180蛋白marker条带图

宫平永1591western blot里面的marker是什么物质 -
薛桂彬19233515270 ______ 大小已知的蛋白的混合物,一般是预染的.胶上直接能看到蛋白条带.目的蛋白和marker对比就能知道目的蛋白的大小.

宫平永1591什么叫 预染蛋白marker
薛桂彬19233515270 ______ 预染蛋白marker为一些纯化好的蛋白的混合物.这些蛋白混合物与一种蓝色染料共价偶联.可在凝胶电泳时出现强度均匀的8条带.同未预染的蛋白marker相比,预染蛋白marker因与染料共价偶联而在SDS-PAGE电泳时的迁移特性发生某些改变.

宫平永1591做蛋白质免疫印迹时一抗和marker怎么选择? -
薛桂彬19233515270 ______ 一抗要针对你的目的蛋白选择特异性很强的相应抗体就可以了的,一般选择抗体说明书上说专门针对WB使用的抗体,而且一般应选择效价较高的抗体.而MARKER则要取决于你的目的蛋...

宫平永1591怎样才能把HINDIII marker跑好 -
薛桂彬19233515270 ______ 你的这个电泳图基本上都可以看到主条带,从上往下第一条很清晰的条带就是基因组DNA,这条条带除了二号基本是比较完整而明亮的,做下游操作基本没啥问题.二号不是没有,而是量低了.四号和五号可以看到点样孔里面有些明亮的东西,...

宫平永1591蛋白marker的单位t是什么意思 -
薛桂彬19233515270 ______ 蛋白marker是用于蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳中衡量样品分子量大小的标尺,其中混合有已知分子量的蛋白,通过电泳条带所对应的蛋白marker的区间来判断分子量.同理DNA Ladder是用于核酸琼脂糖凝胶电泳衡量样品分子量大小的标尺,用法同蛋白marker.

宫平永1591谁知道怎么利用SDS - PAGE图估算蛋白含量 望大神解惑 -
薛桂彬19233515270 ______ marker每条带有几个μg或ng? 如果不知道这些,单凭经验估计的话,你那条带大概有几μg蛋白.照此计算,你的250μL蛋白总量恐怕达不到mg级. 想精确定量的...

宫平永1591Western Blot为什么必须要用内参 -
薛桂彬19233515270 ______ Western Blot为什么必须要用内参 要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot.因为WesternBlot操作相对简单方便,既可以定性分析表达产物,同时还可以指示目的蛋白量的相对变化.虽然...

宫平永1591哪位高手可以告知 SDS - PAGE 中所用蛋白 Marker 的制作方法,最好详细点,谢谢! -
薛桂彬19233515270 ______ 这个说起来就麻烦了,一般的个人,没有色谱之类的很难做.或者做出来成本太高. 目前有两种方案,一种是买来纯化好的蛋白(SDS-PAGE级别的)自己混合就行了.这种方法简单,但成本高,这种蛋白比较贵.只有少量的蛋白,如BSA,一般的便宜货可以达到SDS-PAGE级(电泳只有一条带).其他的很难. 另一种是自己纯化了,一些粗品自己用离子交换等其他的方法纯化.有些可能得经过几次纯化才能得到理想的蛋白. 如果你是公司,自己想做蛋白 Marker ,后一种方法当然是首选,但得自己摸索,如果是自己用一用,买现成的蛋白 Marker 最合算了. 或者你用量虽然大,但只要其中一两个条带,可以订购那种纯化好的蛋白.

宫平永1591聚丙烯酰胺凝胶电泳25 - 14KD的条带分不开,我的蛋白是14KD,总也跑不出来,MARKER条带也不清楚怎么回事啊? -
薛桂彬19233515270 ______[答案] 如果marker中大分子量蛋白分离已经分开,而小分子量蛋白分不开,应该是胶浓度太低,孔径太大,所以25K和14K的蛋白所受阻力都太小,没有明显区别. 可以增加分离胶浓度,一般15%左右就可以了.

宫平永1591蛋白印迹,膜上只有marker显条带 -
薛桂彬19233515270 ______ 估计是抗体和抗原没有结合上,再用梯形方式摸摸你的抗体稀释比度.最常见的好像就是稀释比度不对了,当然也不排除抗体本身和抗原的原因.反正实验出差错是多种多样的,结果也是多种多样的,如果你能一一把你用的试剂都反省检测查看...