鉴定核酸样品纯度的指标

淳钞炕5033如何使用简单的实验方法检测DNA纯度 -
杨潘邰13594477776 ______ 实验原理 DNA/RNA在260nm处有最大的吸收峰,蛋白质在280nm处有最大的吸收峰,盐和小分子则集中在230nm处.因此,可以用260nm波长进行分光测定DNA浓度,OD值为1相当于大约50μg/ml双链DNA.如用25px光径,用 H2O稀释DNA/...

淳钞炕5033核酸含量的测定 紫外吸收法的原理是什么? -
杨潘邰13594477776 ______ 蛋白质也有紫外吸收,通常蛋白质的吸收高峰在280nm波长处,在260nm处的吸收值仅为核酸的1/10或更低,因此对于含有微量蛋白质的核酸样品,测定误差较小.若待测的核酸制品中混有大量的具有紫外吸收的杂质,则测定误差较大,应设法除去.不纯的样品不能用紫外吸收值作定量测定. 从A260/ A280的比值可判断样品的纯度.纯RNA的A260/ A280≥2.0;DNA的A260/ A280≥1.8.当样品中蛋白质含量较高时,则比值下降.RNA和DNA的比值分别低于2.0和1.8时,表示此样品不纯. 生物帮上面有这方面的详细介绍, 生物问答 http://www.zhibio.com/

淳钞炕5033如何判断提取的DNA是高纯度的双链DNA -
杨潘邰13594477776 ______ 首先:可以通过分光光度计 A 260 / A 280的比值,用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是 280 nm.纯净的样品,比值大于 1.8(DNA)或者2.0(RNA).如果比值低于 1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响.A 230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,较纯净的核酸 A 260 / A 230 的比值大于 2.0.A 320检测溶液的混浊度和其他干扰因子.纯样品,A 320 一般是 0.若要判断完整性--可以先做琼脂糖凝胶电泳,再做限制酶切(要求更高)

淳钞炕5033测定DNA浓度时A230/A260代表什么意思 -
杨潘邰13594477776 ______ 1,A260nm:是核酸最高吸收峰的吸收波长. 最佳测量值的范围为0.1至1.0.如果不在此范围,稀释或浓缩样品,使之在此范围内;如果吸光度小于0.05,检查是否存在操作因素(如移液不准确,样品内有悬浮物等)影响.DNA样品的A260 吸...

淳钞炕5033如何评价总RNA或mRNA的质量 -
杨潘邰13594477776 ______ 1. 相关概念 RNA质检参数OD260/OD280、OD260/OD230的意义. 260、280、320、230nm下的吸光度分别代表了核酸、蛋白质、盐浓度和有机溶剂的值. A230: 测定其它碳源物质,如酚,糖类等. A260:核酸的吸收峰测,测RNA,DNA,...

淳钞炕5033如何用分光光度计测量核酸的浓度 -
杨潘邰13594477776 ______ 方便,灵敏,除了知道含量,还知道组成成分,比如od260/od280低了,就说明蛋白等杂志多了.但是,不知道质量,比如真核rna:跑胶的话有三条带,说明你的rna抽的不错,但是用分光光度计虽能测出rna含量高,但是我们不知道是不是被降...

淳钞炕5033260/230比值过高 -
杨潘邰13594477776 ______ A260:A230是分光光度计测量RNA溶液的浓度出现的数值,表示样品的纯度. 260nm是核酸分子吸收峰的波长,而230nm的波长处如果出现吸收,则最有可能由苯酚等化学基团引起. 1、A260nm:是核酸最高吸收峰的吸收波长,最佳测量值的范围为0.1至1.0.如果不在此范围,稀释或浓缩样品,使之在此范围内;如果吸光度小于0.05,检查是否存在操作因素(如移液不准确,样品内有悬浮物等)影响. 2、A230nm:是碳水化合物最高吸收峰的吸收波长,比值可进行核酸样品纯度评估. RNA的A260/A230比值为2.5.若比值小于2.0表明样品被碳水化合物(糖类)、盐类或有机溶剂污染,需要纯化样品.

淳钞炕5033如何确定样本rna浓度 -
杨潘邰13594477776 ______ 利用实时定量pcr技术,他可以检测pcr过程中dna的浓度:原理是:当在引物作用下dna开始复制时 就会有荧光,然后电脑就会检测到,故复制一次,荧光强度就会增加一次,进而检测到dna的浓度,,