酶切的目的

解佩勉879酶切位点在基因工程中的作用 -
汲常骂13150034036 ______ 提供粘性末端,被限制酶切割以便插入目的基因

解佩勉879请大侠赐教:什么时候用单酶切,什么时候用双酶切?我看文献时是目的基因先与一个质粒载体连接(用一种酶消化后连接),然后再用两种酶切下这段目的... -
汲常骂13150034036 ______[答案] 构建就是个过程嘛 最后能搞出那个质粒 不管你用什么方法都无所谓啦 管他单切双切的

解佩勉879单酶切和双酶切的定义分别是什么?它们有什么不同?做实验的时候要把400bp目的片断连到pcDNA3.1(+)质粒中去:单酶切质粒后用T4 DNA连接酶连接... -
汲常骂13150034036 ______[答案] 单酶切就是只用一个限制性内切酶去切你的质粒,环状的质粒就成为线状的了,但质粒的大小不变双酶切用两个限制性内切酶,质粒上就产生了两个缺口,环状质粒就变成两段线状DNA了.回收你需要的那一段,因为它的两端和你的目...

解佩勉879关于单酶切,片段和载体 -
汲常骂13150034036 ______ 都去磷酸化就无法重组了(重组实际上是DNA末端形成磷酸二脂键,如果没有磷酸基团,则无法形成二脂键) 应该是只对载体去磷酸化,避免载体自连.

解佩勉879酶切实验中是选对甲基化敏感的酶吗 -
汲常骂13150034036 ______ 看你酶切实验的目的,如果是想对检测位点的甲基化水平进行检测,需要选能识别甲基化的酶,否则的话,应该选择对甲基化不敏感的酶.

解佩勉879载体构建酶切位点的问题18—T克隆载体与目的基因连接后,送去测序,Blast之后得到序列,上面含有下一步的酶切位点,请问,目的基因序列包括酶切位... -
汲常骂13150034036 ______[答案] 首先,这个问题存在逻辑颠倒的毛病. 酶切位点的选择一定是要避开目标片段内包含的位点,因为如果不避开到时候酶切就会把目的片段切开.在目的片段和载体之间的酶切位点都是扩增引物带入的.

解佩勉879作为基因的运输工具--运载体,必须具备的条件之一及理由是( ) -
汲常骂13150034036 ______[选项] A. 能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制,以便提供大量的目的基因 B. 具有多个限制酶切点,以便于目的基因的表达 C. 具有某些标记基因,以使目的基因能够与其结合 D. 它的参与才能够使目的基因在宿主细胞中复制并稳定保存

解佩勉879单酶切和双酶切的定义分别是什么?它们有什么不同? -
汲常骂13150034036 ______ 单酶切就是只用一个限制性内切酶去切你的质粒,环状的质粒就成为线状的了,但质粒的大小不变双酶切用两个限制性内切酶,质粒上就产生了两个缺口,环状质粒就变成两段线状DNA了.回收你需要的那一段,因为它的两端和你的目的基因带有互补的黏性末端(当然目的基因也要用这两种酶切才行),在T4DNA连接酶在作用下,它们就连到一起了.你该看看《生物化学》或基因工程方面的书.这都是基本的知识啊.

解佩勉879提完质粒后需要做什么工作?是跑琼脂糖电泳还是做PCR检测?PCR检测和酶切检测各指的什么? -
汲常骂13150034036 ______[答案] 一般先跑琼脂糖电泳检测是否提出了高质量的质粒,然后通过PCR检测所提的质粒是否是目的质粒. PCR检测指用特异引物对目的DNA进行PCR,根据产物判断 DNA是否含有目标序列.酶切检测则是通过对目的DNA上已知酶切位点的酶切,根据产物...