96孔板每一个孔多少细胞
图源Swissbiotech
钛媒体APP注：瑞士连续12年全球创新指数竞争力排名第一，是全球重要的创新策源地，也是中国首个创新战略伙伴关系国，在创新发展和科技金融领域与中国具有极佳互补性。
由Venturelab主办的“瑞士创新100强”，汇聚了最佳“瑞士制造”的初创及成长期科技创新企业，是瑞士最具国际影响力的创新生态标杆。自2011年以来，该榜单每年在瑞士全国范围内评选出100家最具开创性和市场前景的瑞士创新企业和25家最具独角兽潜力的瑞士成长期企业，覆盖生命科学、工程机械、机器人、信息通信、低碳科技、食品科技等领域，今年更是新上榜了41家企业。
为了全方位展示和介绍瑞士最前沿的创新科技，钛媒体APP与Venturelab的中国授权合作方以明科技（InsightTech），合作推出《瑞士创新100强》专题，全面展示瑞士先锋科创生态的全景。
本文为专栏第55期，介绍的SEED Biosciences是2023年《瑞士创新100强》上榜企业，其致力于研发单细胞分离自动移液器。
瑞士生物科技公司SEED Biosciences（以下简称SEED）成立于2018年，该公司开发了一款用于分离单个细胞的自动移液器。该移液器的专利传感吸头基于阻抗原理设计，能快速、轻柔地分离单个细胞，并且感应和记录流过吸头尖端孔的每一个细胞的信息，以即时追溯细胞的单克隆性。
SEED 是瑞士洛桑联邦理工学院（EPFL）的衍生公司，由David Bonzon博士和Georges Muller博士联合创立，二人在博士期间就开发出了自动移液器的第一个产品原型。
图源SEED Biosciences官网
单细胞分离是生物制剂、癌症诊断、干细胞治疗和个性化医疗等许多生物过程工程的关键步骤。对于细胞系开发而言，准确地分离单个细胞并提供可追溯的单克隆性是成功的核心。现有的单细胞分离方法，如有限稀释法等，可能会导致结果的高变异性,且有限稀释实现单细胞分离的成功率仅为22%；而为了追溯细胞单克隆性，实验人员可能还要花费长达50周的时间进行单克隆性验证。
图源SEED Biosciences官网
SEED开发的单细胞自动移液器配有基于阻抗分离技术的专利吸头，能自动、快速、轻柔地分离单个细胞，并且感应和记录流过吸头尖端孔的每一个细胞的信息，实现对细胞单克隆性的即时追溯。
阻抗原理是一种用于测量或控制系统的原理，可通过传感器来测量和控制压力和温度等。SEED自动移液器基于抗阻的专利吸头能以小于0.2 psi的压力处理细胞，保护细胞的完整性和活力。SEED自动移液器就像人手一样轻柔，但比手动效率更高，能在10分钟内将单细胞吸取到96孔板中，在一小时内处理500个细胞。与有限稀释相比，SEED自动移液器的速度快三倍，成本只是其10%。
SEED自动移液器在每个细胞穿过吸头尖端时都会触发独特的电信号，形成峰值并立即记录下来，可即时追溯细胞的单克隆性。电信号的峰值数量代表每个孔内的细胞数量，几个峰值就是几个细胞，而非常小的峰值则代表存在一些碎屑或其他微小的颗粒。在完成移液后，SEED会详细检查电信号，自动标注出不符合标准的孔板信息，帮助研究人员追溯每个孔内细胞的单克隆性。
SEED自动移液器的设计紧凑，采用台式尺寸，能直接放在实验台上并与无菌培养罩集成。其在使用前无需调试或校准设备，用户使用界面也非常简单直观，十分适合实验研究使用。应用场景方面，SEED自动移液器定位于细胞系开发、CRISPR介导的基因编辑、单克隆抗体筛选以及稀有细胞分离。
2020年，SEED完成了100万瑞士法郎的A轮融资，用于扩大科研投入以及移液器的生产。2022年，SEED获得了40万瑞士法郎的Tech Growth贷款，用于推进公司在美国的销售网络发展。2023年，SEED与业界领先的生命科学高性能解决方案供应商Molecular Devices达成合作，后者成为SEED在美国和亚洲的独家商业供应商。通过此次合作，SEED在北美和亚太地区主要市场的销售额预计将增加两倍。
2023年《瑞士创新100强》中文版由以明科技（Insight Tech）荣誉发布。以明科技是《瑞士创新100强》的中国授权合作方，负责《瑞士创新100强》在中国的运营推广并协助榜单项目对华商业合作。作为中欧（瑞士）科技创新投资与产业化运营商，以明科技为瑞士创新和中国产业的双向合作提供投融资和商业拓展服务并开展股权投资业务。
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公虽乐2798如何把细胞铺的更均匀 -
方王梅18111344909 ______ 做细胞生物学实验,细胞铺板大概是最常见的一个实验了.但是有很多人不是很得要领,铺得不是均匀: 要么中间密周围稀,要么周围密中间秃顶.现分享我的实验技巧. 一般 96 孔板我每孔是加 100 微升细胞悬液,从孔的左边靠近底部加入...
