shrna敲低原理

索荆禄1100求基因沉默和质粒转染详细区别? 包括两者原理、实验步骤区别联系.. 有满意回答者另有100财富奖励!! -
政施以18441953166 ______ 简略回答 不懂追问: 1. 基因沉默一般用siRNA或者质粒 , siRNA是双链RNA,其中一条链与靶基因的mRNA序列互补.将此双链RNA转染至细胞 能够沉默靶基因的表达 shRNA质粒 转染进细胞能够表达shRNA(发卡结构) 和双链RNA差不多 只不过是发卡结构.发卡的一条臂与靶基因mRNA互补. shRNA质粒可以做稳定转染 达到持续干扰的效果 人工合成的siRNA不能稳定转染 2. 转染. 就是通过转染试剂 将外源核酸(比如siRNA 质粒等)导入细胞的过程

索荆禄1100shRNA和miRNA有什么区别? -
政施以18441953166 ______ shRNA干扰载体构建:短发卡RNA (shRNA) 是可以克隆到表达载体并表达短的干扰RNA (siRNA, 19-21个核苷酸的RNA 双链)的DNA分子.我们可根据靶标设计短发卡RNA (shRNA)序列并将其克隆到特定载体上.

索荆禄1100mRNA和shRNA什么关系? -
政施以18441953166 ______ shRNA是short hairpin RNA 的缩写.翻译为“短发夹RNA”.shRNA包括两个短反向重复序列,中间由一茎环(loop)序列分隔的,组成发夹结构,由pol Ⅲ启动子控制.随后在连上5-6个T作为RNA聚合酶Ⅲ的转录终止子.他们之间的关系不清楚,我知道hnRNA是mRNA的前体

索荆禄1100如果一个基因的表达量本身就很低,再敲降该基因有意义吗?q - pcr
政施以18441953166 ______ 有意义的.基因的表达还需要考虑RNA的稳定性,和蛋白酶的催化活性强弱.另外,基因的转录高低与生长环境(例如,培养基成份和温度),与时空性(不同组织和生长阶段)有关.你可以先NCBI搜索该基因的同源基因功能,再作判断.

索荆禄1100scrambled - shrna是什么意思 -
政施以18441953166 ______ scrambled-shrna 炒shRNA shrna 网络 短发夹核糖核酸;短发夹RNA;短发夹状RNA;短发夹环RNA 百度百科 shRNA是short hairpin RNA 的缩写.翻译为“短发夹RNA”.shRNA包括两个短反向重复序列.

索荆禄1100shRNA设计 5'端通常有个CCGG(比如sigma的shRNA库序列),这个序列的作用是什么?
政施以18441953166 ______ 摘自百度百科 4. 在启动子下游的酶切位点下方紧连一个C,使插入片段和启动子有一定空间间隔以确保转录的发生. 5. ShRNA目的序列的第一个碱基必须是G以确保RNA聚合酶转录.如果选择的目的序列不以G开头,必须在紧连正义链的上游加一个G.

索荆禄1100crisper能用于细菌基因敲除吗 -
政施以18441953166 ______ 近年来的研究发现,一些小的双链RNA可以通过促使mRNA降解,高效、特异的阻断体内特定基因表达.称为RNA干扰(RNA interference,RNAi).由于RNAi可以作为一种简单有效的代替基因敲除的工具,在功能基因组学研究、基因治疗等领域得到了越来越多...

索荆禄1100shRNA和miRNA有什么区别 -
政施以18441953166 ______ 在低等生物中同时存在miRNA和siRNA,在高等生物中只有miRNA,但可以通过外源转入siRNA起作用miRNA的结合位点通常位于3`UTR,而siRNA不确定miRNA和其target是不完全互补,一般只有2-8位的碱基...

索荆禄1100shrna载体酶切后需要做什么处理 -
政施以18441953166 ______ 两种质粒是可以同时进入同一个感受态细胞的,比如构建腺病毒载体时.但是要求两种质粒进入同一个感受态细胞,转化效率非常低,一般需要电转或者其他的特殊处理.由于质粒的不兼容性,拥有同种复制子的质粒不能在同一细胞内稳定共存,经过几代的复制,会质粒丢失,所以并不是任何两个或两个以上质粒都可以在同一细胞内稳定存在,但是可以同时进入.稳定转染的细胞株,就是转染后质粒可以稳定整合到基因组上不会因细胞分裂而丢失.区别于质粒瞬时转染不能长时间保留质粒在细胞里.