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菌落培养出现大片菌落

来源:baiyundou.net   日期:2024-09-26

菌落计数的一般步骤
1、样品的稀释
2、培养和计数
3、结果与报告

01 样品的稀释

固体和半固体样品:称取25g置盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内,8000r/min~10000r/min均质1min~2min,或放入盛有225mL稀释液的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1min~2min,制成1:10的样品匀液。

液体样品:以无菌吸管吸取25mL样品置盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分混匀,制成1:10的样品匀液。

上步完成后,用1mL无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液1mL,沿管壁缓慢注于盛有9mL稀释液的无菌试管中(注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面),振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合均匀,制成1:100的样品匀液。

根据对样品污染状况的估计,选择1个~3个适宜稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液),在进行10倍递增稀释时,吸取1mL样品匀液于无菌平皿内,每个稀释度做两个平皿。同时,分别吸取1mL空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照。

之后,及时将15mL~20mL冷却至48℃的平板计数琼脂培养基(可放置于48℃±2℃恒温水浴箱中保温)倾注平皿,并转动平皿使其混合均匀。

注意事项:

1,移液过程使用的器具,都应避免微生物污染。使用耐高压移液枪,核查洗耳球无菌程度,避免移液枪触及均质袋或试管内壁……
2,样品匀液完成后,可按相同操作,制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次,换用1次1mL无菌吸管或吸头。

02 培养和计数

样品稀释完成后,就要进行培养和菌落计数了。

待琼脂凝固后,将平板翻转,36℃±1℃培养48h±2h。水产品30℃±1℃培养72h±3h。

如果样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时,可在凝固后的琼脂表面覆盖一薄层琼脂培养基(约4mL),凝固后翻转平板,按相同条件进行培养。

培养完成后,就要进行菌落计数了,计数可用肉眼观察,必要时用放大镜或菌落计数器,记录稀释倍数和相应的菌落数量。菌落计数以菌落形成单位(colony-forming units,CFU)表示。

选取菌落数在30CFU~300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30CFU的平板记录具体菌落数,大于300CFU的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。

大片菌落:其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数;若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,即可计算半个平板后乘以2,代表一个平板菌落数。

链状生长:当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时,则将每条单链作为一个菌落计数。

03 结果与报告

为了生成结果和报告,需要根据计数结果和公式计算出菌落总数。需要注意的是,对于菌落数量不同的培养皿,计数原则有所不同。 

若所有平板上为蔓延菌落而无法计数,则报告菌落蔓延。若空白对照上有菌落生长,则此次检测结果无效。

称重取样以CFU/g为单位报告,体积取样以CFU/mL为单位报告。

来源:环凯转载于“品微生物检测”公众号;内容版权归原作者所有。

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钱忽胞1070做表面微生物时一个平板上在培养基里面长了好多丝状白色蔓延菌落,有没有人知道是什么菌? -
华荔琴19491856824 ______ 如果像菌丝的东西长在培养基里面,一些细菌也能达到这个效果,不过最有可能还是霉菌.最简单的办法就是在显微镜下看一下了,基本上就知道大体种类了.详细的鉴定要单独培养观察和基因检测了.

钱忽胞1070如果为接种大肠杆菌的用于对照的培养基在培养过程中长出菌落,可能原因是什么?如果对照培养基上未长出菌
华荔琴19491856824 ______ 1、你说的对照指的是未接种细菌的空白对照么?如果是的话就说明操作的整个环节的至少一个地方存在污染,比如灭菌不彻底,操作不规范等等. 2、接种大肠杆菌的培养基,除了接种大肠杆菌是否还有其他添加物?有的话其他菌落就是在添加物里的,没有添加物则是接种的时候本来就存在其他杂菌.

