细胞铺板步骤96孔

贺枝厚586有谁知道MTT详细的流程和注意事项啊?谢谢了!!!!
俞玲悦13914404708 ______ 贴壁细胞: 1、收集对数期细胞,调整细胞悬液浓度,每孔加入100ul,铺板使待测细胞调密度至1000-10000孔,(边缘孔用无菌PBS填充). 2.、5%CO2,37℃孵育,至细胞单层铺满孔底(96孔平底板),加入浓度梯度的药物,原则上,细胞...

贺枝厚586MTT法操作步骤
俞玲悦13914404708 ______ (1)单细胞悬液接种于96孔培养板;103-104细胞/孔,每孔培养基总量200微升(96孔培养板每孔容积370微升),37℃、5% CO2培养箱中培养一段时间(根据实验目的决定培养时间) (2)加入2毫克/毫升的MTT液(50微升/孔);继续培养3小时. (3)吸出孔内培养液后,加入DMSO液(150微升/孔),将培养板置于微孔板扳荡器上振荡10分钟,使结晶物溶解. (4)酶标仪检测各孔OD值(检测波长570纳米).记录结果,绘制

贺枝厚586求有限稀释法(limiting dilution analysis,LDA)具体步骤 -
俞玲悦13914404708 ______ 有限稀释法是一种常用的克隆方法. 将需要再克隆的细胞株自培养孔内吸出并作细胞计数,计出1mL的细胞数. 用HT培养液稀释, 使细胞浓度为50~60个/mL,于96孔培养板中每孔加0.1mL(五六个细胞/孔).接种2排,剩余细胞悬液用HT培...

贺枝厚586如何建耐药细胞株? -
俞玲悦13914404708 ______ 一种是脂质体转染后,单克隆筛选稳定细胞株.另外一种是应用逆转录病毒,慢病毒转染,筛选稳定细胞株. 脂质体转染:在转染24小时后,消化细胞并计数.将细胞种到96孔板,保证每个孔2-3个细胞,这样才能得到单克隆.待细胞贴壁后,...

贺枝厚586测生长曲线,96孔细胞培养板每孔加多少细胞合适 -
俞玲悦13914404708 ______[答案] 不同的细胞生长速度也不一样,为了在测定期间细胞不致于长满全孔,最好以较少量的细胞接种.建议先做个预试验,以不同密度梯度的细胞数量接种细胞板孔,看多大接种密度细胞会在测定期内长满细胞板孔,选择比此密度稍低的接种量就可以了....

贺枝厚58696孔板如何让其细胞均匀我种96孔板每次都不均匀,有的细胞孔多 有的少,我用15ml离心管稀释后种,每种4个孔就把盖子盖上颠倒几下离心管,可是还不... -
俞玲悦13914404708 ______[答案] 博凌科为我做96孔板时,把细胞消化下来后,加好培养基,先接种一个孔,看细胞浓度是否合适,合适的话,在接下面的孔.不过要注意,每接几个孔,就将培养瓶适当的晃晃,以求尽量使细胞均匀分布,在取.不要从头接到尾,手里培养瓶一动不动...

贺枝厚586MTT法细胞活力检测贴壁细胞活力时,如何确定细胞接种到96孔板的时间?
俞玲悦13914404708 ______ 博凌科为解答:贴壁细胞一般在实验前1-2日接入96孔板.太晚,细胞在传代后有一个16小时左右的停滞期,此时代谢变慢,增殖缓慢,此时的MTT数值太低;太早,实验期间,细胞生长过头,此时有死亡和凋亡的细胞,实验时本底又过高,应该寻求的效果是实验时落在细胞对数早中期最好

贺枝厚586做MTT实验的96板怎么处理可以用第二次? -
俞玲悦13914404708 ______ 不可以哦

贺枝厚586做MTT时,96孔培养板细胞浓度该是多少 -
俞玲悦13914404708 ______ 五千到一万即可.望采纳^O^

贺枝厚586细胞培养时怎样调整细胞浓度? -
俞玲悦13914404708 ______ 细胞计数呗.根据所计数量和培养液体积确定接种的数量.铺板或者是传代都有大致的细胞数量的范围,根据这个确定培养液用量就是了.