观察菌落

菌落计数的一般步骤
1、样品的稀释
2、培养和计数
3、结果与报告

01 样品的稀释

固体和半固体样品：称取25g置盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内，8000r/min～10000r/min均质1min～2min，或放入盛有225mL稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min～2min，制成1：10的样品匀液。

液体样品：以无菌吸管吸取25mL样品置盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，制成1：10的样品匀液。

上步完成后，用1mL无菌吸管或微量移液器吸取1：10样品匀液1mL，沿管壁缓慢注于盛有9mL稀释液的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合均匀，制成1：100的样品匀液。

根据对样品污染状况的估计，选择1个～3个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），在进行10倍递增稀释时，吸取1mL样品匀液于无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿。同时，分别吸取1mL空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照。

之后，及时将15mL～20mL冷却至48℃的平板计数琼脂培养基（可放置于48℃±2℃恒温水浴箱中保温）倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。

注意事项:

1，移液过程使用的器具，都应避免微生物污染。使用耐高压移液枪，核查洗耳球无菌程度，避免移液枪触及均质袋或试管内壁……
2，样品匀液完成后，可按相同操作，制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1次1mL无菌吸管或吸头。

02 培养和计数

样品稀释完成后，就要进行培养和菌落计数了。

待琼脂凝固后，将平板翻转，36℃±1℃培养48h±2h。水产品30℃±1℃培养72h±3h。

如果样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时，可在凝固后的琼脂表面覆盖一薄层琼脂培养基（约4mL），凝固后翻转平板，按相同条件进行培养。

培养完成后，就要进行菌落计数了，计数可用肉眼观察，必要时用放大镜或菌落计数器，记录稀释倍数和相应的菌落数量。菌落计数以菌落形成单位（colony-forming units，CFU）表示。

选取菌落数在30CFU～300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30CFU的平板记录具体菌落数，大于300CFU的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。

大片菌落：其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数；若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以2，代表一个平板菌落数。

链状生长：当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时，则将每条单链作为一个菌落计数。

03 结果与报告

为了生成结果和报告，需要根据计数结果和公式计算出菌落总数。需要注意的是，对于菌落数量不同的培养皿，计数原则有所不同。 

若所有平板上为蔓延菌落而无法计数，则报告菌落蔓延。若空白对照上有菌落生长，则此次检测结果无效。

称重取样以CFU/g为单位报告，体积取样以CFU/mL为单位报告。

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曹琼忽2529为什么观察细菌菌落时不能打开培养皿的盖子 -
仰别宏19882497782 ______[答案] 一般观察的时候是观察在培养基里的细菌.空气中一般也会有细菌,打开培养皿的盖子的话,空气中的细菌就有可能进入培养基,会对其污染在以后产生杂菌,所以不能打开培养基的盖子.

曹琼忽2529对细菌的细胞进行观察和描述时应注意那些方面? -
仰别宏19882497782 ______[答案] 观察单个细菌的话,要看形态、大小,有无荚膜、鞭毛等等,其他结构的话那就要具体看细菌种类确定. 观察菌落的话,那还要观察菌落的大小、颜色、边缘形状等.

曹琼忽2529我们可以通过肉眼观察什么的形态特征来鉴别菌落? -
仰别宏19882497782 ______ 我们可以通过肉眼观察菌落的形状来鉴别那一种菌落. 一个细菌我们无法通过肉眼来鉴别,但是当细菌组成菌落时会呈现出一定的形状.比如有些是锯齿型的有些是圆滑型的有些是浑厚的.....其实记住某些经典菌落就行了 .

曹琼忽2529要在一个培养皿中观察混合菌液中多种菌的菌落特征.用什么方法,为什么 划线法接种不行, -
仰别宏19882497782 ______[答案] 细菌会产生代谢产物,这些代谢产物可能会对其他细菌有抑制作用,混合菌培养不科学吧,划线接种应该可以,只要能得到单个菌落!

曹琼忽2529用显微镜观察细菌的步骤? -
仰别宏19882497782 ______ 一、用脏手上的细菌制装片: 1、收集手上细菌,用少量无菌水(可用冷开水代替)冲洗脏手,让洗手的水流到培养皿中.这些脏水就是细菌培养液. 2、制取细菌装片,取甲、乙两块洁净的载玻片,分别在两玻片的中央各滴一小滴细菌培养液...

曹琼忽2529观察微生物菌落特征选什么培养基 -
仰别宏19882497782 ______ 微生物菌落的观察 一、实验目的和内容 目的:识别细菌、酵母菌、放线菌和霉菌四大类微生物的菌落特征. 内容: 1.观察已知菌的菌落的形态、大小、色泽、透明度、致密度和边缘等特征. 2.根据菌落的形态特征判断未知菌的类别. 二、实...

曹琼忽2529怎样观察菌落的数目 -
仰别宏19882497782 ______ (1)直接计数法(2)稀释涂布平板划线法(即:活菌计数法)

曹琼忽2529要在一个培养皿中观察混合菌液中多种菌落特征,采用什么方法? -
仰别宏19882497782 ______ 先培养,然后根据菌落特征初步分辨:细菌表面光滑、霉菌表面粗糙;且放线菌有泥土的气味,霉菌有霉味.然后进行革兰氏染色判定是阴性还是阳性菌;最后进行显微镜进行镜检

曹琼忽2529用文字或图描述观察到的微生物形状快 -
仰别宏19882497782 ______[答案] 如果是菌落就可以从颜色,是否光滑,是否凸起,边缘是否整齐,菌落大小等来描述.对于单个微生物,就从杆菌,球菌,链球菌,杆菌长短,球菌密集,链球菌几链,是否有分支,真菌还要说明是否有孢子,细菌要说明是否有芽孢,孢子或者芽孢形...

曹琼忽2529要用显微镜才能观察到菌落?为什么? -
仰别宏19882497782 ______[答案] 错,菌落是微生物的群体,用肉眼就可以看到.