sds-page电泳图怎么看

蛋白质分子量是了解蛋白质结构、功能和相互作用的重要参数。准确测定蛋白质分子量对于生物学研究、药物研发和临床诊断都至关重要。SDS-PAGE法（聚丙烯酰胺凝胶电泳）是一种常用的蛋白质分子量测定方法，其基于蛋白质在电场中的迁移速度与分子量之间的关系。本文将详细介绍SDS-PAGE法的原理、步骤和应用，并与其他常用方法进行比较，旨在帮助科研人员在蛋白质分子量分析中选择适当的方法并取得准确可靠的结果。

1.SDS-PAGE法的基本原理

SDS-PAGE法利用SDS（十二烷基硫酸钠）对蛋白质进行解性和变性处理，使其带有负电荷，并通过电场力使蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中迁移。根据蛋白质分子量与迁移距离之间的关系，可以推断出蛋白质的相对分子量。

2.SDS-PAGE法的步骤

（1）样品准备：将待测蛋白质样品进行解性和变性处理，并添加SDS和还原剂。

（2） 凝胶制备：制备聚丙烯酰胺凝胶，根据待测蛋白质的分子量范围选择合适的凝胶浓度和孔径。

（3） 电泳：将样品加载到凝胶孔中，施加电场使蛋白质迁移，根据需要进行短程或长程电泳。

（4）染色和可视化：通过染色方法（如Coomassie蓝染色）或蛋白质标记剂（如荧光染料）将蛋白质可视化。

3.SDS-PAGE法与其他方法的比较

与其他蛋白质分子量测定方法相比，SDS-PAGE法具有以下优点：简单易行、广泛适用于各种样品类型、高分辨率和较好的准确性。与基于质谱的方法相比，SDS-PAGE法的设备和试剂成本较低，并且对于中小分子量蛋白质的分析更为适用。

4.实践指南

为了获得准确可靠的蛋白质分子量结果，科研人员应注意以下几点：样品预处理的一致性、选择适当的凝胶浓度和孔径、标准蛋白的选择和加载量的控制、准确的迁移距离测量以及合适的染色和可视化方法。

SDS-PAGE法是一种常用的蛋白质分子量测定方法，具有简单易行、高分辨率和较好的准确性等优点。与其他方法相比，它在设备和试剂成本方面更为经济，特别适用于中小分子量蛋白质的分析。遵循最佳实践指南可以帮助科研人员获得准确可靠的蛋白质分子量结果。在蛋白质研究和应用中，SDS-PAGE法将继续发挥重要作用，为我们深入了解蛋白质的结构和功能提供关键支持。

荆峰谢5156SDS - PAGE电泳的原理是什么? -
江应静19175437930 ______ 作用原理聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构,具有分子筛效应,它有两种形式,一种是非变性聚丙烯酰胺凝胶,蛋白质在电泳中保持完整的状态,蛋白在其中依三种因素分开:蛋白大小,形状和电荷. 而SDS-PAGE仅根据蛋白分子量亚基的不同...

荆峰谢5156SDS - PAGE电泳的基本原理? -
江应静19175437930 ______ SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS(十二烷基硫酸钠),SDS会与变性的多肽,并使蛋白带负电荷,由于多肽结合SDS的量几乎总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关,因此SDS多肽复合物在丙稀酰胺凝胶电...

荆峰谢5156SDS电泳为什么被叫做SDS - PAGE? -
江应静19175437930 ______ SDS-PAGE是对钠十二烷基的硫酸盐(SDS)聚丙烯酰胺凝胶电泳法的缩写 十二烷基硫酸钠(SDS):阳离子去污剂,作用有四:去蛋白质电荷、解离蛋白质之间的氢键、取消蛋白分子内的疏水作用、去多肽折叠. 聚丙烯酰胺的作用:丙烯酰胺与为蛋白质电泳提供载体,其凝固的好坏直接关系到电泳成功与否,与促凝剂及环境密切相关;

荆峰谢5156sds - page电泳怎么跑不出东西来! -
江应静19175437930 ______ 首先,你用实验确定该蛋白表达了吗?比如在DNA水平、RNA水平是否验证? 其次,阳性菌虽然比阴性菌破壁困难,但破壁的方法还是很多的,关键是破壁的同时不要让你的目的蛋白损失或降解; 最后,仔细分析你的电泳各个环节时候有问题.阴性和阳性对照样品一定要有,分析起来很容易 祝试验早日成功!

荆峰谢5156SDS - PAGE电泳图,两边是marker,中间两个是样品,个人觉得跑胶现象不明显,如何来分析样品的分子量范围? -
江应静19175437930 ______ 同意楼下,不能看到很明显的条带,有可能是蛋白在提取过程中降解了.建议提取过程中使用蛋白酶抑制剂,低温操...

荆峰谢5156sds - page电泳 -
江应静19175437930 ______ 可能有以下几个原因: 一:上样缓冲液,用分子克隆上的配方做一次试试看(你所用的缓冲液是不是很久了?) 二:如果你染色,脱色都没有问题,PAGE胶是不会说谎的 三:不知道你是在哪种波长下所测得有数值?280nm是共轭双键的吸收波长,很多物质都会有吸收,如果做亲和层析时咪唑也有吸收,RNA在280下也有吸收,可能你测得的是RNA? 最后,想问问你的蛋白质Marker有没有显示条带?

荆峰谢5156SDS - PAGE电泳的工作原理 -
江应静19175437930 ______[答案] SDS-PAGE:蛋白质的相对分子质量决定了SDS-蛋白复合物在凝胶电泳中的迁移率,聚丙烯酰胺凝胶中的去垢剂SDS带有大量的负电荷,与之相比,蛋白质所带电荷量可忽略不计.因此,蛋白质在SDS凝胶电场中的运动速度和距离完全取...

荆峰谢5156做好SDS - PAGE电泳检测的关键是什么? -
江应静19175437930 ______[答案] 丙烯酰胺的有效期,配胶时要混匀充分才灌胶,灌胶时候时间要够快沿边加入,液封时要轻,凝胶凝固的时间够长(分离胶凝40分钟以上,浓缩胶凝半小时以上),在凝胶的期间不要移动凝胶,上样不要溢出,电泳电压不要过高

荆峰谢5156SDS - 聚丙烯酰胺凝胶电泳实验 -
江应静19175437930 ______ 你的样品是不是浓度太高了,所以蛋白质都聚集沉淀了?你也可以先检查一下电路是否有问题,不排除是电泳电源不好使;另外你的电流有点高,可能是电流大导致过热,凝胶变性

荆峰谢5156在SDS - PAGE电泳前,蛋白质样品应该如何处理 -
江应静19175437930 ______[答案] 这个是看你的目的了,如果你要跑还原性电泳,那么样品需要用含有β-巯基乙醇的loading buffer沸煮5分钟,这样使蛋白间的二硫键在还原剂β-巯基乙醇的作用下被打开,得到的是蛋白的一级结构.而非还原的电泳就是在loading buffer中不加入还原剂β-...