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pcr空白对照有条带

来源:baiyundou.net   日期:2024-09-26

祝斩弯3737提dna没有跑出目的条带,但是做pcr有条带,为什么 -
滑琬桂19166511180 ______ 可能是DNA浓度很低(并不是没有),电泳看得不清晰.但是PCR将目标基因的浓度大大提高,跑电泳自然就看得见了.

祝斩弯3737PCR后电泳,除了少量引物二聚体外出来了两条带,但是我的目的条带只有一条,而且我的DNA空白对照也出了一条 -
滑琬桂19166511180 ______ 那就是污染了,带入了其他模板. 此种情况,建议重新做,有超净台就用超净台,没有超净台就把试验台用70%酒精擦干净,点个酒精灯,带个口罩(至少别说话).加样时注意点. 如果这样阴性对照还是有带,就说明是试剂污染,需要更换所污染的试剂. 若有疑问,欢迎继续讨论,祝实验顺利!

祝斩弯3737PCR时,跑了8个样本,有5个有条带,另外3个没有,可能有哪些原因造成? -
滑琬桂19166511180 ______ 如果八个样品是同一个物种同一对引物,PCR试剂也用的是一样的,那么可能是模板浓度过高或者过低,降解,或者是模板中杂质过多,或者是模板被污染(抑制剂,或者提DNA有东西没除干净,或者外来污染),或者是DNA没提好(片段被打碎,质量差等等),或者是反应条件不是最优条件,质量稍差的模板难扩出来

祝斩弯3737PCR跑出非特异条带?怎么办? -
滑琬桂19166511180 ______ 可能是水污染了,另外还有你操作及操作环境的原因. 建议ddH2O灭菌后分装到2ml离心管放入-20°备用,每次用一管 如果容易污染的话,建议你到超净台中操作PCR过程

祝斩弯3737大量pcr一扩增,为什么负对照会有带 -
滑琬桂19166511180 ______ PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及, ④PCR循环条件.寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究.模板:①模板中含有杂蛋白质,②模板中含有Taq酶抑制剂,③模板中蛋白质没有消 化除净,特...

祝斩弯3737酶切后PCR一条带都没有 但原质粒PCR有条带 为什么 -
滑琬桂19166511180 ______ 什么酶呢?最后酶切组的电泳条带是弥散,是只有质粒条带没有酶切产物条带,还是干脆就是空白? 如果是弥散,最有可能的是所用的酶的反应条件要求比较严格,因为掌握不当而产生了星号活性,导致把质粒切碎了.建议查一下所用酶的酶切条件. 如果是有质粒条带而没有短片段条带,也就是说没切开了.可能酶切位点发生了突变,也可能是酶失活了. 如果是空白...我也不知道怎么回事儿了...再重复一次吧. 如果认为之前的步骤都没什么问题,不如直接送测序.比酶切检验还要精确呢. 祝实验顺利.

祝斩弯3737PCR扩增产物电泳后显示的条带说明什么? -
滑琬桂19166511180 ______ 说明目的基因已经扩增得到

祝斩弯3737为什么我的PCR阴性对照总是跑出阳性条带 -
滑琬桂19166511180 ______ 实验室体系或者环境有污染,把所有的物料都换了,同时换一个房间重做,试试吧

祝斩弯3737做逆转录PCR,扩增出的条带怎样区分是残留基因组DNA还是反转录得到的cDNA得到的结果 -
滑琬桂19166511180 ______ 区分你的模板里面是否有基因组污染的方法:在做逆转录反应的同时,做一个阴性对照,其他所有都和实验组相同,除了不加入逆转录酶.得到RT-PCR产物后跑胶,如果该阴性对照里也扩增出来明显条带的话,你的模板就是有基因组污染,否则就是正常.

祝斩弯3737阴性对照和空白对照的8个连在一起的小管叫什么?那个荧光PCR用来
滑琬桂19166511180 ______ 阳性对照就是你所用的Marker,根据与你所得到的条带与Marker上的条带对应,查出这一条带的长度,可以得出片段的大小,因而可以看出P出的产物是否是你所需要的.阴性对照就是做PCR时的空白管,除了模板不加之外,其成分与其他管一样,P完后电泳,正常状态下无任何条带.###选择你已知的序列作一个阳性质粒,每次PCR时带着,用不相关的基因或质粒做阴性对照

(编辑:自媒体)
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