转化质粒浓度是多少

牧采逸1469我有个质粒已经测序了,但保种的菌液没长起来.所以用质粒做了转化,重新挑斑还需要测序吗? -
贝类紫17827879997 ______ 如果是普通的质粒的话,没有关系,你抽个质粒跑个胶,看看大小对不对就行了. 如果你的质粒上有重复序列,那你要保证你的菌的基因型可以保持这个质粒的稳定.不然质粒会丢失或者改变. 如果你的质粒上有同源序列,那你的菌得是重组酶缺陷的,不然结果同上一条.

牧采逸1469SDS碱裂解法制备质粒DNA的具体操作步骤是怎么样的?那位大侠给力点,帮下忙 -
贝类紫17827879997 ______ 细菌质粒是一类双链、闭环的DNA,大小范围从1kb至200kb以上不等.各种质粒都是存在于细胞质中、独立于细胞染色体之外的自主复制的遗传成份,通常情况下可持续稳定地处于染色体外的游离状态,但在一定条件下也会可逆地整合到寄主...

牧采逸1469PCR产物TA克隆,PGEM - T 载体+目的片段,那么转化挑克隆提取的质粒片段是多大? -
贝类紫17827879997 ______ 那得看你用多少浓度的胶跑,如果用1%的琼脂糖电泳30min,你的主带(超螺旋的闭环质粒DNA)会在3Kb-2Kbmarker之间,如果是单酶切产物,则应该在3.5kb的marker附近.

牧采逸1469我们院里要进质粒提取试剂盒?求助 -
贝类紫17827879997 ______ 常规的使用小提试剂盒提取得到的质粒,并不适合用来转染细胞,其原因在于:1.小提质粒浓度较低,一般仅为0.1~0.2ug/ul.而用质粒转染细胞,一般至少需要2~5ug左右,如果使用小提质粒,只能加大上样量,这样对转染操作会有一定影响.2.小提质粒纯度不够,且内毒素含量较高,会对目的细胞有一定毒性,影响转染效率.基于以上原因,如果提取的质粒在用质粒转染目的细胞时,可以选择长沙赢润生物技术有限公司的质粒大量提取试剂盒.

牧采逸1469质粒的提取原理 -
贝类紫17827879997 ______ 质粒提取是指去除 RNA,将质粒与细菌基因组 DNA分开,去除蛋白质及其它杂质,以得到相对纯净的质粒. 目录 一、质粒提取原理 质粒是细胞内的一种环状的小分子DNA,是进行DNA重组的常用载体.作为一个具有自身复制起点的复制单位...

牧采逸1469浓度为0.7ug/ul的质粒,现需要做转化到感受态细胞里,取1ul用dd H2O 稀释到35ul ,浓度为20ng/ul .但是转化只需要2ul左右.那么剩下的稀释的33ul 应该如何... -
贝类紫17827879997 ______[答案] 没必要用TE,-20度冰箱保存长期有效.

牧采逸1469几种感受态细胞制备 的效果比较 -
贝类紫17827879997 ______ 现遗传信息的转移,使受体细胞出现新的遗传性状.将经过转化后的细胞在筛选培养基中培养,即可筛选出转化子(Transformant,即带有异源DNA 分子的受体细胞).目前常用的感受态细胞制备方...

牧采逸1469转化之后复苏感受态细胞能用加了氨苄的LB培养基吗 -
贝类紫17827879997 ______ 不能,如果复苏时间短,会导致比未复苏的浓度还低,以至于培养基上无法长出菌落

牧采逸1469细菌DNA浓度如何换算为DNA拷贝数? -
贝类紫17827879997 ______ 需要知道DNA浓度、DNA片段长度.即可换算成拷贝数1A260 吸光度值=ds DNA 50 ug/ml=ss DNA 33 ug/ml=ss RNA 40 ug/ml核酸浓度=(OD260) x (dilution factor) x [33 或4...