qrt-pcr和rt-pcr区别

赫呼霄775在qRT - PCR中miRNA的颈环引物是怎么设计的,实验需要注意哪些事项 -
傅王佩17752669122 ______ LZ说的是下游引物吧,下游引物是针对反转录时的茎环引物设计的;LZ首先要知道你的反转录引物的序列,然后设计与反转录引物的非茎环配对的下游定量引物,上游引物则是特异性结合miRNA的引物

赫呼霄775RT和qPCR可以是一个引物吗 -
傅王佩17752669122 ______ qrt pcr一般指以rna为模板,先逆转成cdna,再进行qpcr 而qpcr一般是泛指,既可以当它是qrtpcr,也可以指他是专门定量检测dna的 比如检测细菌的16s,那不需要做rt,直接用qpcr检测定量即可.

赫呼霄775qrt - pcr目标基因有多种引物 如何选择 -
傅王佩17752669122 ______ 可以选2-3对引物调试一下,看看那个Ct值比较低,就用哪一个,正常情况下,Ct值都差不多

赫呼霄775qrt - pcr重复同时做还是分开 -
傅王佩17752669122 ______ 同时做最好,分开几次上机会增加误差,一般都是能在一块板上完成就一次完成.

赫呼霄775当用qRT - PCR验证了目的基因的表达后 还有必要用western做验证吗 -
傅王佩17752669122 ______ 恩 一般都是这样的 比如你这个处理降低了该基因的mRNA的表达量 但可能增强了它的翻译 所以表达出来的蛋白总量还是没有变 所以还是需要做的

赫呼霄775请问什么是实时荧光定量?
傅王佩17752669122 ______ 实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)/QRT-PCR,是指在PCR反应体系中加入荧光标记物,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过扩增曲线对未知模板进行定量分析的方法.荧光定量PCR不仅实现真正实现了绝,对定量,而且具有灵敏度和特异性、高能实现多重反应、自动化程度高、无污染、实时和准确等特点.

赫呼霄775谁知道RT - PCR怎么做啊?谢谢 -
傅王佩17752669122 ______ RT-PCR步骤 总RNA提取 1. 取200mg组织,放到1.5ml EP管中,加入1ml Trizol剪碎. 2. 震荡30s. 3. 加0.2ml氯仿,剧烈摇动30s,室温3min. 4. 12000*g,4℃ 离心,15...

赫呼霄775求助miRNA QRT - PCR引物设计 -
傅王佩17752669122 ______ miRNA引物设计(茎环法+染料法检测) 设计方法:通用茎环后端加miRNA后面6个碱基的反向互补序列为反转录引物,正向引物为miRNA去除后面6个碱基的序列,反向引物在茎环上.反转录茎环通用序列:...

赫呼霄775多发性骨髓瘤中单个核细胞包括哪些细胞?多发性骨髓瘤中单个核细胞包
傅王佩17752669122 ______ 摘 要:目的:研究多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者骨髓单个核细胞(... 方法:采用qRT-PCR检测39例初诊MM患者(MM组)和5例缺铁性贫血(iron deficiency ...

赫呼霄775[PCR,RT - PCR,质粒构建,求助]PCR的时候用普通Taq酶能P出的东西,为什么换了高保真酶之后,同样的循环条件为什么P不出条带? -
傅王佩17752669122 ______[答案] 其实我在实验中也会经常遇到各种各样的问题,一次机会我结识了威斯腾生物,经常有问题我会向他们请教,虽然我没找他们做过,但是我提到的一些技术上的问题他们都能有效的解答,态度也挺好的.