质粒提取酶切鉴定实验报告

邬是享2880提质粒的目的是什么?酶切的目的是什么? -
阚有孟17071596912 ______ 提取质粒作为运载体,运载体必须具备以下条件: 1.能够在宿主细胞内复制并稳定保存; 2.具有多个限制酶的切点,以便与不同的外来基因链接; 3.具有某些标记基因,便于进行筛选. >>常用的运载体有:质粒、噬菌体、灭活的动植物病毒等;而质粒为最常用的运载体. 酶切的目的即为了获得目的基因.

邬是享2880我做质粒酶切实验,需要大量质粒.从含抗生素的平板中挑菌后接种,然后在试管里面培养过夜进行小提质粒. -
阚有孟17071596912 ______ 1. 建议重新配置LB培养液 2. 确保菌种是新鲜的,如果过于老旧,建议重新涂盘(抗生素选择盘),挑克隆. 3. 最后实在不行,可以适当降低培养液中抗生素的浓度

邬是享2880做重组质粒双酶切验证,酶切后跑电泳结果条带很模糊是什么原因? -
阚有孟17071596912 ______ 可能酶过量或者加的质粒体积大带进去杂质产生星号活性.

邬是享2880质粒提取的步骤 -
阚有孟17071596912 ______ 实验一 ApaLI (178) P(BLA) ALPHA 质粒DNA的提取、 质粒DNA的提取、酶切 DNA的提取 及琼脂糖凝胶电泳 ApaLI (2367) EcoRI (397) AvaI (413)XmaI (413) SmaI (415) APr pUC19 BamHI (418) PstI (440)HindIII (448) P(LAC) ORI 2686 bp ApaLI ...

邬是享2880重组质粒转化之前需要酶切验证吗 -
阚有孟17071596912 ______ 重组质粒转化之前需要酶切验证 重组质粒是把载体质粒酶切开,连接上PCR片段,然后转化感受态细胞,培养后提质粒获得的,这一系列过程中都无法检测目的基因是否连接成功了,是否转化成功了,只有对转化后的菌再次提质粒、酶切检测或PCR检测才能确定前边的步骤是否成功. 测序是更准确的方法,一般不用而已.

邬是享2880酶切电泳鉴定重组子有什么不足的地方 -
阚有孟17071596912 ______ 不是不足,是不够,酶切鉴定可以确定载体有没有连上片段,但是还需要确定连上的片段是不是目的基因片段,有没有突变.

邬是享2880DNA电泳图结果分析以上是我实验的电泳结果,一共做了三个试验,最后一起跑的电泳,从边开始,第一个是mark,第二个是质粒DNA的提取,第三个是... -
阚有孟17071596912 ______[答案] 首先看第二泳道,能够看见两条带,一般的质粒跑完电泳都是这种情况,因为质粒容易开链,变成线性的,或者是半线性半环状,而环状的比线性的跑的快,所以上面那条浅的应该是开链的质粒,下面的是环状的质粒,不过不要紧,一般都...

邬是享2880质粒DNA制备与基因组DNA制备有哪些异同?质粒DNA的鉴定有哪些方法?基因载体应该具备哪些特点?为什么 -
阚有孟17071596912 ______[答案] 基因组DNA要先用液氮粘膜样品,然后用CTAB缓冲液裂解,再加氯仿.质粒提取相对容易一点,照着试剂盒提就行.两种东西用的洗脱缓冲液也不一样.质粒DNA鉴定一般用琼脂糖跑胶看结果就行,纯度和大小都能看出来,要精确的纯度数据的话可以...

邬是享2880质粒的提取原理 -
阚有孟17071596912 ______ 质粒提取是指去除 RNA,将质粒与细菌基因组 DNA分开,去除蛋白质及其它杂质,以得到相对纯净的质粒. 目录 一、质粒提取原理 质粒是细胞内的一种环状的小分子DNA,是进行DNA重组的常用载体.作为一个具有自身复制起点的复制单位...