蛋白loading+buffer配方

葛匡晓4690蛋白电泳中mark还要加buff嘛 -
广咬所18281368261 ______ 蛋白电泳中mark也是用某几种已知分子量的蛋白做的,做完之后是要按一定比例混合并加好Loading buffer再保存的.正常是不需要再加Buffer的,看颜色是深蓝色的就是说明已经加过Loading buffer了.

葛匡晓4690误把核酸loadingbuffer加入蛋白样品中怎么办
广咬所18281368261 ______ 如果你蛋白应该用的是非还原型loading buffer那就没多大关系,两种loading的配方很相近,毕竟loading只是一种指示剂外加分子保护剂,如果用的是还原型那就需要补加β-巯基乙醇

葛匡晓4690western 加错了DNA的 loading buffer ,怎么办,会造成什么样的影响,跪求 谢谢
广咬所18281368261 ______ 肯定会影响的,会导致蛋白不能充分电泳.蛋白buffer含SDS使蛋白带上负电荷,这样才能屏蔽电荷的影响,在SDS胶中以分子量不同做电泳.所以,导致样品中蛋白不能进行充分的电泳

葛匡晓4690在western blot中loading buffer的作用是什么?就是跑SDS - PAGE时在蛋白样中加入loading buffer的作用是什么? -
广咬所18281368261 ______[答案] 1、指示剂,方便观察电泳进行的程度;2、密度大,携带你的样本沉到孔的底部;3、保持蛋白线性及携带过量负电荷的状态. 除此之外,里面最重要的是还有巯基乙醇还原剂来让蛋白质充分变性,同时保护-SH基团.

葛匡晓46905*loading buffer和6*loading buffer 都可以用检测dna吗? -
广咬所18281368261 ______[答案] Loading buffer就是帮你把DNA沉到加样孔里,同时提供电泳时的色素指示,所以5X还是6X没什么关系,即使是用于蛋白的Loading buffer也满足这个需求.

葛匡晓4690sds - page电泳中甘油的作用 -
广咬所18281368261 ______ loading buffer中甘油的作用主要是增大样品密度,使得样品溶液沉淀于泳槽底部.也可以用蔗糖.

葛匡晓4690SDS - PAGE实验中,样品中加入40%蔗糖溶液的作用是什么 -
广咬所18281368261 ______ loading buffer.为的是增加样品比重,使得样品能够沉到加样孔底部,而不会漂出来.

葛匡晓4690western blot中蛋白样品浓度怎样稀释 -
广咬所18281368261 ______ 蛋白提取时一般都是用裂解液进行提取,如果要稀释的话可以直接用PBS

葛匡晓4690western blot中蛋白样品浓度怎样稀释?用PBS稀释吗?如果说每孔加入50ug,上样量25ul,那么是不是把蛋白稀释成2.4ug/ul,然后在加入6*loadingbuffer变... -
广咬所18281368261 ______[答案] 计算出样品及buffer的体积,加水补足到25ul

葛匡晓4690loading buffer会不会对DNA造成损伤 -
广咬所18281368261 ______ loading buffer中含一种或多种染料及甘油,主要作用是使DNA沉降在点样孔中和指示电泳距离. 正常情况下,是对DNA没有影响的.电泳后的DNA分子可以纯化后进行酶切、测序、构建载体等操作而不用担心DNA分子发生突变等. 值得注意的是,如果DNA分子需要继续分析,在用紫外灯时要注意,不能照射时间过长,否则会造成DNA分子突变. 仅供参考.