pcr检测ct值与拷贝数

蓟颜注3531半定量pcr如何分析基因拷贝数 -
阴齐许13082951344 ______ 电泳后拍照,用图像分析软件测定条带的亮度,然后与标准参照带的亮度进行比较,推算出待测带的拷贝数.

蓟颜注3531real time PCR能测定基因组内某一基因的拷贝数吗 -
阴齐许13082951344 ______ 这个先要把基因组提取出来,然后把基因组做模板,对那个基因进行RT-PCR,如果所研究的某一基因的所有拷贝数都包含在基因组内的话,那么就可以确定原始的拷贝数,当然需要制作一个标准曲线的,(可以把那段基因当做定量的工具,先要准确定量好,浓度大一点的,就是说先定量一个ng级以上的标准模板,可以用紫外分光光度计或是nanodrop等仪器能够检测出的,然后梯度稀释,这样先制作成一个标准的曲线)这样可以根据RT-PCR的扩增Ct值代入到标准曲线里去求出拷贝数,当然模板要全部包含在基因组内.不知道我说的对不对,也就是你所说的实际上就是检测模板的浓度.

蓟颜注3531PCR技术原理是什么? -
阴齐许13082951344 ______ 原发布者:yqjklhq 一.简述PCR基本原理?PCR技术的基本原理 类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物.PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右...

蓟颜注3531实时荧光定量PCR的结果该怎样分析? -
阴齐许13082951344 ______ 1、如果有标准曲线,按照标准曲线计算; 2、一般都是相对量,则用delta delta CT方法来计算; 3、引物或探针降解:可通过PAGE电泳检测其完整性; 4、模板量不足:对未知浓度的样品应从系列稀释样本的最高浓度做起; 5、看CT值是分析...

蓟颜注3531相对定量PCR是用目的基因拷贝数/内参拷贝数,还是用2 - ΔΔCt值去分析?为什么有的文献是直接用前者? -
阴齐许13082951344 ______ 2-ΔΔCt法.定量的作用是比较两个或多个样本(前提是细胞数目要相等)基因表达量差异的,基因拷贝数/内...

蓟颜注3531CT值的基本简介是什么?
阴齐许13082951344 ______ Ct介绍值的含义是:CT值代表X线穿过组织被吸收后的衰减值.为了定量衡量组织对于X光的吸收率,Hounsfield定义了一个新的标度“CT值”.为了表示对他的敬意,后...

蓟颜注3531怎样检测pcr板封膜后孔与孔之间没有相互污染 -
阴齐许13082951344 ______ 目测是最基本的,首先要保证孔与孔之间没有明显的液滴,或是液滴干掉留下的印记.如果在封口膜和板之间已经能看到液体(不在PCR管里面的),就说明已经有样品溢出,可能已经污染了.其他的方法就只有通过PCR来进行验证了,看看不同的孔之间有没有相互干扰的情况,因为通常情况下,如果溢出不太严重,通常是周围几个孔发生污染,而不会是全部孔都污染的.

蓟颜注3531实时定量PCR基本原理如何? -
阴齐许13082951344 ______ 实时PCR(real—time polymerase chain reaction)又称荧光定量PCR或TaqMan PCR,是美国PE公司(Perkin Elmer)于1995年研制出的一种新的核酸定量技术.该技术在常规PCR基础上运用荧光能量传递(fluorescence resonance energy ...

蓟颜注3531数字PCR检测方法如何选择? -
阴齐许13082951344 ______ 数字PCR即Digital PCR(dPCR),它是一种核酸分子绝对定量技术.相较于qPCR,数字PCR可让你能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的绝对定量. 在定量PCR时,我们常常纠结一个问题,究竟是相对定量还是绝对定量呢?如今,你...