公虽乐2798细胞 在96孔板 怎么 挑取单个克隆细胞 -
方王梅18111344909 ______ 无限稀释法,就是铺到96板的一个孔,然后倍数稀释下去,到最后就会有一个细胞的孔,还有就是细胞计数,然后再铺96孔,也会出现一个细胞,但是对于挑单克隆来说,我觉得没必要单个细胞,单个细胞也不容易长起来,虽然挑克隆可能是混转的,但是不会影响实验需求.
公虽乐2798我做的MTT为什么同一组的两孔差别那么大呢?做了两次都是这样! -
方王梅18111344909 ______[答案] 博凌科为产生差别的原因有多种1.在加细胞时,细胞沉淀下来,导致两孔细胞数不同.我们通常用磁力转子对细胞缓慢搅拌,时刻保持细胞处于悬浮状态.2.96孔板在培养箱中,由于湿度不够,而培养箱由于具有一定的温度,使得边缘的孔水分蒸发较快...
公虽乐2798有谁做过基因敲出细胞系吗 -
方王梅18111344909 ______ 基因敲出质粒转染可以构建稳定细胞株 一种是脂质体转染后,单克隆筛选稳定细胞株.另外一种是应用逆转录病毒,慢病毒转染,筛选稳定细胞株.脂质体转染:在转染24小时后,消化细胞并计数.将细胞种到96孔板,保证每个孔2-3个细胞,这样...
公虽乐2798jc - 1检测线粒体膜电位时应注意什么 -
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公虽乐2798做的MTT为什么同一组的两孔差别那么大呢? -
方王梅18111344909 ______ 博凌科为解答:产生差别的原因有多种1.在加细胞时,细胞沉淀下来,导致两孔细胞数不同.我们通常用磁力转子对细胞缓慢搅拌,时刻保持细胞处于悬浮状态.2.96孔板在培养箱中,由于湿度不够,而培养箱由于具有一定的温度,使得边缘的...
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方王梅18111344909 ______ 细胞计数呗.根据所计数量和培养液体积确定接种的数量.铺板或者是传代都有大致的细胞数量的范围,根据这个确定培养液用量就是了.
公虽乐279896孔板如何让其细胞均匀我种96孔板每次都不均匀,有的细胞孔多 有的少,我用15ml离心管稀释后种,每种4个孔就把盖子盖上颠倒几下离心管,可是还不... -
方王梅18111344909 ______[答案] 博凌科为我做96孔板时,把细胞消化下来后,加好培养基,先接种一个孔,看细胞浓度是否合适,合适的话,在接下面的孔.不过要注意,每接几个孔,就将培养瓶适当的晃晃,以求尽量使细胞均匀分布,在取.不要从头接到尾,手里培养瓶一动不动...
公虽乐279896孔板如何让其细胞均匀 -
方王梅18111344909 ______ 博凌科为解答:我做96孔板时,把细胞消化下来后,加好培养基,先接种一个孔,看细胞浓度是否合适,合适的话,在接下面的孔.不过要注意,每接几个孔,就将培养瓶适当的晃晃,以求尽量使细胞均匀分布,在取.不要从头接到尾,手里培养瓶一动不动,细胞会下沉的.希望这些对你有所帮助