表现为细胞不断胀大直至细胞膜破裂,导致细胞内容物的释...

濮待盛5206神经元的凋亡 名词解释 -
仰康姿18713789806 ______ 神经元细胞死一个就少一个,直至消亡殆尽.是一种程序性死亡,叫凋亡.换言之,神经元细胞不可再生.

濮待盛5206下列实例不属于细胞凋亡的是( ) -
仰康姿18713789806 ______[选项] A. 清除被病原体感染的细胞 B. 流感病毒感染导致呼吸道上皮细胞裂解死亡 C. 成熟生物体中细胞的自然更新 D. 人体内红细胞的正常死亡

濮待盛5206细胞凋亡的定义,生物学特征和生物发育中的作用,正常新城代谢的过程 -
仰康姿18713789806 ______[答案] 有积极的意义. 细胞凋亡是指为了保持一个稳定的环境,自组装成由基因控制的细胞死亡.细胞凋亡和坏死,细胞凋亡是一个被动的过程,而是主动过程,它涉及一系列基因的激活和表达以及调控的作用,这是不是一种病态的条件下,自体损伤的现象...

濮待盛5206细胞凋亡和坏死时释放的细胞内容物都会伤害周围细胞?它们会释放什么? -
仰康姿18713789806 ______[答案] 凋亡细胞时,DNA裂解,染色质浓缩,细胞膜活化,细胞皱缩,最后形成由细胞膜包裹的凋亡小体,然后,这些凋亡小体被其他细胞所吞噬.因此不会伤害周围细胞. 细胞坏死时,细胞胀大,胞膜破裂,细胞内容物外溢,核变化较慢,DNA降解不充分...

濮待盛5206下列现象中发生细胞凋亡的是( ) -
仰康姿18713789806 ______[选项] A. 乙肝病毒感染导致部分肝细胞死亡 B. 外部创伤引起细胞死亡 C. 噬菌体浸染裂解大肠杆菌 D. 蝌蚪变态发育中尾巴消失