shrna构建

阎兔树1901shRNA的制备过程 -
阙谈忽13787292129 ______ 短发夹RNA质粒的制作比较麻烦 一般都是送出去做的 具体的过程给你个网页参考下 http://www.easy-biomed.com/service/ShowArticle.asp?ArticleID=9

阎兔树1901小白求助:shRNA质粒稳转细胞一般能转几个进去 -
阙谈忽13787292129 ______ 两种质粒是可以同时进入同一个感受态细胞的,比如构建腺病毒载体时.但是要求两种质粒进入同一个感受态细胞,转化效率非常低,一般需要电转或者其他的特殊处理. 由于质粒的不兼容性,拥有同种复制子的质粒不能在同一细胞内稳定共存,经过几代的复制,会质粒丢失,所以并不是任何两个或两个以上质粒都可以在同一细胞内稳定存在,但是可以同时进入. 稳定转染的细胞株,就是转染后质粒可以稳定整合到基因组上不会因细胞分裂而丢失.区别于质粒瞬时转染不能长时间保留质粒在细胞里.

阎兔树1901北京生物公司,著名的生物公司,其综合服务有哪些? -
阙谈忽13787292129 ______ 北京最著名生物公司之一:北京三博远志生物技术有限责任公司 北京三博远志生物技术有限责任公司,2000年成立,是北京市高新技术企业.公司主营业务DNA合成、DNA测序、基因工程技术服务、分子生物学试剂盒.北京三博远志是国内基...

阎兔树1901慢病毒包装的原理 -
阙谈忽13787292129 ______ 病毒包装的原理,就是有遗传物质有外壳蛋白,在细胞内可以指导二者包成病毒.腺病毒扩增,也只能在293A里扩增,其他的细胞不行.慢病毒载体多是由HIV改造的,野生型的慢病毒载体是可以复制的,但是用于实验室就只能通过改造使其变为...

阎兔树1901为什么要构建病毒载体 -
阙谈忽13787292129 ______ 1.慢病毒可以转染难转染的细胞,可转染的细胞种类多 2.慢病毒载体所携带的目的基因可以整合入细胞基因组,稳定长期表达.这样,shrna可以长时间的knock down目的基因 3.目前所用的慢病毒安全性很高,满病毒包装系统的安全性也很高 4.此技术已经较为成熟

阎兔树1901shRNA和miRNA有什么区别 -
阙谈忽13787292129 ______ 在低等生物中同时存在miRNA和siRNA,在高等生物中只有miRNA,但可以通过外源转入siRNA起作用miRNA的结合位点通常位于3`UTR,而siRNA不确定miRNA和其target是不完全互补,一般只有2-8位的碱基...

阎兔树1901真核质粒转染与脂质体转染有什么不同? -
阙谈忽13787292129 ______ 转入质粒的原理:质粒上连的片段转录后能够自身互补形成双链(shRNA),在细胞内被细胞自己剪切成siRNA. 两种转染方法在功能上是一致的.但是siRNA转染以后发挥作用的时间较短,用于短期抑制试验(一般维持一周以内).而因为质粒存在于细胞内比较稳定(载体上含有抗生素标记,可以筛选),能够持续表达产生shRNA,然后不断产生新的siRNA,因此维持作用的时间长(可以超过两周). 另外用质粒还可以同时转入报告基因作为对照,确定质粒确实已经转染进去了.

阎兔树1901如何稳定敲低特定的miRNA -
阙谈忽13787292129 ______ miRNA通过与转录本的相互作用,关闭或抑制基因的表达.最近的研究表明它们影响了约三成的基因.miRNA在多个组织中差异表达,这就让表达图谱分析成为研究的重点.同时,miRNA的过表达和抑制也是近年来常用的研究方法. 然而, ...

阎兔树1901任何目的基因都能设计出相应shRNA吗? -
阙谈忽13787292129 ______ 理论上可以,但沉默效果就不好说了.

阎兔树1901抑制基因的方法有哪些?20分 -
阙谈忽13787292129 ______ 抑制基因表达的方法主要可以从三个水平上来进行1:knock-out(基因敲除).这是从基因组水平上进行的,基因内部插入一段较长的DNA序列,或是人为使基因的序列改变,采用的实验方法可以使用基因打靶或者是T-DNA插入.这些方法感兴趣...