质粒提取电泳图分析

龙泰贝1078刚活化后 提取的质粒(小量试剂盒提取法) 电泳图为什么会出现2、3条带? -
仲货话19182532411 ______ 这是很正常的,质粒提取过程中或多或少会对质粒本身造成一定的损伤,根据损伤的不同,质粒通常会出现三种不同的构型,分别是双链环状,线性分子(机械损伤造成质粒链完全断开)和单链开环(双链中只有一条链断开,另外一条是闭合的...

龙泰贝1078DNA电泳图结果分析以上是我实验的电泳结果,一共做了三个试验,最后一起跑的电泳,从边开始,第一个是mark,第二个是质粒DNA的提取,第三个是... -
仲货话19182532411 ______[答案] 首先看第二泳道,能够看见两条带,一般的质粒跑完电泳都是这种情况,因为质粒容易开链,变成线性的,或者是半线性半环状,而环状的比线性的跑的快,所以上面那条浅的应该是开链的质粒,下面的是环状的质粒,不过不要紧,一般都...

龙泰贝1078大肠转化后提的质粒,跑电泳出现3条带,求高人解释每条带分别是什么?(第一列是空质粒) -
仲货话19182532411 ______[答案] 质粒DNA分子具有三种构型:共价闭合环DNA(cccDNA,SC构型)、开环DNA(OC构型)和线性分子(L构型).在细菌体内,质粒DNA是以负超螺旋构型存在的.在琼脂糖凝胶电泳中不同构型的的同一种质粒DNA,尽管分子量相同,但具有不同的电泳迁移...

龙泰贝1078刚活化后 提取的质粒(小量试剂盒提取法) 电泳图为什么会出现2、3条带?这是中间载体的质粒,马上要酶切 之后链接,之前是因为没有链接成功,所以怀... -
仲货话19182532411 ______[答案] 这是很正常的,质粒提取过程中或多或少会对质粒本身造成一定的损伤,根据损伤的不同,质粒通常会出现三种不同的构型,分别是双链环状,线性分子(机械损伤造成质粒链完全断开)和单链开环(双链中只有一条链断开,另外一条是闭合的)....

龙泰贝1078下图是细菌DNA和质粒的电泳图,marker很正常,dna和质粒作为太严重了.麻烦哪位大仙帮分析一下,谢谢! -
仲货话19182532411 ______ 1、Marker没问题,说明胶和电泳没有问题,问题出在提取的产品上.2、基因组拖尾严重,一部分在孔内没有电泳出来,一部分跑到了前端,说明提取过程中蛋白污染,DNA纯度低,另外,部分DNA被降解成小分子的片段,提取条件需要优化.3、质粒没有提出来,原因有很多可能,比如菌量不够,菌长老了,质粒被降解,等等,重新摇菌提取是惟一的办法.

龙泰贝1078如何通过电泳图谱判断质粒分子量 -
仲货话19182532411 ______ 直接用环状的质粒跑电泳是很难判断其分子量的一般来说要先找到上面的一个相应的酶切位点(这个酶在这个质粒上只有一个识别域).把质粒完全切开后再跑琼脂糖凝胶电泳,配合适当的mark...

龙泰贝1078质粒的提取原理 -
仲货话19182532411 ______ 质粒提取是指去除 RNA,将质粒与细菌基因组 DNA分开,去除蛋白质及其它杂质,以得到相对纯净的质粒. 目录 一、质粒提取原理 质粒是细胞内的一种环状的小分子DNA,是进行DNA重组的常用载体.作为一个具有自身复制起点的复制单位...

龙泰贝1078问个重组质粒的电泳图和重组质粒pcr产物的电泳图的基本问题 -
仲货话19182532411 ______ 首先,重组后的质粒肯定比载体大,可以通过电泳一定的区分,通过这个对比的话最好是酶切过后的 其次,因为你重组的片段是通过PCR扩增出来的,所以你重组要是成功了,那么就可以用相同的引物扩增出来,所以PCR做完了过后,电泳时会出现和目的条带一样大的条带,反之则不成功 显然这两种方法第二种最靠谱,第一种情况由于质粒较大,要是插入片段太小的话,可能分的不是很清楚,最后电泳的意义就在于看插入片段是否正确,并且理论上看是不是正确的插入方向

龙泰贝1078质粒如何提取
仲货话19182532411 ______ 需要掌握技能 1. 质粒转化 具体操作步骤:  将1ul 质粒DNA加入1.5ml的离心管;  将感受态细菌(competent cells)从-70℃冰柜中取出,快速吸取50ul感受态细菌,加入含质粒DNA的1.5ml的离心管;  轻轻地旋转以混匀内容物,在冰中放...