钱忽胞1070某同学观察培养基上的菌落,发现一个菌落比较大,呈蜘蛛网状,该菌落最有可能是哪类生物?( )A.霉 -
华荔琴19491856824 ______ 细菌菌落特征:菌落较小,形状表面或光滑黏稠,或粗糙干燥,易挑起,多为白色;真菌菌落特征:菌落较大、菌丝细长,菌落疏松,成绒毛状、蜘蛛网状、棉絮状,无固定大小,多有光泽,不易挑,有时还呈现红色、褐色、绿色、黑色、黄色等不同的颜色(孢子的颜色).霉菌是真菌. 故选A

钱忽胞1070培养基的制备与灭菌误差分析,出现菌落的原因是什么? -
华荔琴19491856824 ______ (1)氮源 碳源 水 无机盐(后两空顺序可颠倒) (2)高压蒸汽灭菌 (3)清洁和消毒 无菌水 酒精灯火焰 (4)平板划线 稀释涂布平板 一(或单) 多 大(或严重)

钱忽胞1070如果三个稀释度的培养基其中有一个稀释度的所有平板都有成片菌落不能计数怎么? -
华荔琴19491856824 ______ 取15-300个菌落的稀释度计数,如果均在300以上则要继续稀释.

钱忽胞1070土壤中的细菌在培养基上,经培养出现菌落和菌苔,为什么? -
华荔琴19491856824 ______ 土壤是微生物的大本营,什么都有.你的题目要细菌,但补充中说什么都要,估计你概念不清.从大类上说,从土壤很容易分离到细菌、霉菌、酵母和放线菌等.各类又会分出很多,比如细菌中的光合细菌、固氮细菌、硝化细菌等等,各自的分离条件都很不相同,因此你必须明确你要什么.按照你描述,霉菌和酵母的生活环境偏酸,因此你就分离霉菌和酵母吧.配制2种培养基,1 土豆(马铃薯)培养基或者马丁氏培养基均可用于霉菌培养2 豆芽汁培养基 用于酵母菌培养比较好.也可以试试分离细菌和放线菌(这2种在中性偏碱性环境生长),细菌用牛肉膏-蛋白胨培养基,放线菌用高氏一号培养基.各培养基配方 随便搜索,到处都有的.

钱忽胞1070曾经暴露于空气5分钟的培养皿在保温箱内培养一段时间后,出现了8个大菌落和3个小菌落.从空气中落入培养皿的细菌个数的最小值可能是( ) -
华荔琴19491856824 ______[选项] A. 3 B. 8 C. 11 D. 11以上

钱忽胞1070如果为接种大肠杆菌的用于对照的培养基在培养过程中长出菌落,可能原因是什么?如果对照培养基上未长出菌落,但在接种大肠杆菌的培养基上长出了其... -
华荔琴19491856824 ______[答案] 1、你说的对照指的是未接种细菌的空白对照么?如果是的话就说明操作的整个环节的至少一个地方存在污染,比如灭菌不彻底,操作不规范等等. 2、接种大肠杆菌的培养基,除了接种大肠杆菌是否还有其他添加物?有的话其他菌落就是在添加物里...

钱忽胞1070在培养细菌的过程中,小明发现培养基上出现了几种不同类型的菌落,请你帮他判断,下列哪个是细菌的菌落( ) -
华荔琴19491856824 ______[选项] A. 菌落小,表面光滑粘稠 B. 菌落大,呈绒毛状 C. 菌落大,呈青绿色 D. 菌落大,呈絮状

钱忽胞1070有些小组的对照组实验中,培养基上也出现了细菌和真菌的菌落,你能分?
华荔琴19491856824 ______ 培养基上出现了细菌和真菌的菌落,说明在实验操作过程中不小心有细菌或真菌进入了培养 基中,如:培养皿等玻璃仪器消毒不严格;在制作培养基时没有严格按无菌条件操作;实验中打 开培养皿盖等原因均可以造成对照组培养基被污染.实验过程中我们只要严格地按照实验要求的 无菌操作来进行,就可以避免这种情况的发生.

(编辑:自媒体)
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