qrt-pcr步骤

索审严1486在qRT - PCR中miRNA的颈环引物是怎么设计的,实验需要注意哪些事项 -
赵惠春17588969589 ______ LZ说的是下游引物吧,下游引物是针对反转录时的茎环引物设计的;LZ首先要知道你的反转录引物的序列,然后设计与反转录引物的非茎环配对的下游定量引物,上游引物则是特异性结合miRNA的引物

索审严1486求助miRNA QRT - PCR引物设计 -
赵惠春17588969589 ______ miRNA引物设计(茎环法+染料法检测) 设计方法:通用茎环后端加miRNA后面6个碱基的反向互补序列为反转录引物,正向引物为miRNA去除后面6个碱基的序列,反向引物在茎环上.反转录茎环通用序列:...

索审严1486谁知道RT - PCR怎么做啊?谢谢 -
赵惠春17588969589 ______ RT-PCR步骤 总RNA提取 1. 取200mg组织,放到1.5ml EP管中,加入1ml Trizol剪碎. 2. 震荡30s. 3. 加0.2ml氯仿,剧烈摇动30s,室温3min. 4. 12000*g,4℃ 离心,15...

索审严1486qrt - pcr目标基因有多种引物 如何选择 -
赵惠春17588969589 ______ 可以选2-3对引物调试一下,看看那个Ct值比较低,就用哪一个,正常情况下,Ct值都差不多

索审严1486定量PCR的质量评价 -
赵惠春17588969589 ______ RNA 定量的程序很多, 比较用了Ribogree,Agilent BioAnalyser,spectrophotometer,Nanodrop and the BioRad Experion 来定量同样的样品.结果显示没有哪两种方法得到同样的分析数据.所以用不同的方法进行定量是不明智的.因此,我们需要...

索审严1486请问什么是实时荧光定量?
赵惠春17588969589 ______ 实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)/QRT-PCR,是指在PCR反应体系中加入荧光标记物,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过扩增曲线对未知模板进行定量分析的方法.荧光定量PCR不仅实现真正实现了绝,对定量,而且具有灵敏度和特异性、高能实现多重反应、自动化程度高、无污染、实时和准确等特点.

索审严1486做RT - PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因 -
赵惠春17588969589 ______ 内参就是在cDNA里面的啊 比如你有三种反转录的cDNA 就分别用内参的引物做三组 和目标基因一起做就行了 不过是要单独加 不是和目标基因的引物加在一个孔里

索审严1486孤立肿瘤细胞群和微小转移是怎样的?
赵惠春17588969589 ______ 在TNM分期中,微小转移定义为直径大 于0.2mm且小于或等于2.0mm的转移病 灶.... 的特定技术(例如多组织水平、免疫组织化 学法以及qRT-PCR)作为常规的局部淋巴...

索审严1486primer5.0引物设计所用序列为什么是mRNA?做qRT - PCR时设计引物是直接将NCBI的mRNA区域中CDS区序列拷贝到primer5.0里面,可是做qRT - PCR前不是... -
赵惠春17588969589 ______[答案] 设计引物的时候已经用到了两条链吧,一条链设计前引物,另一条设计后引物.RT-PCR得到的是双链cDNA,所以用mRNA设计或者用互补链设计都可以啊,因为着两条链都会用到,只要把U换成T,是绝对可以P出来的.

索审严1486多发性骨髓瘤中单个核细胞包括哪些细胞?多发性骨髓瘤中单个核细胞包
赵惠春17588969589 ______ 摘 要:目的:研究多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者骨髓单个核细胞(... 方法:采用qRT-PCR检测39例初诊MM患者(MM组)和5例缺铁性贫血(iron deficiency ...