sirna沉默实验流程

尚冯杨4063鼠源sirna可以沉默人源细胞蛋白表达吗 -
戈玉俘15999076550 ______ 鼠源sirna可以沉默人源细胞蛋白表达 动物组织的细胞之间相连的物质的化学本质是蛋白质,所以用胰蛋白酶或胶原蛋白酶对动物组织进行处理,使其水解成小分子物质,从而使动物组织分散成单个细胞以制成细胞悬液.因此,胰蛋白酶或胶原蛋白酶作用于蛋白质中连接两个氨基酸分子的化学键即肽键.理论上是可以的.siRNA一般只沉默一个或者几个有限的基因,一般不会影响细胞的生长,只要你沉默的基因不是细胞贴壁相关的基因,不影响这些蛋白的表达,肯定是可以贴壁的.用细胞做siRNA试验,一般也不会去沉默那些能影响细胞生长的关键基因,否则,结果就没法判断.

尚冯杨4063siRNA为什么是一种高效特异的基因缺失性研究工具? -
戈玉俘15999076550 ______ Small interfering RNA (siRNA):是一种小RNA分子(~21-25核苷酸),由Dicer(RNAase Ⅲ家族中对双链RNA具有特异性的酶)加工而成.SiRNA是siRISC的主要成员,激发与之互补的目标mRNA的沉默.RNA干涉(RNAinterference,RNAi)是指内源...

尚冯杨4063RNA干扰的实验主体是什么?
戈玉俘15999076550 ______ (如果克隆到载体后就可以了)RNA干扰RNA干扰主体实验编辑siRNA表达载体构建好后,即可进行RNA干扰主体实验

尚冯杨4063细胞用siRNA沉默后可以消化再点板么?可以贴壁么? -
戈玉俘15999076550 ______[答案] 理论上是可以的.siRNA一般只沉默一个或者几个有限的基因,一般不会影响细胞的生长,只要你沉默的基因不是细胞贴壁相关的基因,不影响这些蛋白的表达,肯定是可以贴壁的. 用细胞做siRNA试验,一般也不会去沉默那些能影响细胞生长的关键...

尚冯杨4063求助siRNA转染方法 -
戈玉俘15999076550 ______ 三到五小时. siRNA (Small interfering RNA),是一种小RNA分子(~21-25核苷酸),由Dicer(RNAase Ⅲ家族中对双链RNA具有特异性的酶)加工而成.SiRNA是siRISC的主要成员,激发与之互补的目标mRNA的沉默.

尚冯杨4063rnai小鼠体内实验时,尾静脉注射siRNA后,怎样观察肝细胞和脾细胞摄取siRNA的比例?
戈玉俘15999076550 ______ siRNA用荧光标记.注射后在规定时间去肝和脾,用流式细胞仪计数阳性细胞

尚冯杨4063RNA干扰现象? -
戈玉俘15999076550 ______ RNA干扰是基因转录后沉默的一种方式,是生物界古老而且进化的高度保守的现象之一.RNAi是通过siRNA介导的特异性高效抑制基因表达途径,由siRNA介导识别并靶向切割同源性靶mRNA.RNAi具有生物催化反应特...

尚冯杨4063...siRNA是人工体外合成的,通过转染进入人体内,但是我有个疑问,siRNA不是在RNA沉默复合体上经过剪切产生的小片段双链RNA吗?怎么又成了人工... -
戈玉俘15999076550 ______[答案] siRNA发现的时候是双链RNA剪切而来的,大约19nt的双链siRNA 随后在RNA沉默复合体中行驶指导RNA沉默作用 组合化学可以固相合成核酸成19nt的RNA 为了吻合siRNA的作用机理 特意合成配对的RNA双链 模拟siRNA作用 www.sirna.cn

尚冯杨4063miRNA和siRNA -
戈玉俘15999076550 ______ MicroRNA (miRNA):是含有茎环结构的miRNA前体,经过Dicer加工之后的一类非编码的小RNA分子(~21-23个核苷酸).成熟的miRNA结合到与其互补的mRNA的位点通过碱基配对调控基因表达.与靶mRNA不完全互补的...

尚冯杨4063想了解miRNA和siRNA的基本介绍及区别,生物技术专业的论坛有哪些
戈玉俘15999076550 ______ 1998年,Andrew Fire和Craig Mello提出了一项新技术:通过dsRNA诱导特异基因的沉默,即所谓RNAi.2000年,Amy Pasquinelli等将lin-4和let-7作小时序RNAs(stRNAs,mall temporal RNAs). RNA干涉(RNAi)在实验室中是一种强大的实验工...